纤曲的质量检验

更新于 2026年10月10日 版权声明
4.纤曲的质量检验

1)微生物的检查

(1)外观:本菌系属绿色木霉的变异株,故斜面或三角瓶的外观正常者,菌丝较稀而短,色泽草绿而均匀(有时出现白色再生菌丝)。

(2)镜检:气生菌丝呈树枝状,有横隔,椭圆形的孢子成簇地长在小梗上。

(3)孢子数:取鲜种曲一克,加水10毫升,捣匀后取样,用血球板计数,正常者在2.0亿孢子数/克鲜曲以上。

2)纤酶活力的测定

(1)试剂的准备:

① 0.5%CMC缓冲溶液:取1%CMC原液100毫升,加水80毫升,pH 4.6的0.1 mol/L的醋酸缓冲液20毫升,充分摇匀,即可。

② NS液,称取3,5-二硝基水杨酸6.3克,氢氧化钠21克,酒石酸钾钠182克,重蒸酚5克,无水亚硫酸钠5克,搅拌溶于1 000毫升蒸馏水中,用棕色试剂瓶保存,稳定3~5天,用葡萄糖标定后,即可使用。

③ 1×3厘米2滤纸条:取新华一号滤纸,截成1厘米宽,3厘米长的小纸条备用。

(2)酶液的制取:称取相当于一克干曲的鲜曲,加水35毫升,30℃浸泡1小时,然后,3 000转/分离心5分钟,上清液即为酶液。(https://www.daowen.com)

图示

(3)测定:

①滤纸破碎酶活:(代表Cl酶,表示分解天然纤维素的能力)。取上述酶液4毫升,加pH 4.6醋酸缓冲液1毫升于(15×150)mm[2]的试管中,摇匀,投入1×3厘米2的滤纸条一张,放在40℃水浴锅中作用2小时,然后取出试管,顺倒摇二次,观察滤纸的破碎程度,以一点不破为“0”象“▯”,以稍破为“+”象“图示”或“图示”。以破碎成小块为“图示”,象“图示”或“图示”,以全破为“图示”象“图示”。介于二者之间的尚有“⊥”“卄”“⧻”等等。

三角瓶,种子,要求⧻。

通风曲,要求卄-⧻。

②CMC酶活(代表Cx酶,表示分解可溶性纤维素的能力)。

取上述酶液,再稀释20~40倍(三角瓶种曲,稀释40倍,通风曲稀释20倍)。然后,吸0.1毫升,加0.5%的CMC缓冲溶液2.5毫升。40℃作用半小时,取出,加DNS液2.5毫升,沸水浴中加热5分钟,立即冷却。绿光(540 mm)下比色。0·D要求在1.0左右(相当于葡萄糖400微克左右)。

③有时,还测定滤纸糖和酶液糖等供参考。

滤纸糖:将上述①项的测定液离心,吸取上清液0.5毫升,加蒸馏水2.0毫升,DNS液2.5毫升,摇匀,沸水浴上加热5分钟,立即冷却,绿光下比色。

酶液糖:用酶液代替滤纸糖中上清液,余同上。

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