一、放射免疫技术

一、放射免疫 技术

放射免疫技术以放射性核素作为标记物,将放射性核素125I标记在抗原或抗体分子上,将免疫分析的特异性和放射性核素的敏感度有机结合。放射免疫技术开创体液微量物质定量分析这一崭新领域,并为酶免疫分析、发光免疫分析的建立和发展奠定了基础。放射免疫技术有两个重要类型:放射免疫分析(RIA)和免疫放射分析(IRMA)。

放射免疫分析常用的放射性核素是放射性碘(125I)。125I性质活泼,标记方法简单,容易制备高比活性的标记物;在衰变过程中发射γ射线,便于测量且测量的效率高;半衰期(60天)适中,保证一定使用期,废弃物容易处理。肽类或蛋白质可采用氯胺T法进行125I的直接标记,放射化学纯度、比放射活性、免疫活性是评价标记物的重要指标。

放射免疫分析以标记抗原为特点,属于竞争性免疫分析,基于标记抗原和非标记抗原对同一抗体有相同亲和力,常采用PEG-双抗体对B或F进行分离。放射免疫分析多用于小分子半抗原(甾体激素)的测定。免疫放射分析以标记抗体为特点,属于非竞争性免疫分析,以过量125I标记抗体与待测抗原进行非竞争性免疫结合反应,采用固相免疫吸附方式对B或F进行分离;免疫放射分析以双位点(双抗体夹心)法最为常用,适用于大分子蛋白质(多肽)检测。

近年来,由于非放射标记免疫(如发光免疫分析)飞速发展和广泛普及,同时,放射标记技术存在放射性污染、试剂盒有效期短等缺陷,放射免疫技术有逐渐被发光免疫技术取代的趋势。但是,因放射标记免疫在小分子半抗原(甾体激素)测定方面的优势,加之检测成本较低,同时,发光免疫试剂和仪器均依赖进口,放射免疫技术在今后一段时间内仍会发挥一定作用。