9.1.2 常用材料的取材技术

更新于 2026年10月12日 版权声明
9.1.2 常用材料的取材技术

1)皮肤和黏膜的取材

皮肤和黏膜是上皮细胞培养的重要组织来源,主要取自手术过程中的皮片,方法类似于外科取断层皮片手术操作,但面积一般控制在2~4 cm2即可,这样局部不留疤痕。若对烧伤皮肤进行上皮细胞膜片移植,可从大腿或臀部取较大皮片,可取2~4 cm2皮片,但取材时不要用碘酒消毒;若培养上皮细胞,取材时不要切取太厚,尽可能去除所携带的皮下或黏膜下组织;若欲培养成纤维细胞,则反之。皮肤黏膜与外界相通部位,因表面细菌、真菌很多,取材时应严格消毒,必要时要用高浓度抗菌素和适量两性霉素B漂洗、浸泡。

2)内脏和实体瘤的取材

内脏除消化道外基本是无菌的,但取材时要明确和熟悉所需组织的类型和部位。实体瘤取材时要取肿瘤细胞丰富的区域,要避开破溃、坏死部分,以防污染,尽量去除混杂的结缔组织,否则在培养后,由于成纤维细胞的生长给以后的培养工作增加困难。

3)血液细胞的取材

血液及淋巴组织中的血细胞、淋巴细胞的取材,一般多抽取静脉外周血,或从淋巴组织中(如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等)分离细胞,取材时应注意抗凝,通常采用肝素抗凝,抽血的针筒也要用肝素湿润,若从血站取来献血员的血液,因血站不用肝素抗凝剂,常用含枸橼酸盐抗凝,对此类血标本千万不能用含钙、镁离子的洗液来处理细胞,因为此时的钙、镁离子可加速血液中凝血酶促进血液凝固而影响收获血细胞及淋巴细胞。

4)动物组织取材(https://www.daowen.com)

(1)鼠胚组织取材

首先用引颈或气管窒息致死法处死胎龄合适的怀孕雌鼠,然后将整个动物浸泡在含有75%乙醇的烧杯中,2 min后(注意时间不能太长,以避免乙醇从口或其他通道进入体内,影响组织活力)取出动物,在消毒过的木板上可用无菌的图钉或大头针固定四肢,切开皮肤,用无菌操作法解剖取胚或用无菌止血钳挟起皮肤、用眼科剪沿躯干中部环形剪开皮肤,用止血钳分别挟住两侧皮肤拉向头尾,把动物反包,暴露躯干,然后再固定,更换无菌解剖器材,采用无菌操作法解剖取出胚胎。

(2)幼鼠胚肾(或肺)取材

幼鼠采用上述方法处死消毒后,腹部朝上固定在木板上,先切开毛皮并拉开至两侧,然后采用无菌法打开胸腔取肺;或背部朝上固定在木板上,先将背部毛皮切开游离并拉向两侧,然后采用无菌法从背部打开腹腔取肾。

5)鸡(鸭)胚胎组织取材

取孵化至适当胚龄的胚蛋,用照蛋器在暗处灯检,若有丰富血管、胚体有运动的胚蛋,说明胚体发育良好,并用有色笔画出气室和胚体位置。将胚蛋大头朝上置于蛋架上,经碘酒、75%酒精消毒后,在无菌条件下采用无菌法用剪刀或中号镊子打开气室,沿气室边缘去除蛋壳,再用眼科镊撕去壳膜,暴露出鸡胚,再用弯头镊轻挑起胚头,取出胚胎,放入无菌培养皿中,根据需要进行解剖取材。在鸡的病毒与疫苗研究中常用到鸡胚培养技术。

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