分离菌种的纯化

分离菌种的纯化是指将分离获得的菌种进行再提纯，从而获得纯菌种的方法。在实际操作中，无论采取何种分离方法，都不排除杂菌污染的可能性。对污染的菌种可以采取如下方法进行纯化：

（一）菌丝的再提纯

选取无污染、菌落生长较为一致的菌丝体作为提纯对象。用无菌接种铲连同培养基一起切取菌落的前端部分，移接到新的培养基上培养。如果菌丝稀疏，如草菇，可采用单根菌丝分离法，即在低倍镜下选择单根菌丝，用锋利的接种针仔细地将贴在固体培养基上的单根菌丝带少量培养基切下，移接到新的培养基上培养。如此，经过几次切割移植，就可以得到纯菌种。(https://www.daowen.com)

（二）排除污染物

菌种分离时细菌、霉菌污染在所难免，在培养基中加入百万分之五至百万分之十的多菌灵或甲基托布津，可以防止霉菌污染;在1 L培养基中加入30～40 mg链霉素、青霉素可以防止细菌污染。

一般来说，污染的菌种不要使用，但有时又非用不可，可将灭菌后的滤纸浸在10％的多菌灵中，然后取出覆盖在霉菌生长点上，以防止分生孢子的扩散，再用无菌接种铲铲取一块远离杂菌的顶端健壮菌丝移植到新的培养基上培养;如果是细菌感染，可以用接种铲将细菌菌落连同培养基一起铲除，再从无杂菌部位铲取一块菌丝移接到新培养基上进行培养。