原种、栽培种的接种
原种、栽培种接种时,要严格进行无菌操作。接种前要认真检查使用的母种和原种的质量,确保菌种纯度和种性清晰。
(一)原种接种
原种接种就是把试管菌种转入原种培养料的过程,原种接种需要无菌操作,步骤如下:
(1)把经高压灭菌的料瓶的棉塞上的报纸去掉后和接种工具一起放入接种箱(室)中,再用甲醛和高锰酸钾灭菌30 min,有条件的可用紫外线灯同时灭菌30 min。
(2)母种在接种时放入接种箱(室),接种前先用75%的酒精棉球擦净双手和试管。管口、瓶口和棉塞都要在酒精灯火焰上消毒。
(3)把待接种的菌种瓶(袋)直立在火焰旁,拔出试管及原种瓶棉塞,用右手夹住棉塞。将接种耙在酒精灯火焰上灼烧灭菌后伸入母种试管内。接种耙冷却后,截取一块母种(带培养基),迅速通过酒精灯火焰上方移入培养料接种穴口。不要将接种块放到接种穴内,这样经过一段时间菌种才能萌发,易导致培养基表面污染。如使用两点接种,一块菌种放入接种穴内,另一块菌种放在接种穴口。两点接种法可使菌种满瓶时间缩短,菌龄上下一致。接种后,塞好棉塞,用牛皮纸或报纸扎口。在接种过程中,要用酒精灯火焰封口,瓶口要在火焰上燎过,接种动作要迅速熟练。火焰与瓶口相距1~1.5 cm,不要直接灼烧瓶口,以防炸裂。如两人共同操作,一人掏取菌种,一人拔、塞棉塞,配合协调,可提高效率。
一般1支试管母种可接5~8瓶原种。接种后贴好标签,注明菌种名称、菌种编号、接种时间等。如上逐瓶(袋)接种完毕后,同样要将接种工具彻底灭菌。
(二)栽培种接种(https://www.daowen.com)
栽培种接种就是把原种接入栽培种培养料的过程。接种操作一定要严格遵守无菌操作规程。接种方法如下:
(1)把灭好菌的培养料和接种工具一起放入接种室(箱)中,同时将原种放入,再用甲醛和高锰酸钾熏蒸灭菌30 min,有条件的用紫外线灯同时灭菌30 min。
(2)接种前先用75%的酒精棉球擦净双手和瓶口、瓶身。瓶口和棉塞都要在酒精灯火焰上灼烧,以杀死可能存在的杂菌。
(3)接种时将原种瓶固定在瓶架上。然后扒去原种表面一层菌膜,若上部菌丝较弱,要扒去不用。接种时如是单人操作,用左手拿菌种瓶,右手拔去棉塞,用酒精灯火焰封住瓶口,右手拿接种工具,灼烧后,从原种瓶内取原种接种;如是两人接种,一人负责拿原种瓶,夹取菌种接种;另一人负责开封瓶口。
棉籽壳、稻草屑、粪草等原种,用镊子夹取菌种接种;木屑、谷粒菌种,用接种匙挖取菌种接种。将原种放入栽培种培养料穴内。接种量不宜过大。接入菌种不宜过散,以便检查有无杂菌污染。接种后用火焰灼烧棉塞后塞好。
进行袋装栽培种接种时,要双人操作,一人取菌种,一人解袋口、撑袋口以及接种后扎袋口。接种完毕,注意加标记,标明菌种编号、接种日期等。
一般一瓶原种可接40~50瓶或20~30袋栽培种。