囊胚观察标准化操作流程
1.将需要使用的IVF工作站预备至可用状态。
2.胚胎一般培养至Day5或Day6(即加精时间+116±2h或加精时间+140±2h)后将形成囊胚,当天根据计划囊胚移植的患者的顺序依次取出培养皿进行囊胚观察与评价。
3.胚胎培养表对胚胎逐个进行囊胚评价,评价内容及记录方法如下:
(1)囊胚腔评价:
1期:早期有腔室囊胚,囊胚腔小于胚胎总体积的1/2。
2期:囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2。
3期:完全扩张囊胚,囊胚腔完全占据了胚胎的总体积。
4期:扩张囊胚,囊胚腔完全充满胚胎,胚胎总体积变大,透明带变薄。
5期:正在孵出的囊胚,囊胚的一部分从透明带中逸出。
6期:孵出的囊胚,囊胚全部从透明带中逸出。
(2)内细胞团质量分级:
A级:细胞数目多,排列紧密。
B级:细胞数目少,排列松散。
C级:细胞数目很少。(https://www.daowen.com)
(3)滋养层细胞分级:
A级:上皮细胞层由较多的细胞组成,结构致密。
B级:上皮细胞层由不多的细胞组成,结构松散。
C级:上皮细胞层由稀疏的细胞组成。
(4)最后根据囊胚腔的大小、内细胞团以及滋养层细胞的情况对囊胚进行综合评分,以一个数字及两个英文大写字母表示(如4AA,3AB等),评价细则如《囊胚对照评估表》(表5.11)所示。
表5.11 囊胚对照评估表
4.原则上D5/D6未发育到囊胚,D5/D6内细胞团或滋养层细胞评分为“C”的囊胚均不建议移植。若D5未发育到囊胚则培养至D6再次评估。
5.将计划移植的胚胎移入移植皿粘贴患者标签后放入移植培养箱备用,并完善胚胎培养记录。
6.将剩余需要冷冻及废弃的胚胎留在囊胚培养液中,根据冷冻数量准备相应材料与试剂,填写《胚胎冷冻知情同意书》转交护士并提醒收取胚胎冷冻费。
7.如有患者要求进行辅助孵化的要填写《辅助孵化知情同意书》转交护士,并提醒其收取辅助孵化费。
8.填写《IVF实验室胚胎培养反馈表》及《胚胎情况通知单》,并将《胚胎情况通知单》转交当日负责移植的护士。
9.以上操作需严格落实双人核对制度。
