实训11　微生物群体形态的观察（三）——放线菌的插片培养

一、实训目的

（1）学会用放线菌的插片法培养放线菌。

（2）观察放线菌各部分的形态特征。

二、实训原理

详见本模块的实训8。

三、实训器材

1．菌种

细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）斜面培养物。

2．培养基

制备高氏Ⅰ号琼脂培养基。

配方：可溶性淀粉20g，KNO₃1g，NaCl　0．5g，K₂HPO₄·3H2O　0．5g，MgSO₄·7H2O　0．5g，FeSO₄·7H2O　0．01g，琼脂15～20g，蒸馏水1000mL，pH　7．4～7．6。

制法：先用少量冷水把可溶性淀粉调成糊状，用文火加热，然后加水及其他药品，待各成分溶解后再补足水至1000mL。

3．器具

培养皿，盖玻片，载玻片，镊子，接种环，显微镜等。

四、实训步骤(https://www.daowen.com)

1．倒平板

将灭菌的高氏Ⅰ号琼脂培养基熔化，冷却至50℃左右倒平板，每皿约20mL，凝固后备用。平板宜厚些，利于插盖玻片。

2．接种

用接种环在酒精灯火焰旁挑放线菌斜面培养物，在琼脂平板上划线接种。

3．插片

以无菌操作法用镊子将灭菌的盖玻片以40°～50°角插入已划线接种的培养基内，深度约为盖玻片的1／3长度。插片数量可根据需要而定。

4．培养

将插片平板倒置于28℃的培养箱内恒温培养，培养时间可根据观察的目的而定，一般为3～7天。

5．镜检

用镊子小心拔出盖玻片，擦去背面培养物，将有菌丝的一面朝上，无菌丝体的一面放在载玻片上，先用低倍镜后用高倍镜或油镜进行观察。

五、结果记录

绘图说明你所观察到的放线菌的形态特征。

六、思考题

显微镜观察时，如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？