尿液常用的化学检验
第三节 尿液常用的化学检验
尿液的常规检验包括尿液的干化学检验和尿沉渣分析。尿液干式化学(或称干化学)分析是将尿液标本直接加到干燥试剂垫上,以标本中水为反应介质,引起特定化学反应的方法。尿液干化学分析是尿液检验自动化进程的重要部分。
尿液常规的干化学检验为定性或半定量检测,其操作简单、快速,是目前国内普及的尿液分析过筛手段。目前常用干化学检测项目有12项,分别为尿酸碱度(PH)、尿比密(SG)、尿蛋白质(PRO)、尿糖(GLU)、尿酮体(KET)、尿潜血(BLD或ERY)、尿白细胞(LEU)、尿亚硝酸盐(NIT)、尿胆红素(BIL)、尿胆原(UBG)、尿微量白蛋白(M-alb)、维生素C (Vit-C)。
一、尿液比密测定
比密又称比重((SG)。尿在4℃时与同体积纯水重量之比,称为尿比密。尿中可溶性的固体物质主要是:尿素(25%)、肌酐和氯化钠(25%)。
1.检测方法
(1)化学试带法又称干化学法,有目视比色法和仪器比色法。化学试带上载有预先处理过的甲乙烯酸/马来酐,它含有随尿液离子浓度而解离的酸性基团,这种改变可由膜块中的酸碱指示剂(溴麝香草酚蓝)颜色变化显示出来,进而换算为尿的比密(specific gravity,SG)值。
(2)尿比密计法。
(3)其他方法,包括:①折射计法。②超声波法。③称量法。
2.方法学评价
(1)化学试带法测定简便,不受高浓度的葡萄糖、蛋白质或放射造影剂的影响,但精度差,只用作过筛试验。
(2)尿比密计法现已很少使用。
(3)折射计法具有易于标准化、标本用量少(1滴尿)等优点。折射计法被美国临床检验标准委员会(NCCLS)和中国临床检验标准委员会(CCCLS)建议作为参考方法。
3.质量控制
(1)化学试带法。①使用与仪器匹配、合格、有效期内的试带。②每天用标准色条进行校准。③如尿p H>7.0,测定值应增高0.005。④化学试带法对过高或过低的尿比密不敏感,应以折射计法为参考。⑤评价肾脏的浓缩、稀释功能时,应进行连续多次测定才有可靠价值。
(2)尿比密计法。尿比密计要通过校正后使用、测定时尿量要足,液面应消除泡沫,要尿温度、尿蛋白尿、糖尿的校正。
(3)其他方法折射计法。测尿前要按操作时室温进行温度补偿调校。
4.参考值
晨尿或通常饮食条件下:1.015~1.025。随机尿:成人1.003~1.035(至少有1次在1.023或以上,1次在1.003或以下);新生儿,1.002~1.004。
5.临床意义
尿比密测定是临床上估计肾脏浓缩稀释功能常用的指标。尿比密主要与患者的饮水量有关,但是严重出汗,低体温效应及利尿剂引起的多尿都是影响尿比密的因素,因此,健康人尿比密值可以从1.000~1.040之间进行变动。
(1)高比密尿见于:①急性肾小球肾炎、急性肾衰少尿期。②肾前性少尿疾病,如肝病、心功能不全、周围循环衰竭、高热、脱水以及糖尿病、蛋白尿、使用放射造影剂等。
(2)低比密尿:尿比密常<1.015时,称低比密尿或低张尿。如尿比密固定在1.010士0.003(与肾小球滤过液比密接近)者,称为等渗尿或等张尿,提示肾脏稀释浓缩功能严重损害。主要见于:①急性肾小管坏死、急性肾衰多尿期、慢性肾衰竭、肾小管间质疾病等。②尿崩症:常低比密尿(SG<1.003),尿比密测定有助于多尿时糖尿病与尿崩症的鉴别。
(3)24h连续多次测定尿比密有助于初步了解肾的浓缩稀释功能。
二、尿液p H测定
1.定义
尿液酸碱度是反映肾脏调节机体内环境体液酸碱平衡能力的重要指标之一,通常简称为尿液酸度。尿液酸度分两种:可滴定酸度和真正酸度。前者可用酸碱滴定法进行滴定,相当于尿液酸度总量,后者是指尿液中所有能离解的氢离子浓度,通常用p H来表示。
2.检测方法及评价
(1)试带法。p H分析试纸中含有甲基红,变色范围为p H4.2 (红)~6.2(黄);溴甲酚绿,变色范围为p H3.6(黄)~7.4(绿);溴百里香酚蓝,变色范围为p H6.7(黄)~7.5(蓝)。这些混合的酸碱指示剂适量配合可以反映尿液p H4.5~9.0的变化范围。用p H广泛试带浸入尿液中,立即取出与标准色板比较测定,用肉眼判断出尿液的p H,或用仪器判读结果。本法操作简单,可目测或用尿液分析仪检测,是目前应用最广泛的筛检方法。但试带易吸潮变质,易影响准确性。
(2)指示剂法。常用的指示剂为0.4g/L嗅麝香草酚蓝溶液,显示黄色为酸性尿;显示蓝色为碱性尿;显示绿色为中性尿。本法操作简单,但嗅麝香草酚蓝的p H变色范围为6.0~7.6,当尿液p H偏离范围时,检测结果不准确。黄疸尿、血尿易干扰指示剂法。
(3)滴定法。本法可检查尿液酸度的总量。临床上,可用于观察尿液酸度的动态监测,但操作复杂。
(4)p H计法。用p H电极能直接精确地测定出尿液的p H。本法精确度较高,可用于酸负荷试验后尿液p H检查,对于肾小管酸中毒的定位诊断、分型、鉴别诊断有一定的应用价值。但需要特殊仪器,且操作更繁琐。
3.质量控制
(1)标本必须新鲜,陈旧标本可因尿CO2挥发或细菌生长使p H增高,也可因细菌和酵母菌作用,使尿中葡萄糖降解为酸和乙醇而p H降低。
(2)试带法试带应满足生理和病理尿p H的变化范围,未被酸、碱污染,未吸潮变质。
(3)指示剂法一般指示剂多不易溶于水,配制指示剂溶液时,应先用少许碱液(如Na OH稀溶液)助溶后,再加蒸馏水稀释到适当浓度,以满足指示剂颜色变化范围,因为指示剂的解离质点状态与未解离质点状态呈现不同的颜色。
(4)滴定法氢氧化物溶液浓度必须标准。
(5)p H计法应经常校准p H计,确保仪器在正常良好状态下检测。
4.参考值
在正常饮食条件下,晨尿多偏弱酸性,多数尿标本p H5~6.5,平均p H6.0。随机尿p H4.5~8.0。尿可滴定酸度为20~40mmol/24h尿。
5.临床意义
(1)生理因素。正常尿液的酸碱度变化受饮食因素、药物等因素影响,如氨基酸、蛋白质引起的酸性尿,蔬菜饮食引起的碱性尿。
(2)病理因素。①尿p H降低。酸中毒、慢性肾小球肾炎、痛风、糖尿病等排酸增加;呼吸性酸中毒,因二氧化碳潴留等,尿多呈酸性。低钾血症性碱中毒时,由于肾小管分泌H+增加,尿酸性增强。②尿p H升高。频繁呕吐丢失胃酸、服用重碳酸盐、尿路感染、换气过度及丢失二氧化碳过多的呼吸性碱性中毒,尿呈碱性。高钾酸性中毒时,排K+增加,肾小管分泌H+减少,可呈碱性尿。变形杆菌性尿路感染时,由于尿素分解成氨,呈碱性尿。肾小管性酸中毒时,因肾小管形成H+排出H+及H+、Na+交换能力下降,尽管体内为明显酸中毒,但尿p H呈相对偏于碱性。
(3)观察尿液p H变化,指导临床用药,预防肾结石的形成和复发,减轻泌尿系统微生物的感染。
三、尿液蛋白质定性检查
正常人尿蛋白来源正常人尿蛋白约有200多种,主要有:①小相对分子质量蛋白:如微球蛋白、溶菌酶、核糖核酸酶以及免疫球蛋白Fc片段等。②大相对分子质量蛋白:如Tamm-Horsfall糖蛋白及分泌型Ig A等。③中相对分子质量蛋白:如相对分子质量为4万~9万的清蛋白,占尿蛋白总量50%左右。当尿液中蛋白质超过正常范围时称为蛋白尿,含量大于0.1g/L时定性试验可阳性。
(一)蛋白尿定义
尿液中蛋白质超过150mg/24h或超过100mg/24h时,蛋白定性试验呈阳性,即称为蛋白尿。
(二)蛋白尿生成原因及机制
1.肾小球性蛋白尿
因肾小球的损伤而引起的蛋白尿,多因肾小球受到感染、毒素、代谢等因素的损害后,引起肾小球毛细血管壁破裂,滤过膜孔径加大,通透性增强或尿疫白免电荷屏障作用受损,使血液中相对分子质量较小的血浆蛋白(以清蛋白为主)滤出原尿中。若损害较重时,球蛋白及其他少量大相对分子质量蛋白滤出也增多,超过了肾小管重吸收能力而形成蛋白尿。根据肾小球滤过膜损伤的严重程度及尿液中蛋白质的组分不同,可将其分为两类:
(1)选择性蛋白尿。主要成分是相对分子质量为4万~9万的中相对分子质量的清蛋白。相对分子质量>9万的蛋白则极少出现。尿免疫球蛋白/清蛋白的比值<0.1。尿蛋白半定量多为+++~++++。当尿蛋白定量>3.5g/24h,称为肾病性蛋白尿,最典型的病例是肾病综合征。
(2)非选择性蛋白尿。反映肾小球毛细管壁有严重破裂损伤。尿蛋白成分,以大和中相对分子质量蛋白质同时存在为主,尿蛋白中,免疫球蛋白/清蛋白比值>0.5,半定量为+~++++,定量在0.5~3.0g/24h之间,多见于原发性肾小球疾病(如急进性肾炎、慢性肾炎、膜性或膜增生性肾炎等)及继发性肾小球疾病(如糖尿病肾炎、红斑狼疮性肾炎等)。出现非选择性蛋白尿提示预后较差。
2.肾小管性蛋白尿
肾小管受到感染或中毒损伤后,肾小管近曲小管段对肾小球滤过液中的小相对分子质量蛋白质重吸收能力减低,而出现以小相对分子质量蛋白为主的蛋白尿,称为肾小管性蛋白尿。单纯性肾小管性蛋白尿,尿蛋白含量较低,一般<2g/24h,定性半定量试验+~++。肾小管性蛋白尿多见于:①肾小管间质病变。如间质性肾炎、肾盂肾炎、遗传性肾小管疾病如Fanconi综合征、慢性失钾性肾病等。②中毒性肾间质损伤。由于汞、镉、铀、砷和铋等重金属类或苯四氯化碳等有机溶剂以及卡那霉素、庆大霉素、磺胺、多翻菌素、四环素等抗生素类,可引起肾小管上皮细胞肿胀、变性与坏死,又称中毒性肾病。③中草药:如使用马兜铃、木通过量,也可引起高度选择性肾小管蛋白尿,此时常伴有明显管型尿。④器官移植排斥反应等。
3.混合性蛋白尿
指肾脏疾病时,肾小球和肾小管同时或相继受损而产生的蛋白尿,其组分与血浆蛋白相似,但各种组分所占的比例可因病变主要侵害的部位而不同,尿蛋白电泳检查有助于临床对蛋白尿组成的分析、判断及诊断。
4.溢出性蛋白尿
指血液循环中,出现了大量以中、小相对分子质量为主的异常蛋白质,如游离血红蛋白、肌红蛋白、溶菌酶等增多,经肾小球滤出后,原尿中的含量超过了肾小管重吸收最大能力,而大量出现在尿液中形成的蛋白尿。尿蛋白质定性,多为+~++。可见于:①浆细胞病。②急性血管内溶血。③急性肌肉损伤。④其他。如急性白血病时血溶菌酶增高、严重胰腺炎时血淀粉酶增高形成的蛋白尿。
5.组织性蛋白尿
凡肾组织细胞代谢产生的蛋白质、组织破坏分解的蛋白质,以及肾脏组织炎症,或受药物等刺激泌尿道组织分泌的蛋白质等,进入尿液中形成的蛋白尿,均称为组织性蛋白尿。定性±~+,定量0.5~1.0g/24h。其组成成分多以T-H蛋白为主。
6.生理性蛋白尿
(1)功能性蛋白尿。机体剧烈运动、发热、低温刺激、精神紧张、交感神经兴奋等生理状态时,导致暂时性、轻度的蛋白尿,称为功能性蛋白。这种蛋白尿可随影响机体生理反应因素的消除和肾功能的恢复而消失,定性一般不超过十,定量<0.5g/24h,多见于青少年。
(2)体位性蛋白尿。又称为直立性蛋白尿。特点是卧位时,尿蛋白阴性,起床活动或站立过久后,尿蛋白阳性,平卧休息后又为阴性。亦多见于青少年。
7.偶然性蛋白尿
指由于偶然因素,尿液中混入了多量血液、脓液、戮液或生殖系统排泌物,如白带、月经血、精液、前列腺液等成分时,导致尿蛋白定性试验阳性,但不伴随肾脏本身的损害,故又称假性蛋白尿。主要见于:肾以下泌尿道的炎症、出血及生殖系统排泌物的污染。
(三)检测方法及评价
1.尿蛋白定性试验为蛋白尿的过筛试验
(1)试带法。本法是利用指示剂的蛋白质误差原理,即蛋白质膜块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、柠檬酸缓冲系统和表面活性剂。在p H为3.2时溴酚蓝产生出阴离子,与白蛋白携带的阳离子(主要是白蛋白)结合发生颜色变化。这种颜色变化的幅度与蛋白含量成正比。本法对清蛋白较敏感,对球蛋白不敏感,仅为清蛋白的1/100~1/50,且可漏检本周蛋白。尿液p H增高可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化,适于健康普查或临床筛检。
(2)加热乙酸法。为传统的经典方法,本法能使含造影剂尿液变清,可用于鉴别试验。
原理:加热可使蛋白质变性凝固,加酸可使蛋白质接近等电点,促使蛋白沉淀。此外,加酸还可溶解碱性盐类沉淀物。
试剂:①5%醋酸溶液:冰乙酸5ml加蒸馏水至100ml。②饱和氯化钠溶液,备用。
操作:①取约10ml新鲜清晰尿液加入一耐热的试管内。②将试管斜置在火焰上,煮沸上部尿液。③滴加5%醋酸3~4滴,再煮沸后,立即观察结果。如有混浊或沉淀,提示尿液内含有蛋白质。
结果判断:①阴性:不显混浊。②微量(±):在黑色背景下呈轻微混浊。③弱阳性(+):呈明显白雾状,含蛋白质为0.1~0.5g/L。④阳性(2+):呈混浊,有明显颗粒,含蛋白质为0.5~2.0g/L。⑤强阳性(3+):大量絮片状沉淀,混浊,含蛋白质为2.0~5.0g/L。⑥最强阳性(4+):出现凝块并有大量絮片状沉淀,含蛋白质为>5.0g/L。
注意事项:①本试验特异性强、干扰因素少,能同时检出清蛋白及球蛋白尿,但敏感度较低,检出敏感度为0.15g/L。②加酸过多,远离蛋白等电点,蛋白质微粒获得电荷增加,可呈假阴性。③无盐或低盐饮食的患者因尿内,电解质含量少,可致假阴性。试验时可先加1~3滴饱和氯化钠溶液于尿液中,再进行操作。
(3)磺基水杨酸法。又称磺柳酸法。操作简便、反应灵敏、结果显示快,被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法,并推荐为检查尿蛋白的确证试验。
原理:磺基水杨酸为生物碱制剂,在略低于等电点的酸性环境下,其阴离子可与带阳电荷的蛋白质结合成不溶性蛋白盐而沉淀。
试剂:100g/L磺基水杨酸乙醇溶液:称取磺基水杨酸20g,加水至100ml,取此液与等量95%乙醇或甲醇液混合(或配制200g/L磺基水杨酸水溶液)。
操作:①试管法:取试管一支加入澄清尿液1ml,加磺基水杨酸试剂0.1ml,立即摇匀,于1min内观察结果。②凹玻板法:取10孔凹玻板一块,上排编号做试验用,下排做对照,每孔加尿标本0.2ml,每份标本加上、下两孔,上排尿中加试剂40μl,下排加生理盐水40μl,混匀后15~60s内判断结果。(适合于大量标本检查)
结果判断:①阴性(-):不显混浊,尿液外观仍清晰透明。②微量(±):轻微混浊,隐约可见。③阳性(+):明显白色混浊,但无颗粒出现。④阳性(2+):稀薄乳样混浊,出现颗粒。⑤阳性(3+):乳浊,有絮片状沉淀。⑥阳性(4+):絮状混浊,有大凝块下沉。
注意事项:①磺基水杨酸法较敏感,敏感度达0.05g/L。②如尿液混浊,应先离心或过滤:强碱性尿可出现假阴性,应加5%醋酸溶液数滴酸化后再做试验。③有机碘造影剂,超大剂量使用青霉素等均可致假阳性。④尿中含高浓度尿酸或尿酸盐时,可呈假阳性。但出现的反应与尿蛋白不同,加试剂1~2min后出现白色点状物,向周围呈毛刺状突起,并慢慢形成雾状。
2.尿蛋白定量试验检查方法
沉淀法、比色法、比浊法、染料结合法、免疫测定法和尿蛋白电泳法等。目前染料结合法、比色法应用较广泛,免疫法及尿蛋白电泳法具有更高的灵敏度和特异性,有很好的临床应用前景。
尿蛋白检测方法的选择:对于进行现场快速检验,或初次就诊的门诊患者,采用试带法或磺基水杨酸法,基本可满足健康体检和疾病筛查的需要;在疾病确诊后需要进行疗效观察或预后判断时,则需要配合加热乙酸法,必要时需进行尿蛋白定量和特殊蛋白质分析。
(四)质量控制
(1)磺基水杨酸法使用某些药物(如青霉素钾盐、复方磺胺甲嗯哇、对氨基水杨酸等)及有机碘造影剂时,以及尿内含有高浓度尿酸、草酸盐或戮蛋白时,可呈假阳性反应。此时,可通过加热煮沸后浊度是否消失予以鉴别。
(2)考马斯亮蓝法尿蛋白测定应注意:①考马斯亮蓝试剂易吸附在比色杯上,每次使用后应立即用甲醇或乙醇或水加适量丙酮洗涤,并最好用专用比色杯。②试剂酸度对蛋白质测定影响较大,p H越高灵敏度越低。③考马斯亮蓝试剂必须新鲜,否则对蛋白质结合能力下降。④线性范围较窄。
(3)注意方法间差异,加强质量控制用于尿蛋白定量的各种方法之间存在较大差异;应尽力做到标本、试剂合格,操作规范,结果有可比性。
(五)参考值
定性试验:阴性。定量试验:<0.1g/L或<0.15g/24h。
(六)临床应用
1.生理性蛋白尿
(1)功能性蛋白尿。见于剧烈运动后、发热、寒冷刺激、精神紧张、过度兴奋等,呈混合性蛋白尿,一般为2~3d后消退。
(2)直立性蛋白尿。可见于站立时间过长、“行军性”蛋白尿等。多见于青少年,多数无肾病证据。
(3)摄入性蛋白尿:输注成分血浆、清蛋白及其他蛋白制剂,或进食过多蛋白质时,尿液中可偶然被检出尿蛋白。
(4)偶然性蛋白尿。受白带、月经血、精液、前列腺液的污染,偶尔出现假性蛋白尿。
(5)老年性蛋白尿。与年龄低于50岁的人相比,老年人蛋白尿的发生率增高。这些人每隔6个月应随访检查血压等,但总体预后良好。
(6)妊娠性蛋白尿。妊娠时可有蛋白尿,但应注意随访。若无症状者,尿蛋白持续1~2g/d或伴血尿时,则预后比暂时性或体位性蛋白尿者差。
2.病理性蛋白尿
病理性蛋白尿可分为以下三种:
(1)肾前性蛋白尿。见于:①浆细胞病:如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、浆细胞白血病等。②血管内溶血性疾病:如阵发性睡眠性血红蛋白尿等。③大面积肌肉损伤:如挤压伤综合征、电灼伤、多发性肌炎、进行性肌肉萎缩等。④酶类增高:如急性单核细胞白血病尿溶菌酶增高,胰腺炎严重时尿淀粉酶增高等。
(2)肾性蛋白尿。肾性蛋白尿包括肾小球性蛋白尿和肾小管性蛋白尿。
肾小球性蛋白尿:①肾病综合征:蛋白尿以清蛋白为主,少量小相对分子质量蛋白,定性试验多数为+++~++++,定量试验常为3.5~10g/d,最多可达20g/d。②原发性肾小球肾炎:如急性肾炎、慢性肾炎、膜性肾炎、膜增生性肾炎、肾衰竭等。③继发性肾小球疾病。糖尿病肾病:早期尿中即出现微量清蛋白,临床肾病期尿蛋白常>0.5g/d。狼疮性肾炎:轻型损害时,尿蛋白多在+~++之间,定量为0.5~2g/d。妊娠中毒症:正常妊娠时,尿蛋白可轻度增高;但妊娠中毒症者,尿蛋白多为+~++,严重时可达+++~++++,定量可>5g/d。
肾小管性蛋白尿:①肾小管间质病变:如间质性肾炎、肾盂肾炎、Fancvni综合征、肾小管性酸中毒等。②重金属中毒:如汞、镉、砷、铀等,重金属一类引起中毒性肾间质疾病。③药物中毒:某些抗生素如庆大霉素、卡那霉素、多戮菌素等;中草药类如马兜铃、木通等;有机溶剂如苯中毒等。④器官移植:如肾移植排斥反应等。
(3)肾后性蛋白尿:①泌尿、生殖系炎症反应:如膀胱炎、尿道炎、前列腺炎、精囊炎等。②泌尿系结石、结核、肿瘤等。③泌尿系邻近器官疾病:如急性阑尾炎、慢性盆腔炎、宫颈炎、盆腔肿瘤等,泌尿系邻近器官炎症或肿瘤刺激。
四、尿液葡萄糖定性检查
正常人尿液中可有微量葡萄糖,尿内排出量<2.8mmol/24h用普通定性方法检查为阴性。糖定性试验呈阳性的尿液称为糖尿,一般是指葡萄糖尿(glucosuria)偶见乳糖尿、戊糖尿、半乳糖尿等。尿糖形成的原因和机制为:当血中葡萄糖浓度大于8.8mmol/L时,肾小球滤过的葡萄糖量超过肾小管重吸收肾力即可出现糖尿。
尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素:①动脉血中的葡萄糖浓度。②每秒流经肾小球中的血浆量。③近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的能和即肾糖阈。
肾糖阈可随肾小球滤过率和肾小管葡萄糖重吸收率的变化而改变,当肾小球滤过率降低时可导致“肾糖阈”提高,而肾小管重吸收减少时则可引起肾糖阈降低。葡萄糖尿除可因血糖浓度过高引起的外,也可因肾小管重吸收能力降低引起的,后者血糖可正常。
(一)检测方法及评价
1.班氏法(Benedict法)
利用葡萄糖的还原性,是传统尿糖定性试验方法。本法是非特异性测定葡萄糖的试验,可检出多种尿糖,简便,但易受其他还原物质干扰,倾向于淘汰。
2.试带法(采用葡萄糖氧化酶法)
尿中的葡萄糖与试带上的葡萄糖氧化酶发生氧化还原反应,生成的过氧化氢可催化邻联甲苯(或碘化钾)呈色。本法检测葡萄糖的特异性强、灵敏度高、简便快速,适用于自动化分析。
3.薄层层析法
操作复杂、费时、成本高,多用于临床或基础研究,临床上一般情况少用。
(二)质量控制
1.班氏法
试验前,必须首先煮沸班氏试剂,避免试剂变质。
2.试带法
(1)因为尿糖分析试纸的后一步反应是氧化还原反应,当尿液中含有还原性物质时,可使测试结果偏低甚至出现假阴性。如尿液中含有维生素C时就能使测试结果偏低甚至假阴性。
(2)尿液存放时间过长也能使尿糖被细菌分解使浓度下降,但含有抗生素时几乎不下降。
(3)高浓度的酮体尿可引起假阴性;尿液比密增高,可降低试剂带对尿糖的敏感性,如水杨酸盐的代谢产物。服用大量左旋多巴时,该药物的代谢产物会对测试反应产生抑制作用,使测试结果偏低或出现假阴性。
(4)假阳性结果很少见,除非盛尿的容器被过氧化物或次氯酸盐等强氧化性物质污染的时候能出现假阳性。
(5)试剂带采用的使酶促反应,测定的结果和温度及时间有关,因此应在规定的温度和时间内测定。试剂带是基于葡萄糖氧化酶—过氧化物酶的原理,对葡萄糖特异,而对其他的糖类如果糖或蔗糖不发生化学反应。
(三)参考值
定性试验:阴性。
(四)临床应用
尿糖检查,主要是作为糖尿病的筛检和病情判断的检测指标。但尿糖检查时,应同时检测血糖,以提高诊断准确性。
1.血糖增高性糖尿
(1)摄入性糖尿。①摄入增多:摄入大量的糖类食品、饮料、糖液时,可引起血糖短暂性增高而导致糖尿。②输入性增多:静脉输注高渗葡萄糖溶液后,可引起尿糖增高。
(2)应激性糖尿。由于情绪激动、一脑血管意外、脑出血、颅脑外伤等情况下,出现暂时性高血糖和一过性糖尿。
(3)代谢性糖尿。由于内分泌激素分泌失常,糖代谢发生紊乱引起高血糖所致。最常见的是糖尿病:①尿糖检测是糖尿病诊断、病清判断、治疗效果观察及预后的重要指标之一。②尿糖与血糖检测关系。糖尿病如并发肾小球动脉硬化症,则因肾血流量减低,肾小球滤过率减低,肾糖阈增高,此时尽管血糖已超过一般的肾糖阈,尿糖检查仍可呈阴性;轻型糖尿病患者,其空腹血糖含量可能正常或轻度增高,尿糖检查亦可呈阴性,但进餐后2h,由于负载增高,可出现血糖增高,尿糖阳性。因此,疑糖尿病时,应该同时检查血糖、尿糖、餐后2h尿糖,还应该进一步做糖耐量试验,以明确糖尿病的诊断;对于糖尿病患者而言,尿糖检测无痛苦且廉价,因此,对于以饮食控制尿糖的患者,尿糖检查较为适用,但对胰岛素依赖的患者,尿糖检测结果与血糖的对应性较差,因而,宜用血糖监测患者的治疗。
(4)内分泌性糖尿。①甲状腺功能亢进。②肢端肥大症。③嗜铬细胞瘤。④Gushing(库欣)综合征。
2.血糖正常性糖尿
又称肾性糖尿。出现糖尿的原因是由于肾小管对滤过液中葡萄糖重吸收能力减低,肾糖阈减低所致的糖尿。如:①家族性肾性糖尿:如Fancbni综合征患者,空腹血糖、糖耐量试验均正常,但由于先天性近曲小管对糖的重吸收功能缺损,空腹尿糖则为阳性。②新生儿糖尿,因肾小管对葡萄糖重吸收功能还不完善所致。③后天获得性肾性糖尿:可见于慢性肾炎、肾病综合征及伴有肾小管损伤者。④妊娠期或哺乳期妇女:因细胞外液容量增高,肾滤过率增高而近曲小管的重吸收能力受到抑制,使肾糖阈减低,出现糖尿;但如出现持久且强阳性尿糖时,应进一步检查原因。
3.其他糖尿
血液中除了葡萄糖外,其他糖类有:乳糖、半乳糖、果糖一、戊糖、蔗糖等。如果进食过多或受遗传因素影响,体内糖代谢失调后,亦可使血液中浓度增高,易出现相应的糖尿。
五、尿液酮体定性检查
(一)定义
尿酮体(KET)是尿液中乙酸乙酸(占20%),β-羟丁酸(占78%)及丙酮(占2%)的总称。酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间代谢产物,当糖代谢发生障碍、脂肪分解增高,酮体产生速度超过机体组织利用速度时,可出现酮血症,酮体血浓度一旦超过肾阂值,就可产生酮尿。
(二)检测方法及评价
1.试带法
基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法而设计,是目前临床上最常用的尿酮体筛检方法。在碱性条件下,尿中的乙酰乙酸、丙酮与亚硝基铁氰化钠反应,生成紫红色的复合物。这种测试方法对乙酰乙酸的敏感度为5~10mg/dl,对丙酮的敏感度为40~70mg/dl,并且不与β-羟丁酸反应。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。应注意不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。
2.湿化学法
(1)Rothera法。在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与R-丁酸起反应。
(2)Gerhardt法。高铁离子(Fe3+)与乙酰乙酸的烯醇式基团发生赘合,形成酒红色复合物。
3.片剂法
基本原理为亚硝基铁氰化钠法。
(三)质量控制
(1)尿液要新鲜,细菌在体内外可导致乙酰乙酸的丢失;室温保存,丙酮易丢失,密闭冷藏可避免挥发,但试验时标本应置于室温中恢复温度后再检测。
(2)正确分析结果。本法对乙酰乙酸的敏感性为5mg/dl (0.5mmol/L),对丙酮的敏感性为40mg/dl(7mmol/L)。在一般情况下,葡萄糖,蛋白质,维生素C及防腐剂如甲苯,麝香草酚和甲醛都不会干扰本实验。
(四)参考值(https://www.daowen.com)
定性:阴性。定量:酮体(以丙酮计)170~420mg/L;乙酰乙酸≤20mg/L。
(五)临床意义
尿酮体检查主要用于糖代谢障碍和脂肪不完全氧化疾病或状态的诊断,强阳性试验结果具有医学决定价值。
1.糖尿病酮症酸中毒
(1)早期诊断。糖尿病由于未控制或治疗不当,血酮体增高而引起酮症,出现酸中毒或昏迷。尿酮体检查有助于糖尿病酮症酸中毒早期诊断(尿酮体阳性),并能与低血糖、心脑疾病乳酸中毒或高血糖高渗透性糖尿病昏迷相区别(尿酮体阴性)。但应注意,当患者肾功能严重损伤肾阂值增高时,尿酮体排出反而减低,甚至完全消失。故当临床高度怀疑为糖尿病酮症酸中毒时,即使尿酮体阴性也不能排除诊断,应进一步检查血酮体等。
(2)治疗监测。糖尿病酮症酸中毒早期病例中,主要酮体成分是β-羟丁酸(一般试带法无法测定),而乙酰乙酸很少或缺乏,此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。当糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,肠经丁酸转变为乙酞乙酸,反而使乙酰乙酸含量比急性期早期增高,此时易造成对病情估计过重。因此,必须注意病程发展,并与临床医生共同分析测定结果。当多次检测尿酮体均为阴性时,可视为疾病好转。
(3)新生儿。出现尿酮体强阳性,应怀疑为遗传性疾病。
2.非糖尿病性酮症者
如应激状态、剧烈运动、饥饿、禁食过久、饮食缺乏糖类或为高脂肪,感染性疾病如肺炎、伤寒、败血症、结核等发热期,严重腹泻、呕吐包括妊娠反应性、全身麻醉后等均可出现酮尿。
3.中毒
如氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等。服用双胍类降糖药(如苯乙双胍)等,由于药物抑制细胞呼吸,可出现血糖减低而尿酮体阳性的现象。
六、尿液胆红素定性检查
(一)概述
血浆胆红素有3种:未结合胆红素(UCB)、结合胆红素(CB)和δ-胆红素。成人每日平均产生250~350mg胆红素,其中,约75%来自衰老红细胞中血红蛋白的分解,另25%主要来自骨髓内未成熟红细胞的分解及其他非血红蛋白的血红素分解产物。UCB不溶于水,在血中与蛋白质结合不能通过肾小球滤膜。UCB入肝后在葡萄糖醛酸转移酶作用下形成胆红素葡萄糖醛酸,即为CB。CB相对分子质量小溶解度高,可通过肾小球滤膜由尿中排出。δ-胆红素的反应性与结合胆红素相似,但它是未结合胆红素与清蛋白通过非酶促反应形成的共价结合物,通常在血浆中含量很低;当血中CB增高,超过肾阂值时,结合胆红素即从尿中排出,尿胆红素试验可呈阳性反应。
(二)检测方法及评价
1.重氮法
干化学试带法多用此原理,在强酸性介质中,胆红素与试带上的二氯苯胺重氮盐起偶联作用,生成红色偶氮化合物。操作简单,且可用于尿自动化分析仪,目前多用此法做定性筛检试验,如果反应不典型,应进一步分析鉴定。在尿液p H较低时,某些药物或其代谢产物如毗吮和依托度酸可引起假阳性反应;尿兰母产生橘红色或红色而干扰结果。维生素C浓度达1.42mmo1/L和亚硝酸盐存在时,可抑制重氮反应而假阴性。
2.氧化法
Smith碘环法最为简单,但灵敏度低,目前已很少使用;Harrison法操作稍繁,但灵敏度较高。
(三)质量控制
(1)尿标本应新鲜,胆红素在阳光照射下易转变为胆绿素,导致胆红质的氧化可使结果出现假阴性。
(2)患者接受大量氯丙嗪治疗和尿中含高浓度的盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物可出现假阳性。使尿液颜色变红或在酸性基质下它们本身变成红色的药物,如非那吡啶(phenazopyridine)可出现假阳性。
(3)尿中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时可使结果出现假阴性。
(四)参考值
定性:阴性。
(五)临床意义
游离胆红素与葡萄糖醛酸结合生成结合性胆红素,变成水溶性并且易于通过肾脏排泄。尿液中的胆红素都是结合性胆红素(直接胆红素)。所有引起血浆结合性胆红素增高的病理因素,都能使分泌在尿液中的胆红素浓度达到检测水平。下列情况可以使血浆中胆红素增加,如:肝外性或肝内性阻塞引起的小血管血压增高,门静脉感染或纤维化,肝细胞肿胀或坏死。
尿胆红素检测主要用于黄疸的诊断和黄疸类型的鉴别诊断。
1.胆汁淤积性黄疸
又称阻塞性黄疸,因胆汁淤积使肝胆管内压增高,导致毛细胆管破裂,结合胆红素不能排入肠道而逆流入血由尿中排出,故尿胆红素阳性。可见于各种原因引起的肝内或肝外、完全或不完全梗阻,如胆石症、胆管癌、胰头癌、原发性胆汁性肝硬化、门脉周围炎、纤维化及药物所致胆汁淤滞等。
2.肝细胞性黄疸
见于各种使肝细胞广泛损害的疾病,如急性黄疸性肝炎、病毒性肝炎、肝硬化、中毒性肝炎、败血症等。因肝细胞损伤,致使肝细胞对胆红素的摄取、结合、排泄功能受损。肝细胞摄取血浆中未结合胆红素能力减低,使UCB在血中浓度增高,但受损的肝细胞仍能将UCB转变为CB。在病毒性肝炎黄疸前期,当血清总胆红素增高或黄疸不明显时,尿胆红素阳性为最早出现阳性的检测指标之一,阳性率达86%,因此尿胆红素的检测有利于病毒性肝炎的早期诊断。
3.溶血性黄疸
由于大量红细胞的破坏,形成大量的UCB,超过肝细胞的摄取、结合、排泄能力;同时,由于溶血性造成的贫血缺氧和红细胞破坏产物的毒性作用,削弱了肝细胞对胆红素的代谢功能,使UCB在血中储留而引起黄疸。但肝细胞将UCB转变为CB,并经胆管排泄均正常,因而血液中并无CB存在,故尿胆红素阴性。溶血性黄疸可见于各种溶血性疾病。
4.先天性高胆红素血症
如:①Dubin Johnson综合征。②Rotor综合征。③Gilbert综合征。④Crigler-Najjar综合征。
七、尿液的尿胆原定性检查
(一)概述
尿胆原是胆红素在肠肝循环中形成的。随胆汁分泌的胆红素在肠道内被细菌还原形成尿胆原,然后重吸收入血,逐步在肝脏内降解,部分随尿中排泄。结合胆红素排入肠腔转化为尿胆原,从粪便中排出为粪胆原。大部分UBG从肠道重吸收经肝转化为结合胆红素再排入肠腔,小部分UBG从肾小球滤过或肾小管排出后即为尿UBG。无色UBG经空气氧化及光线照射后转变成黄色的尿胆素。尿胆红素、UBG及尿胆素,俗称尿三胆。由于送检的标本多为新鲜尿标本,UBG尚未氧化成尿胆素,故一般检查胆红素和UBG,又俗称尿二胆。
(二)检测方法
1.尿胆原
(1)湿化学Ehrlich法。UBG在酸性溶液中,与对二甲氨基苯甲醛反应,生成樱红色化合物。
(2)试带法。检测原理基于Ehrlich法。UBG检测已成为尿分析仪试带法分析项目组合之一,用于疾病的尿筛检。采用Ehrlich醛反应方法,可用于定性和定量。
2.尿胆素
用湿化学Schleisinger法。
(三)质量控制
1.在下列情况下可能出现假阴性反应
(1)尿标本放置时间过长,特别是直接阳光照射下,导致尿胆原的氧化。
(2)甲醛浓度超过70μmol/L(200mg/d)l 。
(3)用大剂量的乌洛托品治疗的患者。
(4)用甲醛防腐的尿液。
2.在下列情况下可能出现假阳性反应
(1)使尿变红的药物或在酸基质中变红色的药物(如尿路抗菌药非偶吡啶)。
(2)试剂带模块中瞬间的黄色变化提示大量的胆红素的存在,但是正常的读取试验结果不受影响。在少数情况下,大约浸入尿液60s后出现绿色或蓝色变化。实际测定的尿胆原浓度大约为7μmol/L(0.4mg/dl),在此浓度时正常人尿胆原为粉红色颜色。
(3)正常和异常之间的差异是通过颜色比较,胆道完全阻塞性患者的尿液中尿胆原呈阴性不能用此种试剂带检测。
(4)本试剂带对尿胆原特异,而对重氮盐阳性的物质不起反应,不受Ehrlich试验的干扰。尿卟啉、吲哚、对氨基水杨酸、磺胺、磺酰尿和其他的物质并不干扰本试验产生红色化合物。
(四)参考值
尿胆原定性:阴性或弱阳性(稀释后阴性)。尿胆素定性:阴性。
(五)临床意义
1.尿液中尿胆原增加
主要提示两个可能的病因,即原发或继发性肝病引起的肝代谢功能紊乱和由于原发性或其他原因的继发性溶血引起的血红蛋白降解增多。
(1)肝功能负荷过大。虽然肝脏能够处理正常数量尿胆原的2~3倍,但是如果作为血红蛋白降解胆红素、尿胆原大量增多,必将超过肝脏处理能力。没有被肝脏处理的尿胆原进入血液,通过肾脏分泌到尿液中。下列因素可能引起肝功能负荷增加:血红蛋白降解增多,溶血性贫血,恶性贫血,中毒、感染或者输血等引起的血管内溶血,红细胞增多症,血大量外渗后的重吸收,肠道尿胆原形成增多,明显的便秘,小肠结肠炎,发酵过程增加,胆道感染如胆道炎尿胆原形成和重吸收增多。
(2)肝功能受损。肝脏疾病使它的功能受到影响。来自于门静脉的尿胆原不再被肝脏处理,导致尿液中大量出现尿胆原。下列因素可以影响肝功能:病毒性肝炎(极重症或疾病高峰的短期内除外),慢性肝炎和肝硬化(与实质细胞的损伤有关),中毒性肝损害(如由于酒精、霉菌、有机溶剂、药物、感染或脓毒症产生的毒素),肝细胞充血(如心梗后、急性心衰或心供血不足),肝组织缺氧(如取决于其大小及位置),胆管不完全性阻塞(取决于实质细胞损伤程度),特别是在病毒性肝炎,尿胆原尿症常见,而在主要症状是黄疸时,大多数不出现尿胆原尿症。
(3)尿胆原绕过肝脏。在某些病理情况下如肝硬化,门静脉血流减少,因此流入肝细胞的尿胆原也随之减少,导致部分的尿胆原不进入肝细胞使肾脏分泌的尿胆原增加。引起这种情况的原因有门静脉高压的肝硬化,门静脉血栓,肝静脉阻塞。
2.尿液中尿胆原呈阴性
在肝细胞产生的胆红素减少、肝细胞阻塞性胆红素分泌到肠道的胆红素减少或在严重疾病时肠道内胆红素还原产物缺乏时,尿胆原检测呈阴性。这种情况见于下列疾病:胆管无感染性胆管阻塞,肝细胞分泌胆红素完全停止(严重的病毒性肝炎、重性肝细胞中毒),肠道内缺乏正常菌丛(婴儿生理性缺陷,个别见于大量的抗生素治疗的患者)。
八、尿液血红蛋白定性检查
(一)概述
血红蛋白为含血红素的色素蛋白,正常人血浆中含有50mg/L游离血红蛋白,尿中无游离血红蛋白。当有血管内溶血时,红细胞破坏,血红蛋白释放入血液形成血红蛋白血症。若血红蛋白超过结合珠蛋白所能结合的量,则血浆存在大量游离血红蛋白,当其量超过1000mg/L时,血红蛋白可随尿液排出。其特点为外观呈浓茶色、红葡萄酒色或酱油色,隐血试验阳性。
(二)检测方法及评价
1.湿化学法
常用邻联甲苯胺法、氨基比林(匹拉米洞)法等,操作简单,但试剂稳定性差,特异性较低;尿液中混入铁盐、硝酸、铜、锌、碘化物等均可使结果呈假阳性;尿液中含有过氧化物酶或其他对热不稳定酶也可呈假阳性。
2.试带法
血红蛋白或肌红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化四基联苯胺和有机物氢过氧化物(2,5-二甲基乙烷-2,5-二氢过氧化物)反应,使四甲基联苯胺呈现绿色。在试剂带中添加活剂可以提高反应的敏感度。本试验消除了具有还原作用的维生素C的干扰,反应垫中饱含过碘酸盐的网孔,使尿液中的维生素C分解。高浓度的维生素C(500mg/dl)不会干扰试验结果。完整的红细胞在试剂带中溶解释放出血红蛋白使试剂带呈现绿色斑点;相反,尿液中游离的血红蛋白使试剂带呈现均匀的绿色。该方法基本克服了湿化学法试剂不稳定的弱点,但尿液中含有对热不稳定酶、尿液被氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生过氧化物酶,可致结果呈假阳性;大剂量的维生素C或其他还原物质导致假阴性;甲醛可使反应假阴性,大量亚硝酸盐则可延迟反应。试带法除与游离血红蛋白反应外,也与完整的红细胞反应,但在高蛋白、高比密尿液中,RBC不溶解,试带灵敏度减低。
3.胶体金单克隆抗体法
灵敏度高、特异性强、操作快速、使用方便,基本克服了化学法试带法的缺点。
(三)质量控制
(1)完整红细胞,其检测敏感度为5个红细胞/ul;血红蛋白,其检测敏感度相当于10个红细胞/ul。本试验实际检测敏感度可达到正常范围的敏感度。
(2)本试验只限于血红蛋白和肌红蛋白的测定,尿液中的其他细胞成分如上皮细胞、白细胞及精子不起反应。
(3)尿液中硝酸盐浓度超过2.2mmol/L(10mg/d)l 时(泌尿系感染时很少能达到此水平),可以影响红细胞的检测。
(4)尿液不能以甲醛做防腐剂,因为此试剂降低敏感度或出现假阴性。
(5)尿液中含有强氧化清洗剂的残余可以使试验呈假阳性。
(6)超过5g/L的蛋白尿可以衰减血红蛋白的颜色变化。
(7)在试垫上观察到独特的绿色斑点,指示存在完整的红细胞。高浓度的红细胞在试垫上呈现几乎均匀的绿色,如果用0.9%生理盐水稀释10或100倍再进行测定,即可区分完整的红细胞和游离的血红蛋白。在试垫上观察到均匀的绿色,指示为游离的血红蛋白、溶解的红细胞或肌红蛋白所致。在尿液中红细胞的部分溶血会导致试垫中分散绿色背景上有独特的绿色斑点。
(四)参考值
正常人尿液中血红蛋白阴性,红细胞为0~5个/μl。
(五)临床愈义
尿血红蛋白测定有助于血管内溶血疾病的诊断。
1.红细胞增加
可见于:
(1)尿路结石。患结石症的发病率为1%~3%,草酸盐结石(60%)、磷酸盐结石(20%)及尿酸钙结石(25%)常见。大多数患者同时表现为高尿酸血症,男性较女性常见。虽然在结石形成早期完全无痛,但是通常输尿管结石引起急性绞痛。血尿常常是结石的第一临床症状。
(2)肿瘤。血尿对于肾、输尿管及膀胱的恶性肿瘤的早期诊断具有重要意义,这种症状很重要,因为肿瘤很长时间可能无疼痛症状。
(3)肾小球肾炎。90%的肾小球肾炎可见血尿,其次是蛋白尿和高血压。肾小球肾炎常见于儿童和30岁以下的成人。
(4)肾盂肾炎。根据临床资料,肾盂肾炎发病率为5%~8%,易感人群主要是女性和老人。1/3患者中有血尿。
(5)其他疾病。血友病,血小板减少症,膀胱炎,泌尿生殖道结核,中毒和组织缺氧性损伤,肾小球退行性改变,肾乳头坏死,肾和泌尿道外伤,肾梗死,肾囊肿,多囊肾,右心室衰竭的肾充血,累及肾血管的高血压,糖尿病,红斑狼疮。
2.血红蛋白尿和肌红蛋白尿
血红蛋白尿液中没有完整的红细胞,只有游离的血红蛋白。这种情况出现在尿液中主要是因为红细胞已经在血管内破坏。血管内的红细胞溶解血红蛋白一旦超过结合珠蛋白结合能力和肾小管重吸收能力时,血红蛋白就会排泌到尿液中。通常这种现象出现在血浆血红蛋白浓度大约为60μmol/L(100mg/dl)。
肌红蛋白尿是由于肌肉损伤或肌肉坏死,当血浆肌红蛋白浓度超过9~12μmol/L(15~20mg/dl)时出现。
尿液标本中的血红蛋白与肌红蛋白很难区别,一些剧烈运动后的阳性标本是肌红蛋白尿作用的结果。
血红蛋白尿和肌红蛋白尿的疾病有:严重的溶血性贫血,严重的中毒,严重感染性疾病烧伤,剧烈运动,肌肉受伤,进行性肌病。
九、尿液白细胞定性检查
(一)检测方法及评价
试剂带法:中性粒细胞胞质内含有特异性酯酶,可作用于膜块中的吲哚酚酯,并与重氮盐反应形成紫色缩合物,其颜色深浅与中性粒细胞的多少呈正比例关系。
(二)质量控制
(1)分析试纸只与粒细胞质内的酯酶起作用,因此分析试纸只能测定粒细胞,不能测定淋巴细胞,在肾移植患者发生排异反应尿中以淋巴细胞为主时,会得到阴性结果,应参考其他检测方法,做出正确的判断。另外,白细胞破裂后,酯酶释放到尿液中,干化学的检测结果还能是阳性,而镜检则为阴性。
(2)尿液被甲醛污染,或含有高浓度胆红素,或使用某些药物时可出现假阳性;尿蛋白>5g/L,或尿液中含有大剂量先锋IV、庆大霉素等药物时,可是结果偏低或出现假阴性。
(3)尿液未混匀,尿仪的载物台上有污染物等情况都会使结果产生偏差。
(三)参考值
正常尿液阴性。
(四)临床意义
阳性主要见于泌尿系的化脓性感染,如肾盂肾炎、膀胱炎等。
十、尿液亚硝酸盐定性检查
(一)检测方法及评价
试剂带法:在尿液中的硝酸盐被细菌分解代谢为亚硝酸盐。在酸性条件下,亚硝酸盐和氨苯基磺胺重氮化反应生成重氮盐化合物,后者与3-羟基1,2,3,4-四氢苯并喹啉偶联生成红色的偶氮化合物。红色化合物的强度与亚硝酸盐的浓度呈正比,但是与感染的程度无关。检测亚硝酸盐浓度为7μmol/L(0.03mg/dl)。
(二)质量控制
1.本法对具有硝酸盐还原酶的菌尿具有特异性,但与尿p H无关
一次尿亚硝酸盐检测阴性并不能排除泌尿系统感染,因为尿亚硝酸盐与尿液中微生物数量和硝酸盐的浓度有关。即使多次尿液检测亚硝酸盐呈阴性也不能排除泌尿系感染的可能,因为泌尿系感染的许多致病微生物并不含有硝酸盐还原酶。如果临床怀疑有泌尿系感染,就应该进行微生物种类的鉴定和微生物计数。
2.下列情况可能引起假阴性
排尿过于频繁(尿液在膀胱停留时间太短),饥饿状态,非胃肠道的营养,无蔬菜性食物,标本存放时间太长(检测不应超过标本收集后4h)。
3.下列情况可能引起假阳性
标本存放时间太长,细菌繁殖,在药物(如芬贝西宁)治疗过程中,使用不干净的容器留标本。
(三)参考值
正常人尿液中亚硝酸盐为阴性。
(四)临床意义
尿液中亚硝酸盐阳性是细菌性泌尿系感染常见的症状。亚硝酸盐检查阳性可以提示急性感染。尿液中排泄的亚硝酸盐只是细菌还原硝酸盐的产物。正常人尿液中亚硝酸盐呈阴性。研究结果显示:大剂量食入亚硝酸盐或含有亚硝酸盐的药物治疗都不能引起尿液中的亚硝酸盐分泌。一般正常的饮食能够保证尿液中细菌分解足够的硝酸盐浓度。
泌尿系感染最常见的致病菌如大肠杆菌属,其他常见的致病菌如克雷白氏杆菌属,气杆菌属,柠檬酸杆菌属,沙门菌属及部分肠球菌属,葡萄球菌属,假单胞菌属,能还原尿液中的硝酸盐生成亚硝酸盐。大约有50%的泌尿系感染能够通过亚硝酸盐检测,但是满足下列情况时检测率可以提高到90%:①尿液在膀胱停留的时间:反复检测患者第一次晨尿,因为亚硝酸盐形成是一个生物过程,需要尿液在膀胱停留4~6h。②尿液中硝酸盐的浓度:患者在感染前,正常蔬菜饮食。正常的蔬菜饮食可以保证试验足够的硝酸盐水平。③无抗生素治疗:在抗生素和化学治疗过程中,酶的代谢和微生物的繁殖受到影响,所以没有形成试验检测足够的亚硝酸盐浓度。因此,在分析前,应该停止抗菌治疗必须至少3d。
十一、尿液微量白蛋白定性检查
(一)概述
微量清蛋白尿是指尿液中清蛋白超过正常水平、但低于常规试带法可检出的范围。微量清蛋白尿是早期糖尿病肾病的临床主要征象,其概念主要用以区别传统的临床蛋白尿。
(二)检测方法及评价
尿液微量清蛋白尿,用磺基水杨酸法、加热乙酸法及试带法基本不能检出,因而多采用免疫学方法,如放射免疫法、酶免疫法、免疫浊度法等。微量清蛋白标本收集及报告方式有3种:
(1)定时尿法计算出单位时间内的排出率(μg/min或mg/24h)。
(2)随机尿法。用肌配比值报告排出率(mg/mmol或mg/g)。
(3)晨尿法。报告每升尿排出量(mg)。推荐以24h尿清蛋白排泄总量,即尿清蛋白排泄率(UAE)表示。
(三)参考值
成人:<30mg/24h。
(四)临床意义
尿微量清蛋白检测主要用于早期肾损害的诊断,尤其当尿清蛋白排泄率持续超过20μg/min尿,常作为糖尿病、系统性红斑狼疮(SLE)等全身性疾病早期肾损害的敏感指标。微量清蛋白尿还见于:①大多数肾小球疾病、狼疮性肾炎、肾小管间质疾病等。②妊娠子痛前期、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤的肾衰竭、充血性心力衰竭、肝癌、肝硬化等。③高血压、肥胖、高脂血症、吸烟、剧烈运动与饮酒等。
十二、尿液维生素C定性检查
(一)检测方法及评价
干化学试剂带法:维生素C具有1,2-烯二醇还原基团,在酸性条件下能将氧化态的粉红色2,6-二氯靛酚染料还原为无色的2,6-二氯二对酚胺。使试纸颜色由粉红色变成无色,颜色变化的强弱与尿中VC的浓度相关。
(二)参考值
正常尿液为阴性。
(三)质量控制
(1)分析试纸只能测定还原性的维生素C,可能与其他检测方法的测试结果不同。
(2)在p H>4.0时,尿液中的酚和巯基化合物等内源性物质可干扰测试,使测试结果偏高;另外半胱氨酸、硫代硫酸钠也干扰测试,使测试结果偏高。
(3)当尿液中含有氧化性物质时,可氧化维生素C,使测试结果偏低。
(4)维生素C在碱性尿中极不稳定,容易分解,因此尿标本应及时检测。
(四)临床意义
(1)检测尿液中维生素的含量可以测试人体的营养状况,口服维生素C500mg后,尿维生素C排泄量在15~57μmol(3~10mg)/4h内为正常;大于57μmol(10mg)/4h为充裕;小于17μmol(3mg)/4h为不足。
(2)尿液维生素C降低,常见于维生素C摄入量不足或坏血病。
(3)尿液维生素C长期增高可能与肾结石形成有关。
(4)在尿液分析试纸中,VC试纸还可以判断尿液中的VC对其他试纸的影响程度。