脑脊液的其他检查
第五节 脑脊液的其他检查
一、细菌学涂片检查
临床怀疑流行性脑脊髓膜炎或化脓性脑脊髓膜炎时，应做细菌学涂片检查。操作如下：
（1）将脑脊液立即离心沉淀，取沉淀物涂片2张。
（2）涂片应在室温中或置37℃温箱中干燥，切勿以火焰烘烤。
（3）经火焰固定后，一张涂片用亚甲蓝染色30s，另一张做革兰染色。
（4）注意细胞内外的细菌形态，报告时应予以描述。
二、真菌检查
以新型隐球菌检查为例：
（1）取脑脊液，以2000r/min离心10min，以沉淀物做涂片，加优质经过滤的细墨汁1滴，混合，加盖玻片检查。
（2）先用低倍镜检查，如发现在黑色背景中有圆形透光小点，中间有一细胞大小的圆形物质，即转用高倍镜仔细观察结构，新型隐球菌直径5～20μm，可见明显的厚荚膜，并有出芽的球形孢子。
（3）报告方式。墨汁涂片找到“隐球菌属”。
三、脑脊液分光分析法检查
1．原理
当红细胞混入脑脊液后，经过一定时间，红细胞破坏，可释放出血红蛋白，以氧合血红蛋白、高铁血红蛋白（Met Hb）或胆红素等色素形式存在。它们的最大吸收峰值有差异，可用分光光度法鉴别。
2．器材
可用波长能自动扫描的各类型分光光度计或国产721型等分光光度计。
3．操作
（1）取得脑脊液后，立即以3000r/min离心5min。
（2）上清液在分光光度计上自动描记，波长选择220～700nm。用蒸馏水调空白，然后按吸收曲线形态和吸光度数值加以分析，如病理标本致脑脊液色泽太深者，可用生理盐水稀释3～5倍后再扫描。
（3）如没有连续自动描记的分光光度计时，则可分别在415nm、460nm、540nm、575nm、630nm波长读取吸光度。
4．结果判断
（1）正常脑脊液，仅可见280nm处的蛋白吸收峰，而无其他吸收峰出现。
（2）如在415nm、460nm、540nm、575nm、630nm有色素吸收峰为阳性。
（3）Hb O2为主时，最大吸收峰在415nm；出现少量Met Hb后，最大吸收峰向406nm移动，同时630nm处出现Met Hb另一特异吸收峰；若脑脊液中以Met Hb为主时，最大吸收峰移至406nm。
5．临床经验
（1）临床上采取脑脊液标本时，应按先后二管收集法立即送检。这样将先后二管脑脊液的分光分析结果进行比较，将有助于损伤血性与病理血性脑脊液的鉴别。
（2）穿刺损伤的血性脑脊液标本如未及时检验，则可因红细胞在试管内破坏后释出血红蛋白，造成假阳性。
6．临床意义
（1）新鲜出血时，氧合血红蛋白出现最早，经2～3d达最高值，以后逐渐减低。而胆红素则在2～3d后始出现，并逐渐增高。如在蛛网膜下腔出血的脑脊液中，发病2h内即可发现氧合血红蛋白，3～4d后出现胆红素吸收峰，其量逐渐增加，而氧合血红蛋白则有减少的倾向，至第3周，逐渐吸收消失。
（2）脑脊液中氧合血红蛋白的出现，可作为新鲜出血或再出血的指标；高铁血红蛋白的出现，为出血量增多或出血时间延长的标志；胆红素的出现可说明为陈旧性出血。
四、酶学检查
脑脊液酶比血清少，仅20多种，某些神经系统疾病会引起酶活性增高，对诊断有意义。
（1）乳酸脱氢酶（LDH）测定：正常人CSF含量仅为血清的1/10，为8～32U。大多数细菌性脑膜炎、脑血管病、脑瘤等有脑组织坏死时LDH增高，其中细菌性脑膜炎以LDH1、LDH2、LDH3增高为主，而病脑以LDH4、LDH5增高为主。
（2）肌酸激酶（CK）测定：CK有3种同工酶，脑脊液中的同工酶全部是CK-BB。正常CSF为0.94±0.26U/L，其增高主要见于化脑，其次为结脑、脑血管疾病及肿瘤。病脑时正常或轻度增高。
（3）天门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定：正常CSF为5～20U/L，CSF中活性增高见于脑血管病变、中枢神经系统感染、脑肿瘤、脱髓鞘病、颅脑外伤等。
（4）腺苷脱氨酶（ADA）测定：脑脊液中参考范围为0～8U/L，结脑时明显增高，常用于该病的诊断和鉴别诊断。(https://www.daowen.com)
（5）溶菌酶（Lyz）测定：正常脑脊液微量，结脑时脑脊液中明显增高，化脑、病脑时仅轻度增高。可作为鉴别诊断的指标。
（6）神经元特异性烯醇化酶（NSE）测定：正常脑脊液NSE活性为1.14±0.39U/L，含量为5.29±2.81μg/L，中枢神经系统受损、脑缺氧、脑缺血患者脑脊液中NSE活性增高。
五、免疫学检查
（1）免疫球蛋白检测。中枢神经系统炎症Ig G、Ig A、Ig M均可增高，其中化脑以Ig M增高显著，而结脑则以Ig G增高为主；病脑时Ig G、Ig A轻度增高，晚期有Ig M增高；Ig E增高见于脑瘤；神经梅毒Ig G显著增高。
（2）结核性脑膜炎抗体测定。若脑脊液中抗体水平高于自身血清，有助于结脑的诊断。
（3）乙型脑炎病毒抗原测定。检测细胞内乙脑病毒抗原，可用于乙脑的早期诊断，但阳性率不高。
（4）用单克隆技术检测脑脊液中的癌细胞。当常规细胞学检查脑脊液中癌细胞形态难以肯定或出现假阴性结果时，采用单克隆抗体技术检测脑脊液中癌细胞，不仅有助于癌性脑病的早期诊断，还可鉴定癌性细胞的组织来源。
六、蛋白电泳
蛋白电泳是利用各种蛋白质在电场作用下迁移速度不同而分成若干区带，不同区带对中枢神经系统疾病的诊断和鉴别诊断有一定意义。
1．器材
透析膜可商品化购买，亦可用玻璃纸袋；电泳设备同血清蛋白电泳。
2．试剂
透析液为聚乙二醇20000氯化钠溶液：称取聚乙二醇20000 30.0g，氯化钠0.9g，加90ml蒸馏水溶解，再加巴比妥缓冲液（p H8.6，0.05mol/L）10ml，混匀，溶液p H为7.4。透析液亦可用500g/L的右旋糖酐溶液。
3．方法
先将CSF加入透析袋内，放入聚乙二醇20000氯化钠溶液中，室温透析6～7h（如用500g/L的右旋糖酐溶液，透析2～4℃时需15h），浓缩至0.05～0.1ml即可。浓缩的脑脊液按血清蛋白电泳的方法进行电泳分析。
4．正常参考值
正常脑脊液蛋白电泳带与血清蛋白电泳带有不同之处：脑脊液出现较多的前白蛋白而血清中较少；CSF的β-球蛋白略高于血清；γ-球蛋白仅为血清的一半。
前蛋白0.02～0.06；白蛋白0.55～0.69；α1球蛋白0.03～0.08；α2球蛋白0.04～0.09；β球蛋白0.10～0.18；γ球蛋白0.057～0.162。
5．临床意义
（1）前白蛋白增高多为中枢神经系统退行性变的表现，见于舞蹈病、帕金森病；其减少见于脑膜炎、脑肿瘤、脑萎缩。
（2）白蛋白增高见于脑血管病，如脑溢血、脑梗死等。
（3）α1球蛋白增高见于中枢神经系统感染。
（4）α2球蛋白增高见于脑肿瘤、转移癌和胶质瘤。
（5）β球蛋白增高见于某些退行性病变、动脉硬化等。
（6）γ球蛋白增高见于占位性病变和暂时性脑功能失常，如脑瘤、脑外伤、癫痫、周围神经炎、多发性硬化症等。
另外，可根据CSF蛋白电泳结果计算蛋白商（proteinquotien）t，其计算公式为：
蛋白商＝球蛋白/白蛋白。参考范围为0.4～0.8。
蛋白商增高：提示球蛋白增高，见于脑脊髓膜炎、神经梅毒、多发性硬化征、亚急性梗死性全脑膜炎等。
蛋白商降低：提示白蛋白增高，见于脊髓压迫症、脑瘤、化脓性脑膜炎的急性期等。
七、猪囊虫抗体
1．原理
用猪囊虫抗原包被聚苯乙烯反应板微孔，检样中的抗猪囊虫抗体与包被抗原结合，依次加入酶标抗入Ig G和底物溶液，依据呈色深浅，可判断脑脊液中抗猪囊虫抗体（cysticercosis antibody）的存在。
2．参考值
阴性（ELISA法）。
3．临床意义
阳性者可诊断为猪囊虫病，本病患者的阳性率达98％。此酶联免疫吸附试验测定囊虫抗体是一种特异性强、灵敏度高的方法。有助于绝大多数脑囊虫病患者的诊断。