泪液的其他检查

第二节 泪液的其他检查

一、泪液的生化与免疫检查

（一）泪液溶菌酶测定

1．平皿法

将溶壁微球菌加入琼脂中制成培养平皿，用吸有一定体积的泪液和不同浓度溶菌酶标准液的滤纸片贴在琼脂面上，置于37℃温箱，10～12h后取出测量溶菌圈直径，与已知浓度的标准比较，计算出泪液溶菌酶浓度。

2．比浊法

将泪液标本加到含溶壁微球菌的缓冲液中，混匀后立即用光比色计测得吸光度A1，然后放入37℃水浴30min后再测吸光度为A2，两次吸光度之差（A1-A2）代表标本中溶菌酶的活性；与同样处理的标准比较，计算标本中溶菌酶的浓度。

3．免疫学测定方法

有单纯免疫扩散法、放射免疫扩散法等。

4．临床意义

泪液溶菌酶浓度在1～2g/L，随着年龄的增长而增加，但到45岁以后开始下降，婴儿期也偏低，与性别无明显关系，也无明显的日周期变化。

泪液溶菌酶浓度降低见于活动期沙眼、单孢病毒性角膜炎、干性角结膜炎、原发性SS患者，尤其是后者，泪液溶菌酶浓度明显下降。泪液溶菌酶降低的还有眼细菌性感染、角膜溃疡、虹膜睫状体炎、儿童严重营养不良、使用β－肾上腺能受体阻滞剂药品，以及烟雾和化学气体的环境污染等。Temel等采用放射免疫扩散法研究发现佩戴角膜接触镜者泪液溶菌酶含量偏高，虽然大多数佩戴者并无不适表现，也无外眼炎症的病理学征象，但角膜接触镜毕竟对角膜是一种刺激，所以引起溶菌酶的改变。

（二）免疫球蛋白测定

1．lg G、lg M、lg A

lg G和lg M增高见于流行性出血性结膜炎患者；沙眼未合并细菌感染时可减低；角膜移植排斥反应发生时泪液lg G含量升高，而排斥反应治愈后，lg G含量恢复正常，可以作为监测排斥反应的有效指标。lg A增高见于细菌性结膜炎角膜溃疡、流行性出血性结膜炎患者；减低可见于单纯疱疹性角膜炎、顽固性结膜炎、浅层结膜炎、蚕蚀性结膜炎等；对行准分子激光屈光性角膜切削术（PRK）患者泪液免疫球蛋白分析表明，术后初期三者含量均下降，尤以lg A明显，然后逐渐恢复或超出，又以lg A升幅最大，可持续达半个月。

2．分泌型免疫球蛋白A（SIg A）

SIg A是含有分泌片和J-链的二聚体，存在于初乳及黏膜分泌物如泪液、唾液、胃肠道及呼吸道分泌物中，由黏膜中浆细胞分泌产生，提供给体抵抗微生物入侵的第一道防线，与溶菌酶和乳铁蛋白一起，在眼组织的局部体液免疫中发挥作用。泪液中并存SIg A和lg A，来自泪腺。健康人泪液SIg A浓度范围在150～550mg/L。单纯疱疹性角膜炎（HSK）患者SIg A明显降低，慢性结膜炎、沙眼等眼表感染局部免疫力降低，SIg A水平也降低。(https://www.daowen.com)

3．lg E

泪液lg E主要来自血清，与过敏反应有关。

二、泪液及眼分泌物的微生物检查

（一）细菌检查

1．显微镜检查

标本直接涂片，革兰染色后镜检，根据涂片得出初步印象，淋病奈瑟菌的检查要求采集标本后立即进行。

2．细菌培养

普通细菌培养方法是将标本接种血平板，经35℃±1℃培养24h后观察结果，若有菌落生长，则挑取可疑菌落进行鉴定。培养48h还无菌生长则可报告。

（二）沙眼衣原体检查

试验方法：首先擦去结膜表面上分泌物，然后用无菌小刀刮取穹窿部及眼结膜上皮细胞，再用链霉素处理后备检。标本涂片、干燥、固定，最后用Giemsa染色后普通显微镜检查，沙眼患者结膜上皮细胞内可检出包涵体，也就是由红蓝色原体及深蓝色始体颗粒聚集而成的结构。此外，也可行碘染色或异硫氰酸荧光（FITC）标记的沙眼衣原体单克隆抗体染色。

还有培养方法、免疫学方法检测抗沙眼衣原体抗体、分子生物学方法（PCR）检测沙眼衣原体核酸，但是沙眼衣原体培养很不方便，很难直接用于临床检验。

（三）真菌检查

1．显微镜检查

无菌方法采取的泪液标本或分泌物或角膜刮片用20%氢氧化钠液处理后涂片，光镜下查找有无菌丝或孢子，也可用革兰染色后镜检。

2．真菌培养

泪液标本接种沙保斜面琼脂培养基及液体培养基，按真菌常规方法进行培养、鉴定。