7.2 过表达Myc抑制scrib下调及Hep过表达诱导的细胞迁移
为了进一步验证Myc在果蝇体内过表达能够抑制细胞迁移,我们又用了另一个公认的果蝇翅成虫盘细胞迁移模型进行检测[36,56,106,125]。与前面的结果相同,用ptc-Gal4沿成虫盘的前后轴特异性下调细胞极性基因scrib表达会激活MMP1的表达(图7-2 B″)并促使细胞向成虫盘后部迁移(图7-2 B′,O)。这些表型可以被d Myc和c Myc1的过表达所部分抑制(图7-2 D,F,O),而在此基础上再过表达d Max则可以更好地抑制迁移发生(图7-2 E′,G′,O)以及MMP1激活(图7-2 E″,G″),尽管单独过表达d Max不会对迁移表型产生影响(图7-2 C,O)。


图7-2 Myc过表达抑制细胞极性基因缺失或Hep过表达引起的细胞迁移(见彩图13)(https://www.daowen.com)
(A—N)荧光显微镜3龄幼虫翅成虫盘MMP1抗体染色图片。与对照相比(A,H,ptc-Gal4 UAS-GFP/+),scrib下调(B,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-scrib-IR)或者过表达Hep WT(I,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-Hep WT)引起的细胞迁移表型及MMP1的激活不会被过表达d Max抑制(C,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-scrib-IR;UAS-d Max/+.J,ptc-Gal4 UASGFP/UAS-Hep WT;UAS-d Max/+),可以被过表达d Myc及c Myc1部分抑制(D,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-scrib-IR;UAS-d Myc/+.F,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-scrib-IR;UAS-c Myc1/+.K,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-Hep WT;UAS-d Myc/+.M,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-Hep WT;UAS-c Myc1/+),而这种抑制效果可被同时过表达d Max进一步加强(E,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-scrib-IR;UAS-d Myc,UAS-d Max/+.G,ptc-Gal4 UAS-GFP/UAS-scrib-IR;UAS-c Myc1,UAS-d Max/+.L,ptc-Gal4 UASGFP/UAS-Hep WT;UAS-d Myc,UAS-d Max/+.N,ptc-Gal4 UAS-GFP/UASHep WT;UAS-c Myc1,UAS-d Max/+)。
(O—P)分别为A′—G′及H′—N′的细胞迁移统计数据。P值由t检验算出,表示平均值+S.D.,n>10,(***P<0.001,**P<0.01,ns,no significancy)。
此外,在ptc-Gal4作用下过表达JNK上游激酶Hep也能够产生类似的迁移表型并同时伴随着MMP1的激活(图7-2 I,P)。与前面的结果类似,过表达d Myc或者c Myc1也能够部分抑制该迁移表型(图7-2 K,M,P),而同时过表达d Myc+d Max或者c Myc1+d Max则进一步抑制了ptc>Hep WT引起的细胞迁移及MMP1的激活(图7-2 L,N,P)。
以上实验结果进一步证明了果蝇体内过表达Myc蛋白能够降低MMP1的表达并抑制细胞迁移的发生。