六、血红蛋白

六、血红蛋白

健康人血浆中大约有50mg/L游离血红蛋白（Hb），但尿液中无游离Hb。当发生血管内溶血时，大量Hb释放入血液形成血红蛋白血症（hemoglobinemia）。若Hb量超过结合珠蛋白结合能力时，血浆游离Hb可经肾小球滤出，超过1.00～1.35g/L时，Hb可随尿液排出，即为血红蛋白尿（hemoglobinuria）。因此，溶血时是否出现血红蛋白尿取决于以下三个因素：血浆内游离Hb的含量、结合珠蛋白的含量和肾小管重吸收能力。

（一）检测原理

1.干化学试带法　过氧化物酶法。血红蛋白含有血红素基团，具有过氧化物酶样活性，能催化H2O2作为电子受体氧化色素原呈色，借以识别微量血红蛋白的存在，其呈色深浅与血红蛋白含量呈正比。常用的色素原有邻联甲苯胺、氨基比林和四甲基联苯胺（3，3'，5，5-tetram-ethylbenzidine，TMB）等。

2.化学法　与干化学试带法反应原理一致。常用方法有邻联甲苯胺法、氨基比林（匹拉米洞）法等。

3.免疫法　采用免疫胶体金法测定原理。

（二）方法学评价

1.干化学试带法　操作简单、快速，可作为尿液Hb的筛检试验，目前广泛应用于临床。

不同试带检测灵敏度有所差异，一般为0.15～0.30mg/L，除与游离Hb反应外，也与完整的红细胞反应。但在高蛋白、高比重尿液中，红细胞不溶解，此时结果只反映Hb的量。①假阳性：尿液中含有不耐热性触酶、尿液被强氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生过氧化物酶。②假阴性：尿液中含大量维生素C或其他还原物质、过量甲醛、大量亚硝酸盐（反应延迟）。

2.化学法　邻联甲苯胺法灵敏度为0.3～0.6mg/L。操作简单，但试剂稳定性差，特异性较低。

假阳性：尿液中有铁盐、硝酸、铜、锌、碘化物等，或过氧化物酶、其他不耐热性触酶。

3.免疫法　操作简便，灵敏度高（Hb 0.2mg/L），特异性强，不受鸡、牛、猪、羊、兔Hb（500mg/L）、辣根过氧化物酶（200mg/L）干扰，可作为确证试验。(https://www.daowen.com)

（三）质量保证

1.检测前　尿液标本要新鲜，检测前将尿液煮沸约2分钟，以破坏白细胞过氧化物酶或其他不耐热性触酶。

2.检测中　做好2种水平的室内质控或设置阳性对照，验证3%过氧化氢或试带，以确保其有效性和可靠性。

3.检测后　正确分析审核检测结果，及时与临床沟通，对异常结果或不能作出合理解释的结果，要选用其他方法进行验证。

（四）参考区间

阴性。

（五）临床意义

尿液出现Hb是血管内溶血的证据之一。因此，尿液Hb测定有助于血管内溶血性疾病的诊断。常见血管内溶血的因素与疾病见表2-20。

表2-20　常见血管内溶血的因素与疾病