八、胆红素
胆红素(bilirubin)包括非结合胆红素(unconjugated bilirubin,UCB)、结合胆红素(conjugated bilirubin,CB)和δ-胆红素3种,血浆中以前两者为主。
健康人的血液中结合胆红素含量很低(<4μmol/L),尿液中不能检出。当血液结合胆红素增高,超过肾阈值时,结合胆红素即可从尿液排出。
(一)检测原理
1.偶氮法 试带法多采用此原理。在强酸性介质中,结合胆红素与重氮盐发生偶联反应呈红色。其颜色深浅与胆红素含量呈正比。
2.氧化法 ①Harrison法:结合胆红素被硫酸钡吸附而浓缩,与FeCl3反应,被氧化为胆青素、胆绿素和胆黄素复合物,呈蓝绿色、绿色或黄绿色。呈色快慢和深浅与胆红素含量呈正比。②Smith碘环法:胆红素被碘氧化成胆绿素,在尿液与试剂接触面呈现绿色环。
(二)方法学评价
胆红素检测的方法学评价见表2-21。
表2-21 胆红素检测的方法学评价
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(三)质量保证
1.检测前 胆红素在强光下易氧化为胆绿素,1小时后下降约30%。应使用棕色容器和新鲜尿液标本检测尿胆红素。
2.检测中 应规范化操作,做好两种水平室内质控,并定期用阳性标本检测试带,确保试带质量。试带应放于阴凉、干燥处,密封避光保存,并注意有效期。
Harrison法检测尿液胆红素,尿液中要有充足的硫酸根离子,故当加入FeCl3后未见足够的BaCl2沉淀时,可再加适量硫酸铵,促使沉淀产生。
3.检测后 干化学试带法操作简便,目前多作为定性筛检试验,如反应颜色不典型或结果可疑时,可采用氧化法(Harrison法)验证。
(四)参考区间
阴性。
(五)临床意义
尿液胆红素检查主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断。尿液胆红素阳性见于阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸,而溶血性黄疸为阴性。