10.2.3 杂交细胞的筛选

更新于 2026年10月13日 版权声明
10.2.3 杂交细胞的筛选

常用HAT选择培养基对杂交细胞进行筛选。由于选用的是酶缺陷型骨髓瘤细胞,不能在HAT培养液中生长;正常的B淋巴细胞虽可在HAT培养液中生长,但在体外只能短期生存,由于不能增殖最终也是死亡。因而只有融合的杂交瘤细胞才能存活下去并继续生长,这样就可以把杂交细胞筛选出来。(https://www.daowen.com)

脾中有多种B细胞,融合后也必然产生很多种杂交细胞,而其中只有部分能分泌针对特定免疫原的特异性抗体,因此必须对杂交瘤细胞生长孔内的上清液进行测定,找出可以分泌特异抗体的杂交瘤细胞。检测抗体的方法应根据抗原性质、抗体类型的不同选择不同的筛选方法。一般以方法快速、简便、特异、灵敏为选择原则。常用的检测抗体的方法有放射免疫测定法、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫荧光检测法、间接血凝测定法和免疫组织化学检测法等。其中以ELISA应用最为广泛。无论用哪一种方法,都应设置阳性(免疫小鼠的血清)和阴性(正常小鼠的血清)作为对照。

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