2.3 DNA聚合酶和逆转录酶

2.3 DNA聚合酶和逆转录酶

DNA聚合酶(DNA polymerase)是指在DNA(或RNA)模板指导下,以四种脱氧核糖核苷酸(dNTP)为底物,在引物3'-OH末端聚合DNA链的一类酶。根据所使用模板不同,DNA聚合酶可以分为两类:一类是依赖DNA的DNA聚合酶,包括大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段(Klenow酶)、T4DNA聚合酶、T7DNA聚合酶等;另一类是依赖RNA的DNA聚合酶,如逆转录酶。这些酶的共同特点在于,它们能够通过聚合作用把脱氧核苷酸加到双链DNA分子的3'-OH端。这种聚合能力是DNA聚合酶的一种重要特性。大多数DNA聚合酶,例如大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ、Klenow酶和T4DNA聚合酶等,其聚合能力都比较低,掺入不到10个核苷酸之后,就会从引物模板上解离下来。相反地,T7 DNA聚合酶则具有很强的聚合能力,可以给引物模板掺入高达数百个核苷酸,仍不会发生解离现象。这种特性对于合成长的DNA互补链是很有用的。DNA聚合酶的部分性质见表2-4。

表2-4 DNA聚合酶的部分性质

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