基因工程三步曲

基因工程三步曲

剪裁目的基因和运载体

进行这一操作的关键在于“分子剪刀”的型号必须相同，即用同一种限制性核酸内切酶，分别对运载体(质粒)和供体的目的基因(即图8—1中的供体DNA部分)进行剪裁(图8—1a)。这样经剪裁后，目的基因与运载体具有相互吻合(碱基互补)的黏性末端(图8—1b)。

目的基因与运载体结合

由于目的基因与其运载体具有互补的黏性末端，当两者混合时，它们便会根据碱基互补原则组合成环状重组DNA分子，剩下的两个缺口用DNA连接酶连接起来，就构成了重组(或杂种)DNA分子(图8—1c)。

重组DNA进入寄主和表达

目的基因(如人的胰岛素基因)随杂种DNA或重组DNA分子进入寄主(如细菌，图8—1d)后，如果目的基因得到表达(如产生人的胰岛素)，则基因工程就算大功告成了(图8—1e)。

图8—1　基因工程示意图