3　标本制作

（1）材料

选择光萼百合、蓖麻、贴梗海棠等成熟的花药，放在白纸上轻轻拍打，这样花粉便散落在白纸上，现在可将它们收集起来进行培养。

（2）培养基

在培养皿或三角瓶中倒入10％～20％的葡萄糖（白糖也可）溶液50毫升，再加入10～20ppm的硼酸数滴，将收集起来的花粉撒在培养基上，注意千万不要摇动，以免花粉下沉，影响萌发。然后放在20℃左右的温箱中进行培养，以后每小时观察一次，直到多数花粉萌发为止。

（3）固定

将已萌发的花粉培养液50毫升倒入50毫升的纳瓦兴氏固定液中，固定5小时左右，用水多洗几次，直至将酸性洗净为止，换水时可用离心机沉淀，然后用吸管吸去上面的水分。

（4）染色

①2％活性洋红水溶液染色，染色时间6～8小时，花粉管染成浅红色，细胞核呈玫瑰红色。

②l％番红溶液（用95％酒精100毫升加l克番红粉末配制而成）染色3～5小时，染色前须进行脱水，在50％、70％、80％酒精中脱水各20～30分钟。在番红液中染色3～5小时。花粉管为浅红色，细胞核为深红色。

③0.5％固绿酒精液（在95％酒精100毫升中加入0.5克固绿粉末）染色2～3小时。

（5）脱水、透明、封固

经过染色的材料放在95％纯酒精中脱水（每级酒精2～5分钟）→等量纯酒精二甲苯液5分钟→二甲苯（Ⅰ）3分钟→二甲苯（Ⅱ）3分钟，再用吸管吸取一滴材料，放在载玻片上，滴上中性树胶，盖上盖玻片，并在载玻片的右边贴上标签。在显微镜下能够看到伸长的花粉管，在花粉管前端还能看到营养核和生殖核。