7.4.1 Wnt 经典信号对巨噬细胞自噬率的调控作用
自噬率是利用一种常用的酸性细胞器标记技术来检测自噬发生的一种重要指标,主要是利用荧光染料单丹黄酰尸胺(Monodansylcadaverine,MDC)能特异地使酸性细胞器着色的特点,检测自噬体与溶酶体融合后的自噬溶酶体的示踪剂。但是该方法也有明显的不足之处,那就是只要是酸性细胞器都会被染色,无法区别细胞内着色的是溶酶体还是自噬溶酶体,要结合其他的结果一起来判断。为了检测Wnt 经典信号对BCG 感染后细胞自噬率的影响,我们首先用MDC 处理RAW264.7 细胞,用流式细胞术检测细胞自噬的发生率。结果如图7-6 所示,与对照组细胞相比,BCG 感染上调了巨噬细胞自噬率;而Wnt3a 激活Wnt 经典信号后降低了BCG 感染后巨噬细胞自噬率。由此可见,Wnt 经典信号通路降低BCG 感染后巨噬细胞的自噬率。

图7-6 Wnt 经典信号对BCG 感染后巨噬细胞自噬率的影响