二、实验原理
2025年09月26日
二、实验原理
种子生活力(seed viability)是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生活力。测定种子生活力常采用萌发实验,即在适宜的条件下,让种子吸水萌发,在规定的时间内统计发芽种子所占的百分比。但是,采用发芽实验测定种子的生活力所需时间较长,有时在生产上或种子贸易过程中,需要较快地知道种子的生活力,采用萌发实验就无法满足这些要求。另外,处在休眠状态下的种子虽然不能萌发,但仍然具有生活力,显然采用萌发实验是无法测定休眠种子的生活力的。而采用以下的化学方法,可以较快地测定种子的生活力。
(1)TTC法:氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80 mV的氧化还原色素,凡有生活力的种胚在呼吸作用过程中都会发生氧化还原反应,而无生活力的种胚则无此反应。当TTC渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH或NADPH)上的氢还原时,便由无色的氯化三苯基四氮唑(TTC,可溶于水)变为红色的三苯基甲腙(TTCH,不溶于水),因此有生活力的种子即被染成红色。
(2)染料染色法:有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性,有选择吸收外界物质的能力,一般染料不能进入细胞内,胚部不染色。而丧失生活力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可自由进入细胞内使胚部染色。所以可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生活力。
(3)荧光法:具有生活力的种子的种皮和死亡的种子的种皮对物质的透性是不同的,生活力衰退或已经死亡的细胞原生质的透性会增加。植物种子中通常含有一些能够产生荧光的物质,如某些黄酮类、香豆素类、酚类物质等。当浸泡生活力衰退或已经死亡的种子时,细胞内的荧光物质很容易外渗。因此,可以通过直接观察种胚荧光或者观察荧光物质渗出的多少来鉴定种子的生活力。