四、操作步骤
1.倒平板
将两种固体培养基灭好菌后，在无菌条件下分别倒平板。
倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶，置火焰旁边，左手将试管塞或封口膜（瓶塞）轻轻地去除，使试管或瓶口保持朝向火焰；然后用右手边缘或小指与无名指夹住管（瓶）塞（也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中）。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速倒入培养基约15 mL（图2-1），加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。倒好平板，最好尽快使用，如若长时间不使用建议暂时放在4℃冰箱保存。
图2-1 倒平板流程图
2.从实验材料中分离微生物
分别切取不同植物材料大小约5 mm×5 mm，用70%乙醇消毒5 s，3%次氯酸钠表面消毒30 s，无菌水冲洗3～4次，然后在无菌条件下分别接种到两种培养基上，培养2～3 d，待菌产孢后纯化，初步鉴定到属。
技能提升
倒好平板后，你还可以做什么？
1.分别在灭菌的平板上按掌印：将洗过的手、没洗的手分别按压在培养基上，进行菌种的接种；将接种好的培养基编号并倒置于培养箱中培养观察，通过实验结果的观察强化学生对洗手重要性的认知。
2.将灭菌后的培养基开盖，在树下、教室、洗手间放置相同时间后盖盖，编号并装好倒置于培养箱中培养观察，有助于学生理解植物净化空气的作用。
学无止境
微生物接种方法：
（1）液体接种法：肉汤、胨水、发酵管等均系液体培养基，用于增菌或观察细菌生长现象和检测细菌的生化反应。步骤：①持好菌种管及培养基管。②灭菌接种环，由菌种管取菌，伸入培养基管中，在接近液面的管壁上方轻轻研磨，并沾取少许培养基液体调和，使接种物充分混合于培养基的液体中。③液体培养一般以18～24 h观察生长特征为好。
（2）穿刺接种法：试管内半固体培养基采用此法接种，多用于保存菌种、观察动力及做厌氧培养等，亦可用于细菌的某些生化反应。步骤：①持好菌种管和培养基管。②已灭菌接种针从菌种管取菌。③接种针直刺入培养基的中心（半固体或一般琼脂高层）直达管底部（深入培养基3/4处），接种后接种针应沿原路退出。④经培养后即可观察结果。结果观察，沿穿刺线生长，线外的培养基清亮者表示细菌无活力；穿刺线模糊或沿穿刺线向外扩散生长，或整个培养基混浊者表示细菌有活力。