抗衰老现代实验研究方法

近年来，随着对衰老基础理论研究的深入，人类对衰老发生的原因及机制有了较为深刻的认识，尤其是对衰老免疫学和衰老生物学领域研究所取得的重大发展，使抗衰老的实验方法技术发生了重大飞跃，将细胞和分子水平的一些生物学技术应用到了抗衰老药物的筛选研究中，主要包括以下两个方面。

一、衰老免疫学

在衰老过程中，免疫器官功能的下降是一个重要的方面。伴随衰老，免疫功能的特点是对外源性抗原免疫应答降低，而对自身抗原免疫应答增强。因此近年来，很多学者已注意到免疫与衰老的关系，但仅从对器官水平及整体水平的研究不能从根本上解决问题，由此研究者试图从分子和基因水平上弄清衰老免疫学的机理，于是进行了衰老免疫实验方法及其基因调控的研究，并将其应用于对具有抗衰老调节作用药物的探讨，包括检测衰老与细胞因子的表达、衰老与细胞因子的关系、抗衰老药物与细胞因子产生的检测、抗衰老药物与免疫基因调控等内容。这些现代细胞和分子水平的实验技术在抗衰老实验研究中的广泛应用将推动衰老基础理论的发展。

二、衰老的分子生物学与分子遗传学

目前分子生物学与分子遗传学技术已成为研究延缓衰老药物的重要工具。物种的寿命主要取决于遗传物质。衰老过程可能与分化、发育过程相似，系由早已安排好的遗传程序控制。研究发现，衰老过程生物大分子，特别是基因及其转录活性亦会出现某些退行性变化。衰老时基因调控能力减退，染色质转录活性下降，活性基因减少，氧自由基可引起DNA损伤，生物衰老时修复DNA损伤的能力下降，致使损伤的DNA累积，进而引起基因及其表达异常。应用现代分子生物学和分子遗传学研究技术筛选抗衰老药物已进入到了一个崭新的阶段。目前主要研究方法有：①对细胞培养、细胞核与染色质的分离鉴定（如对鼠骨髓瘤细胞悬液制备细胞株传代培养、细胞核的制备、染色质的制备）；②核酸合成速度测定及核酸的提纯与电泳法（如DNA合成速率的测定、转录活性的测定、DNA的提取与电泳法、RNA的提取与电泳法）；③基因探针的制备与标记（如基因探针的制备、基因探针的标记）；④核酸分子杂交技术；⑤链聚酶反应术（PCR扩增法、抑癌基因p53测定、反向PCR法检测微量mRNA）；⑥DNA拓扑异构酶活性的测定等。