实训1 显微镜的使用及细菌形态结构的观察

实训1 显微镜的使用及细菌形态结构的观察

一、目的要求

能使用显微镜油镜观察细菌的基本形态和结构。

二、仪器及材料

显微镜、香柏油、乙醇乙醚(乙醇与乙醚的比例为3∶7)、 擦镜纸、细菌染色标本。

三、方法与步骤

1.油镜的识别

油镜是显微镜物镜的一种,因使用时必须浸于香柏油内,故称油镜。油镜与其他物镜有以下区别。

(1)油镜一般是所有物镜中最长的。

(2)油镜头上标有其放大倍数“100 ×” 或“90 ×”。

(3)不同镜头有不同颜色线圈,使用时应先熟悉油镜头上的线圈颜色,并认准“oil”缩写,以防用错物镜。

2.基本原理

因光线在香柏油中的折射率(n=1.515)与在玻璃中的折射率(n =1.52)相近,故可减少因折射而射入镜头外的光线,提高视野的亮度。

3.使用方法

(1)放置。显微镜使用时应放置在洁净平稳的实验桌或实验台上。

(2)对光。打开电源,将聚光器升至最高,将光圈放大至最大,手动调节灯光旋钮至最大(老式显微镜调节凹面反光镜),使射入镜头中的光线最强。

(3)装片。将标本片安放于载物台上,用弹簧夹固定,将待检部位移至聚光器上,先用低倍镜寻找适当的视野,在细菌染色标本片的欲检部位滴1 滴香柏油后,再换用油镜头观察。

(4)调焦。先用粗调节螺旋将载物台上升,使油镜头与标本片在滴油处几乎接触,然后,边用眼睛观察目镜,边用细调节螺旋向相反方向缓慢旋转,使载物台缓慢下降(切勿上升,防止压坏玻片及镜头),直至出现完全清晰的物像为止。

(5)保养。油镜用毕,先用粗调节螺旋将载物台下移或使油镜头上升,将细菌标本片取下,用擦镜纸吸去香柏油,如油已干或模糊不清者,可在擦镜纸上滴1~2 滴乙醇乙醚后将玻片上的香柏油吸净,并立即用干擦镜纸拭去乙醇乙醚;用同样的方法将油镜头擦拭干净。然后将低倍镜转至中央或将物镜转成“八”字形,调节粗调节螺旋,使物镜头与载物台接触,下降聚光器。将显微镜用绸布盖好后装入镜箱,置于阴凉干燥处。

4.细菌基本形态的观察

球菌、杆菌、螺旋菌标本片的观察。

5.细菌特殊构造的观察

细菌荚膜、细菌鞭毛、细菌芽孢标本片的观察。观察时应注意荚膜的位置,芽孢形成后菌体的形态改变,芽孢的位置和形态,鞭毛的数量和位置等。