三、愈伤组织分化成苗
由茎段诱导的愈伤组织,待其直径长到约0.5cm时,把愈伤组织转移到分化培养基上。分化培养基以MS培养基为基本培养基,附加1~2mg/kg的激动素(KT)、酪蛋白水解物100~400mg/kg。蔗糖含量及培养基pH与诱导培养基相同。培养室每天光照10~12h,光照强度为1500~2000lx。待愈伤组织在培养基上长大,逐渐变绿,表面呈菜花状,有很多绿色的小突起,进一步分化成芽后,切除小苗,原来的愈伤组织可以继续扩大,不断分化出新的小苗。此后,大约每25天进行1次继代培养。每次的茎段增殖量为3~4倍。反复进行继代培养(图4-26),直至达到所需的数量。1块愈伤组织可分化出几十株,甚至几百株苗。

图4-26 继代培养