二、实验原理

脂质体（liposomes）指药物包封于类脂双分子层薄膜中间所制成的超微球形载体。一般由磷脂和胆固醇制成。常见的磷脂分子结构中有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团，将适量的磷脂加至水或缓冲溶液中，磷脂分子定向排列，其亲水基团面向两侧的水相，疏水的烃链彼此相互缔合为双分子层，构成封闭囊泡结构。

用于制备脂质体的材料主要包括天然磷脂（如大豆磷脂、蛋黄卵磷脂）、合成磷脂（如二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱）以及胆固醇。胆固醇与磷脂混合使用可制得稳定的脂质体，胆固醇的作用是调节双分子层的流动性，降低脂质体膜的通透性；其他的附加剂有十八胺、磷脂酸等，这些附加剂能改变脂质体表面的电荷性质，从而改变脂质体的包封率、体内外稳定性、体内分布等其他相关特性。

脂质体可分为三类：小单室（层）脂质体，粒径为20～50 nm，经超声波处理的脂质体，绝大部分为小单室脂质体；大单室脂质体，粒径约为200～1000 nm，用乙醚注入法制备的脂质体多为这一类；多室（层）脂质体，粒径为400～3500 nm，显微镜下可观察到犹如洋葱断面或人手指纹的多层结构。

脂质体的制备方法有多种，根据药物的性质及制备条件进行选择。

（1）薄膜分散法：经典的脂质体制备方法，通常形成多室脂质体，经超声处理后得到小单室脂质体。此法优点是操作简便，脂质体结构典型，但包封率较低。

（2）注入法：有乙醚注入法和乙醇注入法。注入法是将磷脂等膜材料溶于乙醚或乙醇中，在搅拌下慢慢滴入55～65℃含药或不含药的水性介质中，蒸去乙醚或乙醇，继续搅拌1～2 h，即可形成脂质体，通常形成大单室脂质体。

（3）逆相蒸发法：系将磷脂等脂溶性成分溶于有机溶剂，如氯仿、二氯甲烷中，再按一定比例与含药的缓冲液混合、乳化，然后减压蒸去有机溶剂，即可形成脂质体。该法适合于水溶性药物、大分子活性物质，如胰岛素等的脂质体制备。

（4）冷冻干燥法：先按上述方法制成脂质体混悬液，分装于小瓶中，冷冻干燥制成冻干制剂，全部操作应在无菌条件下进行。本法适于在水中不稳定药物脂质体的制备。

（5）熔融法：将磷脂、表面活性剂等辅料加少量溶剂溶解，胆固醇加热熔融，将两者混合，滴入约65℃的水相中，搅拌混合，即得。采用此法制备易获得多室脂质体，其物理稳定性好，可加热灭菌。

评价脂质体质量的指标有粒径、粒度分布、ξ电位、包封率、载药量、泄漏率、磷脂氧化程度等。其中，包封率和载药量的计算公式如下：

包封率（Qw，%）=（包封于脂质体内的药量/药物投料量）×100%

载药量（LE，%）=（包封于脂质体内的药量/载药脂质体的总重量）×100%