任务二 正确使用分光光度计
分光光度计（spectrophotometer）是一种进行定量比色分析用的仪器，在染整实验中，常用来测定染液和整理液浓度，然后通过计算，获得染料的上染百分率、固色率、游离甲醛含量等重要数值。分光光度计有721型、722型、723型、751型等，目前染整实验中使用较广泛的是722型。
图1-2 722型光栅分光光度计外形示意图
1—数字显示器 2—吸光度调零旋钮 3—选择开关 4—吸光度调斜率电位器 5—浓度旋钮 6—光源室 7—电源开关 8—波长手轮 9—波长刻度窗 10—试样架拉手 11—100%T旋钮 12—0T旋钮 13—灵敏度调节旋钮 14—干燥器
一、仪器结构
722型光栅分光光度计是目前使用较普遍的可见光分光光度计。它的工作波长范围为330～800nm。其外形结构见图1-2，它是由光源室、单色器、试样室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等部件组成。722型光栅分光光度计外形示意图见图1-2，结构方框图见图1-3。
二、工作原理
分光光度计的工作原理是基于物质在光照射时，产生对光的吸收效应。当某单色光通过溶液时，光能被吸收而减弱，其减弱程度与溶液的浓度、光径有一定的比例关系。即符合朗伯—比尔定律：
式中：K为吸光系数（常数）；L为溶液的光径长度（即液层厚度）；c为溶液的浓度；I0为入射光强度；I为通过溶液后光的强度；
表示光线通过溶液时被吸收的程度，为方便起见用吸光度（A）表示，也可用光密度（D）表示。
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图1-3 722型光栅分光光度计仪器结构方框图
由朗伯—比尔定律可知，当L一定时，吸光度与溶液的浓度成正比。因此，可以通过对染料溶液吸光度的测定，求得染料溶液的浓度。由于吸光系数（K）与入射光波长、物质的性质和溶液的温度等因素有关，因此测定时，必须使入射光的波长及溶液温度保持一定。
物质对光的吸收具有选择性，各种不同的物质具有其自身的吸收光谱。用比色法进行浓度测定时，应选用最大吸收波长。
三、操作规程
（1）检查电源线、接线是否正常，各个调节旋钮的起始位置是否正确。
（2）将灵敏度旋钮调至“1”挡（放大倍率最小）。
（3）开启电源，指示灯亮，将选择开关置于“T”，波长调至测试用波长。仪器预热20min。
（4）打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”；盖上试样室盖，将吸收池处于蒸馏水（或空白液）校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0”。
（5）如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率挡数（即灵敏度），但尽可能使倍率置低挡使用，这样仪器将有更高的稳定性。改变倍率后必须重新校正“0”和“100%”。
（6）预热后，按上述步骤连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行正常测定。
（7）吸光度A的测量：将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
（8）浓度c的测量：选择开关由“A”旋至“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。
（9）测量完毕，关闭电源，并将比色皿清洗干净，擦干后存放回原处。
四、注意事项
（1）每台仪器所配套的吸收池应专用，不能与其他仪器上的比色皿混用。
（2）如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，因光能量变化急剧，使光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间。当稳定后，重新调整“0”和“100%”即可工作。