化学发光免疫分析法

三、化学发光免疫分析法

检测原理

化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)检测抗核抗体通常将天然或重组抗原共价偶联到功能性磁珠。用样本稀释液(通常为PBS)对患者血清样本进行预稀释。将一定量稀释后的患者血清、磁珠和分析缓冲液混合后,在孵育盘孵育。磁化的微球在内部清洗站中使用强磁铁沉淀,并自动清洗几次。随后,添加发光剂(如吖啶酯类、鲁米诺及其衍生物等)偶联抗人IgG抗体,孵育后再次将磁珠沉淀并反复洗涤。当向反应杯中添加过氧化氢溶液(预激发液)和氢氧化钠溶液(激发液)时,光子检测系统可检测到发光剂被触发后所产生的光强度,测试结果通过校准曲线确定,通常以相对发光强度(relative light units,RLU)表示。具体检测流程见图1—2—7。