着丝点型（AC—3）

一、着丝点型（AC—3）

【荧光核型特征】

1.分裂间期细胞·表现为离散分布于细胞核的大小不一点状荧光染色（每个细胞约40～80点）（图3—4—1）。

2.有丝分裂期细胞·染色体区域出现一条（分裂中期细胞）或两条（分裂后期/末期细胞）平行排列的带状浓缩点状荧光（图3—4—1）。

【核型鉴别】

与核多点型（AC—6）鉴别·AC—3与AC—6在间期细胞核内均可见大小不一点状荧光染色，但AC—3有丝分裂细胞染色体区域可见一条或两条平行排列的带状浓缩点状荧光，而AC—6分裂期细胞染色体阴性。

【相关靶抗原】

着丝点型主要靶抗原为着丝粒蛋白（centromere proteins，CENP）和异染色体蛋白1α（heterochromatin protein 1α，HP1α）。细胞内着丝粒骨架结构（centromere framework structure）包括特定着丝粒染色体（含CENP—A、CENP—B和HP1α）和大分子复合物着丝点，又称动粒（kinetochore）。动粒按空间位置不同，分为内动粒（含CENP—C、CENP—HIKM、CENP—TWSX、CENP—OPQUR和CENP—LN蛋白）、外动粒KMN—网络（含KNL1复合物、MIS12复合物和NDC80复合物）和外动粒其他蛋白（包括小动粒相关蛋白Astrin—SKAP复合物、CENP—E、CENP—F、Rod—Zw10—Zwilch复合物和Ska1复合物）［1］。在细胞分裂过程中，着丝粒通过内外动粒结构与微管结合。

CENP—A/B/C和HP1α

1.生物学功能·CENP—A、CENP—B和HP1α位于着丝粒染色体。CENP—A分子量为17 kDa，与组蛋白H3高度同源，可替代组蛋白H3形成着丝粒特异性核小体［2］。CENP—B分子量为80 kDa，可通过一个被称为CENP—B BOX的17 bp基序与着丝粒卫星DNA结合，并通过与内动粒上的CENP—C结合发挥作用［3］。HP1α参与组成异染色体（heterochromatin），可能与外动粒KMN—网络中的MIS12相互作用［1］。内动粒中的CENP—C分子量为140 kDa，是一种支架蛋白，对多种动粒蛋白招募到着丝粒必不可少［4］。

CENP—B被认为是抗着丝粒抗体（anti-centromere antibody，ACA）识别的最主要靶抗原，其主要原因为大于95％的ACA阳性（IFA）血清经ELISA验证与CENP—B反应，且抗CENP—A抗体和抗CENP—C抗体阳性血清常同时伴抗CENP—B抗体阳性。

2.临床意义·ACA常检出于SSc，也可见于其他自身免疫病，如SS、PBC或一些疾病的合并征。研究表明不同疾病中ACA的靶抗原无明显区别［1］。

（1）系统性硬化症：ACA（IFA）可见于20％～40％ SSc患者，是SSc诊断标准之一［5］。与其他CTD相比，ACA对SSc患者特异性（97％）和阳性预测值（89.5％）较高，但ACA也可见于其他自身免疫病，因此其并非SSc的特异性抗体［6］。ACA阳性的SSc患者主要为lcSSc，表现为进展缓慢且皮肤受累有限，包括钙质沉着症（calcinosis）、雷诺现象（Raynaud’s syndrome）、食管蠕动障碍（esophageal dysmotility）、指端硬化（sclerodactyly）、毛细血管扩张（telangiectasia），因此又被称为CREST综合征。当患者有雷诺现象且ACA阳性时，对其未来进展成为CREST具有高度的预测价值［7］。此外，有研究发现ACA中的抗CENP—A抗体和抗CENP—B抗体均与lcSSc高度相关，二者具有相近的诊断性能（灵敏性：约30％；特异性：＞95％）［8—10］。

ACA阳性SSc患者与抗Scl—70抗体或抗核仁抗体阳性者相比预后较好，死亡率低，10年生存率可达80％；ACA阳性者较少发生严重的ILD、肾脏危象、心脏或骨骼肌受累，且发展成为弥漫性皮肤病症的风险较低，但约10％～20％的患者在病程后期可发生肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension），是ACA阳性患者死亡的主要原因［11］。

（2）其他结缔组织病：ACA也可检出于SS、SLE、PBC，以及RA患者［12］。其中，ACA阳性SS患者与该疾病ACA阴性患者相比，主要表现为发病年龄大、易发生雷诺现象和毛细血管扩张，并且较少表现为SS的典型免疫学特征，如高丙种球蛋白血症、抗SSA/Ro60抗体、抗SSB/La抗体和RF阳性等［13］。原发性SS患者更常表现为抗CENP—C抗体单阳性［14］。

（3）与其他抗体相关性：在SSc患者中，ACA很少与抗Scl—70抗体同时存在；ACA可与抗Ro52抗体或抗SSA/Ro60抗体同时检出于约30％的lcSSc合并SS患者；ACA可检出于30％～50％的抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibody，AMA）阳性患者［15］。

3.检测方法·临床实验室常用的商品化试剂盒检测ACA包括LIA（抗核抗体谱，CENP—B；系统性硬化症谱，CENP—A和CENP—B）和 ELISA检测抗CENP—B抗体（表3—4—1）。另外，ACA（IFA）阳性血清几乎同时存在抗CENP—A抗体和抗CENP—B抗体反应性［10，16］。目前尚无临床可用的检测抗CENP—C抗体的商品化试剂盒。科研可采用ELISA ［17］、IP［14］和WB［7］等检测抗CENP—B抗体；ELISA ［18］和WB［19］检测抗CENP—A抗体；IP［14］和WB［19］检测抗CENP—C抗体。