胞浆致密颗粒型（AC—19）

二、胞浆致密颗粒型（AC—19）

【荧光核型特征】

1.分裂间期细胞·整个胞浆呈现细颗粒至均质状，非常致密但混沌不清的荧光染色，有时可见胞浆中特征性空泡（图3—10—2）。

2.有丝分裂期细胞·分裂期细胞染色体区阴性（图3—10—2）。

【核型鉴别】

1.胞浆散点型（AC—18）·见本节胞浆散点型核型鉴别1。

2.胞浆细颗粒型（AC—20）·AC—20在分裂间期细胞胞浆呈明显细颗粒样荧光染色，而AC—19 胞浆颗粒呈致密均匀的细颗粒样荧光染色，有时可出现特征样空泡。

【相关靶抗原】

（一）核糖体P蛋白

1.生物学功能·核糖体P蛋白（ribosomal P protein，Rib—P）是位于真核生物核糖体60S大亚基上的三种核糖体磷酸蛋白P0（38 kDa）、P1（19 kDa）和P2（17 kDa）的统称，由于三者等电点在酸性范围内，且常被一些蛋白激酶磷酸化，又称为酸性核糖体P蛋白。三种核糖体P蛋白在C端具有一段相同的由22个AA组成的序列（C22），该序列在不同物种间高度保守，是大多数抗Rib—P抗体识别的特异性抗原表位。Rib—P通常以两个P1/P2的异源二聚体和一个P0蛋白组成五元复合体，并在核糖体上组成向外突出的茎区结构，在蛋白质翻译延伸过程中起重要作用。

2.临床意义·抗Rib—P抗体对SLE高度特异，是潜在的血清学标志物之一，可在发病前产生，而在其他结缔组织病中少见［11］。SLE患者中抗Rib—P抗体检出率约10％～40％，其中儿童和青少年患者检出率高于成人，亚洲人患者检出率高于其他人种。抗Rib—P抗体与SLE患者神经系统、肾脏，以及肝脏受累相关。

（1）神经系统：在有精神错乱或抑郁表现的神经精神性狼疮（neuropsychiatric symptoms associated with SLE，NPSLE）患者血清及脑脊液中可检测到高滴度抗Rib—P抗体［12］，且该抗体是弥漫性NPSLE预后不良的重要危险因素。

（2）肾脏：LN患者可见抗Rib—P抗体滴度升高，也常与抗dsDNA抗体同时出现，区别在于抗Rib—P抗体单阳性（其他ENA谱阴性）多见于单纯膜性Ⅴ型LN，而伴抗dsDNA抗体同时阳性则提示Ⅴ型LN伴随增生性病变［13］。

（3）肝脏：SLE相关肝炎患者也可见抗Rib—P抗体水平升高，但同样表现为肝脏受累的AIH患者抗Rib—P抗体阳性少见［14］。

目前，抗Rib—P抗体与疾病活动度是否具有相关性还存在争议，部分研究表明抗Rib—P抗体在活动性SLE患者中检出率更高，也有研究认为抗Rib—P抗体与疾病活动度之间并没有明显相关性。

3.检测方法·临床实验室常用LIA和ELISA检测抗Rib—P抗体（表3—10—1）。目前商品化ELISA试剂盒检测抗Rib—P抗体所包被的抗原通常有三种：①天然纯化的Rib—P（P0、P1、P2）；②重组Rib—P；③由Rib—P蛋白C端22个氨基酸组成的合成肽（C22）。其中以天然和重组Rib—P作为抗原的ELISA检测抗Rib—P抗体特异性相当，且敏感性高于C22合成肽。以C22合成肽作为包被抗原的ELISA检测虽敏感性不足，但特异性较高。科研可采用ELISA、WB、ALBIA等方法检测抗Rib—P抗体。

（二）PL—7和PL—12

1.生物学功能·苏氨酰tRNA合成酶（threonyl tRNA synthetase）和丙氨酰tRNA合成酶（alanyl tRNA synthetase）是氨基酰tRNA合成酶（aminoacyl tRNA synthetases，ARS）的成员。ARS是一组存在于细胞质中的酶类，它们能够催化特定的氨基酸结合到其对应的同源tRNA上，这是多肽合成的必需步骤。目前已被证实存在8种不同的抗ARS抗体，包括：抗组氨酰tRNA合成酶抗体（histidyl tRNA synthetase，Jo—1，50 kDa）、抗苏氨酰tRNA合成酶抗体（threonyl tRNA synthetase，PL—7，80 kDa）、抗丙氨酰tRNA合成酶抗体（alanyl tRNA synthetase，PL—12，110 kDa）、抗甘氨酰tRNA合成酶抗体（glycyl tRNA synthetase，EJ，75 kDa）、抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体（isoleucyl tRNA synthetase，OJ，150 kDa）、抗天冬氨酰tRNA合成酶抗体（asparaginyl-tRNA synthetase，KS，65 kDa）、抗苯丙氨酰tRNA合成酶抗体（phenylalanyl-tRNA synthetase，ZO，60/70 kDa），以及抗酪氨酰tRNA合成酶抗体（tyrosyl-tRNA synthetase，Ha，59 kDa）。

2.临床意义·抗PL—7抗体和抗PL—12抗体都属于抗ARS抗体，是常见的MSA，二者在PM/DM中检出率约1％～5％。抗ARS抗体阳性患者通常具有一组特殊的症候群，包括肌炎、ILD、“技工手”、发热、雷诺现象和非侵蚀性关节炎，它们可以多种组合或某种孤立形式出现，被称为抗合成酶综合征（anti-synthetase syndrome，ASS）。

不同的抗ARS抗体对应的ASS临床特征存在差异：雷诺现象在抗PL—7/PL—12抗体阳性患者中更为常见，而关节炎在抗OJ抗体阳性患者中较少见［15］。与抗Jo—1抗体阳性患者相比，抗PL—7/PL—12抗体阳性患者肌肉受累较轻且肌肉疾病复发率较低，但却与早期、严重的ILD和胃肠道症状相关［16］。此外，抗PL—7/PL—12抗体阳性的患者生存率明显低于抗Jo—1抗体阳性患者，这可能与前者更易发生ILD相关［17］。

3.检测方法·临床实验室通常采用LIA进行抗 PL—7抗体或抗PL—12抗体检测（表3—10—2），其包含于肌炎谱中。科研可采用IP、ELISA检测，其中IP是检测大多数MSA的“金标准”，但由于技术限制几乎不用于临床。

（三）信号识别粒子

1.生物学功能·信号识别粒子（signal recognition particle，SRP）是一种普遍存在的胞质核糖核酸蛋白，由一个7S RNA分子和6个分子量分别为9 kDa、14 kDa、19 kDa、54 kDa、68 kDa和72 kDa的多肽组成。SRP复合体能够结合新翻译蛋白质的氨基末端信号序列，并将其定位至内质网上，帮助蛋白质通过细胞器膜上的蛋白质传导通道进行移位。Reeves等于1896年首次在一位“典型多发性肌炎”患者中报道了能够识别SRP 54 kDa亚基的自身抗体，自此以后，识别其他五种多肽和7S RNA分子的自身抗体在后续研究中逐步被发现。

2.临床意义·抗SRP抗体与一种独特的PM亚型—免疫介导的坏死性肌病（immune-mediated necrotizing myopathy，IMNM）密切相关，已被纳入其诊断标准［18］，其组织学特征表现为大量肌肉纤维变性、再生和坏死，少见或无炎症细胞浸润。该抗体阳性患者通常病程进展快速，大多伴严重肌无力，但少见皮肤受累、雷诺现象、关节炎或与其他CTD重叠征。此外，这类患者治疗相对困难，通常需要联合多种免疫抑制药物控制病情。

3.检测方法·若患者疑似AIM，尤其是IMNM，临床实验室常采用LIA（肌炎谱）进行抗SRP抗体检测（表3—10—3）。科研实验室可采用IP、ELISA、WB，以及ALBIA检测抗SRP抗体。其中以RNA IP检测血清中7S RNA的存在是检测抗SRP抗体的金标准，而常规ELISA、WB和ALBIA方法多以SRP的54 kDa亚基为靶抗原，可能存在漏检风险。