PCNA样型（AC—13）

一、PCNA样型（AC—13）

【荧光核型特征】

1.分裂间期细胞·呈现形态多样的颗粒状荧光，且颗粒大小和亮度不一；PCNA表达水平变化规律：DNA合成前期（G1期）PCNA表达量逐渐增加，部分间期细胞荧光染色阴性；DNA合成期（S期）其表达量达到高峰，荧光染色呈颗粒样强阳性染色；DNA合成后期（S期后期和G2期）PCNA表达水平显著降低，一些细胞呈现较少和散在的颗粒染色，偶尔有核仁染色［1］（图3—8—1）。

2.有丝分裂期细胞·细胞分裂期（M期）荧光染色阴性（图3—8—1）。

【核型鉴别】

其他细胞周期相关性核型（AC—XX）·AC—13间期细胞染色形态特点包括有阴性、细颗粒样、粗颗粒样、核仁阳性等不同形态特征，而其他细胞周期相关性核型可见间期细胞有明显的明暗不同染色，但无AC—13样荧光染色表现。

【相关靶抗原】

增殖细胞核抗原

1.生物学功能·增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclearantigen，PCNA），又被称为细胞周期蛋白（cyclin）［2］，最早在1978年由Miyachi等采用双扩散免疫沉淀技术发现于SLE患者血清中，因其存在于增殖活跃的细胞中而得名［3］。传统的PCNA蛋白，分子量34 kDa，被证实是DNA聚合酶δ的辅蛋白或加工因子（processivity factor of DNA polymerase delta），它在真核细胞中高度保守，以三个单体相互连接，形成一个同源三聚体环状结构，可作为环绕双链DNA的滑动钳（sliding clamp），在DNA复制、染色质重塑、DNA损伤修复，以及细胞周期进展中发挥作用［4］。

PCNA蛋白是决定细胞生死的核心分子之一，其表达的调控机制为：PCNA基因由p53诱导，而PCNA蛋白在决定细胞命运的过程中与p53调控蛋白Gadd45、MyD118、CR6，以及最重要的p21相互作用。一方面，若PCNA蛋白在p53缺失的情况下大量存在于细胞中，DNA复制就会发生。另一方面，若p53存在时细胞中PCNA蛋白水平很高，DNA修复就会发生。若PCNA丧失功能或在细胞中缺失或少量存在，则细胞发生凋亡。

2.临床意义

（1）系统性自身免疫病：早期研究认为即使抗PCNA抗体在SLE患者中检出率较低（＜5％），其对SLE患者具有高度特异性；但后续研究发现，抗PCNA抗体也可见于SSc、SS、RA等其他SARD患者，因此该抗体对SLE特异的观点被推翻［5—6］。

（2）非自身免疫性疾病：抗PCNA抗体可见于慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）感染患者［7］。

（3）恶性肿瘤：抗PCNA抗体曾在恶性肿瘤（如小细胞肺癌）患者中检出［6］；此外PCNA抗原也可在恶性淋巴瘤患者外周血单核细胞和血清中检测到［8］。

3.检测方法·实验室常用LIA和CLIA检测抗PCNA抗体（表3—8—1）。科研可采用WB、ELISA、ALIBIA、纳米点阵列光度免疫分析（nanodot array luminometric immunoassay，NALIA），以及CLIA检测抗PCNA抗体［5，9］。