点状核膜型（AC—12）

二、点状核膜型（AC—12）

【荧光核型特征】

1.分裂间期细胞·细胞核膜呈现颗粒样或点状荧光，相邻细胞核接触部分荧光染色增强（图3—7—2）。

2.有丝分裂期细胞·分裂中期和后期细胞染色体阴性（图3—7—2）。

【核型鉴别】

1.均质型（AC—1）·见本章第二节均质型核型鉴别2。

2.细颗粒型（AC—4）·见本章第三节细颗粒型核型鉴别3。

3.光滑核膜型（AC—11）·见本节光滑核膜型核型鉴别2。

【相关靶抗原】

（一）核孔复合体

1.生物学功能·NPC是一种镶嵌在双层核膜上的大型超分子结构，由超过100种蛋白组成，为各种分子的跨核膜运输提供通道。gp210、nup62和Tpr蛋白是NPC中重要的自身抗原。

（1）gp210：分子量200 kDa，是核孔膜的一种跨膜糖蛋白（glycoprotein），属于Ⅰ型整合蛋白，可将核孔复合体结构锚定在核孔膜上。其分子结构包括：位于核周空间的糖化氨基末端结构域、单独跨膜段和由58个氨基酸组成的面向核孔复合体的羧基末端结构域［10］。研究表明，gp210以大量二聚体的形式存在于核孔中，可能形成管腔亚膜蛋白骨架，并参与新的核孔复合体形成，以及核周池与核孔间信号传输过程。抗gp210抗体主要识别的抗原表位是gp210蛋白C端结构域的15个氨基酸线性延伸。

（2）nup62：分子量60 kDa，是第一个被证实的核孔蛋白，可与核孔蛋白p54、p58/p45形成亚复合物。nup62含有苯丙氨酸—甘氨酸重复序列，可参与构成核转运受体的结合位点，参与mRNA的输出［10］。

（3）Tpr：分子量约270 kDa，是一种螺旋卷曲蛋白，定位于NPC的核内纤丝（intranuclear filament），是NPC核篮（nuclearbasket）的组成成分［11］。研究表明，Tpr可能通过其卷曲螺旋结构域绑定在NPC的核内纤丝上，其酸性羧基末端自由地与可溶性转运因子（soluble transport factors）相互作用，介导mRNA从细胞核中输出［12］。

2.临床意义·对临床HEp—2 IFA荧光核型为点状核膜型（AC—12）的患者，如果同时出现碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）升高及AMA阳性，则高度提示PBC的诊断；若不具备前述指标，应建议其进一步采用其他方法进行靶抗原检测，以提高诊断特异性［13］。

（1）抗gp210抗体：是PBC的特异性诊断指标，可在9.4％～41.2％的PBC患者中检出，而在健康群体和其他疾病对照人群中检出率仅0～0.4％［1］。抗gp210抗体与PBC患者更严重的胆汁淤积表现、重度肝损伤及不良预后相关［14］。此外，抗gp210抗体是AMA阴性PBC患者重要血清学标志物之一，可在15％～50％抗线粒体抗体阴性的PBC患者中检测到［15］。

（2）抗nup62抗体：对PBC患者特异性高但灵敏度较低，可检出于13％～19％的PBC患者，此外也可见于部分SS和SLE患者［8，16］。

（3）抗Tpr抗体：该抗体不具有疾病特异性，在各种疾病中的检出率尚不明确，可见于AIH、PBC、SLE，以及其他自身免疫性疾病患者［11］。

3.检测方法

（1）抗gp210抗体：临床实验室常用LIA、ELISA和CLIA检测抗gp210抗体（表3—7—1），科研可采用WB和ELISA进行检测［17］，多采用各种细胞制剂或者gp210蛋白C端表位区域的重组或合成多肽作为靶抗原，对PBC检测特异性≥96％。

（2）抗nup62和抗Tpr抗体：临床实验室目前尚无检测抗nup62抗体和抗Tpr抗体的商品化试剂盒，仅可借助HEp—2 IFA筛查抗体相关的AC—12荧光核型。科研可采用WB、IP检测这两种抗体［11］。

（二）核纤层蛋白B受体

1.生物学功能·LBR分子量约60 kDa，是一种内核膜上的整合蛋白，包含一个由208个氨基酸组成的氨基末端核质结构域和一个带有8个跨膜段的羧基端疏水结构域［18］。LBR能够与核纤层蛋白B结合并且促使核纤层附着到内核膜上。抗LBR抗体主要识别LBR与核纤层蛋白B结合部分的一个60个氨基酸组成的表位［19］。

2.临床意义·抗LBR抗体被证实是PBC特异性抗体，仅少数PBC患者中有报道检出。该抗体目前尚未在其他疾病中检出，因此认为对PBC高度特异，但敏感性低（1％～3％）［9］。

3.检测方法·临床实验室目前尚无检测抗LBR抗体的商品化试剂盒，仅可借助HEp—2 IFA筛查抗体相关的AC—12荧光核型。科研可采用WB［8］和ELISA［20］检测抗LBR抗体。