胞浆线性/肌动蛋白型（AC—15）

一、胞浆线性/肌动蛋白型（AC—15）

【荧光核型特征】

1.分裂间期细胞·细胞骨架纤维着色，胞浆呈现“柴块样”堆积的束状纤维结构的荧光染色，典型染色呈现硬直的纤维束横贯整个细胞（图3—9—1）。

2.有丝分裂期细胞·分裂期细胞染色体区阴性（图3—9—1）。

【核型鉴别】

1.胞浆丝状/微管型（AC—16）·AC—16的胞浆纤维是由核边缘扩散出来的微管与中间丝染色，而AC—15的胞浆纤维呈现贯穿细胞长轴的硬直纤维样染色。

2.胞浆节段型（AC—17）·AC—17的胞浆纤维沿胞浆边缘呈较短的节段样荧光染色，而AC—15的胞浆纤维呈现贯穿细胞长轴的硬直纤维样染色。

【相关靶抗原】

（一）肌动蛋白

1.生物学功能·细胞骨架包含微管、微丝和中间纤维。肌动蛋白（actin）是微丝组成成分之一，通常以单体G—肌动蛋白（G-actin，球状）和聚合物F—肌动蛋白（F-actin，丝状）两种形式存在。在一定条件下，G—肌动蛋白可聚合形成肌动蛋白丝，即F—肌动蛋白。F—肌动蛋白（41 kDa）具有三磷酸腺苷酶（adenosine triphosphatase）活性，是平滑肌抗体（smooth muscle antibody，SMA）的特异性靶抗原之一。1976年Bottazzo博士描述了抗F—肌动蛋白SMA特异性荧光形态。以鼠肾为基质，SMA三种荧光模式包括：血管型（SMA—V），即仅血管壁染色阳性；肾小球型（SMA—G），血管壁和肾小球系膜细胞染色阳性；管状型（SMA—T），即除血管壁呈阳性染色外，整个肾小球和肾小管基底膜染色阳性。抗F—肌动蛋白抗体通常与高滴度SMA—G，以及SMA—T荧光模式相关。

2.临床意义·抗F—肌动蛋白抗体是Ⅰ型自身免疫性肝炎（type 1 Autoimmune Hepatitis，AIH—1）患者特异性抗体之一，与AIH—1疾病活动性相关［1］，更常检出于预后不良的年轻AIH—1女性患者中［2］。AIH—1患者IFA抗SMA滴度通常＞1∶80，而儿童AIH—1患者滴度可＜1∶20［3］。抗肌动蛋白抗体（通常为低滴度）也可见于正常人群、PBC、丙型肝炎和乳糜泻患者，而SARD患者相对少见［4］。

3.检测方法·临床实验室检测抗肌动蛋白抗体的传统方法主要是以大鼠肝、肾、胃组织为基质的IFA，阳性血清在胃组织中可见肌层、黏膜肌层和腺体间收缩纤维阳性染色；肝组织中沿肝细胞膜内侧染色阳性，围绕肝细胞的胆小管呈“Y”型荧光；肾组织中可见SMA—G，以及SMA—T荧光模式。研究表明，即使在低滴度（1∶40）情况下，SMA—G/T荧光模式，以及HEp—2细胞特异性微丝染色（肌动蛋白反应性）对于AIH的诊断也具有较高的特异性（93.1％～94.4％）和良好的敏感性（52.5％～60.7％）［5］。随着HEp—2 IFA的广泛应用，AC—15荧光模型也可用以辅助检测抗肌动蛋白抗体。临床实验室目前检测特异性抗F—肌动蛋白抗体的方法主要为ELISA（表3—9—1）。有研究表明，相较于传统大鼠肝、肾、胃组织的IFA检测，抗F—肌动蛋白抗体ELISA检测对于AIH的诊断价值更高，具有更好的敏感性、特异性和准确性［5］。

（二）非肌肉肌球蛋白

1.生物学功能·非肌肉细胞中存在的肌球蛋白被称为非肌肉肌球蛋白（non-muscle myosin），其中研究最多的是非肌肉肌球蛋白Ⅱ （non-muscle myosin Ⅱ，NMⅡ）。NMⅡ是由三对多肽组成的六聚体复合物，包含两条重链，一对调节轻链和一对必须轻链，根据重链的不同可将其分为NMⅡA、NMⅡB、NMⅡC三个亚型，分别由MYH9、MYH10、MYH14基因编码。NMⅡ是最普遍存在的肌动蛋白结合蛋白（actin-binding proteins）之一，它是一种分子马达，通过催化三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）水解为细胞提供动力，广泛参与如细胞黏附、迁移、分裂和胞饮作用等生物过程。

2.临床意义·针对非肌肉肌球蛋白的自身抗体曾在HCV相关的慢性肝病患者中检出［6］。部分慢性淋巴细胞白血病患者存在抗NMⅡ的单克隆抗体［7］，NMⅡA被证实是慢性淋巴细胞白血病细胞特异性B细胞受体识别的自身抗原［8］。

3.检测方法·临床实验室尚无检测抗NMⅡ抗体的商品化试剂盒，科研可采用WB［6］、免疫荧光共定位法（immunofluorescence colocalization）［7］检测抗NMⅡ抗体。