酶联免疫吸附试验

（一）检测原理

酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测自身抗体通常将已知的自身抗原包被在固相载体表面，在不同孔中加入已知浓度的标准品和稀释后的血清样本温育（目前商品化试剂盒通常为室温孵育）。若样本阳性，特异性IgG（包括IgA和IgM）与抗原结合，洗涤去除未结合抗体后，再加入酶标记抗人IgG或IgM或IgA（酶标二抗）进行第二次温育，洗涤去除未结合的酶标二抗后，加入底物显色。终止液进行终止后，使用酶标仪读板，得到标准品和样本吸光度值，计算并分析样本中抗体含量。

（二）ELISA筛查抗核抗体的临床应用

ELISA除用于检测某种特定自身抗体外，也可将高度纯化的单个抗原和（或）来源于细胞核的提取物混合包被于固相载体，以进行ANA筛查。该方法由于可自动化操作，也是目前临床实验室常用的检测方法之一。不同商品化试剂盒包被的混合抗原不相同，目前临床实验室可获得的部分常见ELISA检测抗核抗体试剂盒见表1—2—2。

表1—2—2　商品化抗核抗体检测试剂盒（ELISA）抗原成分

注：*DNA/组蛋白复合物（核小体）。Y：包被该抗原成分；N：未包被该抗原成分；2—OADC：2—氧酸脱氢酶复合体