核多点型（AC—6）

一、核多点型（AC—6）

【荧光核型特征】

1.分裂间期细胞·离散分布于细胞核的大小不同的亮点状荧光染色，通常每个细胞6～20个点（图3—5—1）。

2.有丝分裂期细胞·染色体区域荧光染色阴性（图3—5—1）。

【核型鉴别】

1.与着丝点型（AC—3）鉴别·见本章第四节着丝点型核型鉴别1。

2.与核少点型（AC—7）鉴别·AC—6与AC—7分裂间期细胞均可见点状荧光染色，但核点数目不同，AC—6常＞6个点/细胞，AC—7一般＜6个点/细胞。两种核型分裂期细胞染色质均为阴性。

【相关靶抗原】

在急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia，APL）中，早幼粒细胞白血病基因（promyelocytic leukemia，PML）与维甲酸受体基因（retinoid acid receptor α，RARα）交互易位形成的PML/RARα融合基因是导致 APL 发生，以及靶向治疗的关键因素，PML因此得名。由PML编码的PML蛋白是PML核体（PML nuclear body）的重要成分。

PML核体作为细胞核内的功能单位，通过招募特定功能的蛋白，参与细胞的多种生物学过程，包括调控转录、细胞衰老凋亡、DNA 损伤应答、病毒感染，以及干细胞自我更新分化等。PML核体是一个多蛋白复合体，由PML蛋白形成的外壳和包绕在其核心区域的多个伙伴蛋白（partner proteins）组成。目前已知的PML伙伴蛋白超过170个，其中包括转录因子（如p53）、参与翻译后修饰的酶［如泛素偶联酶E2（UBC9）］等［1］。所有参与PML核体组成的蛋白统称为PML核体相关蛋白（PML nuclear body associated proteins），除PML蛋白以外，斑点蛋白100（speckled protein 100，Sp100）、NXP—2也是重要的PML核体相关蛋白，三者均为核多点型（AC—6）的靶抗原。

（一）Sp100

1.生物学功能·Sp100是一种分子量约53 kDa的酸性蛋白，在SDS—PAGE中表现为100 kDa的异常电泳迁移率，属于Sp家族成员。该家族还包括Sp110、Sp140和Sp140样蛋白（speckled protein 140—like），在人体中起到染色质“读码者”的作用。它们的特征是存在一个核定位信号和多个功能域，包括：①多种蛋白共享的DNA结合域，可与DNA直接结合或促进蛋白质间相互作用；②植物同源结构域，可读取组蛋白甲基化；③溴结构域，可读取组蛋白乙酰化；④胱天蛋白酶激活和招募结构域，可诱导Sp蛋白多聚化。

Sp100基因经可变剪接形成4种蛋白亚型：Sp100A、Sp100B、Sp100C和Sp100—HMG，其中Sp100—HMG在其C端含有高迁移率族蛋白—1结构域（high mobility group 1 domain，HMG—1），是HMG蛋白家族的同源蛋白。除Sp100A以外，所有亚型都包含一个DNA结合域，该区域可以参与染色质依赖的转录调控过程。Sp100通过小分子泛素相关修饰物蛋白（small ubiquitin-related modifier protein，SUMO）修饰被招募后，是永久驻留在PML核体内的转录抑制因子，与PML蛋白共同定位于核点结构。

2.临床意义

（1）原发性胆汁性胆管炎：抗Sp100抗体和抗PML抗体都与PBC相关，二者常共同检出于PBC患者［2］。研究表明，抗Sp100抗体对PBC敏感性较低（20％～40％），但特异性高（＞95％）［3］。此外，上述两种抗体在AMA阴性患者中检出率高于AMA阳性者［4］，对AMA阴性PBC患者的诊断具有重要价值［5—6］。

（2）其他疾病：抗Sp100抗体可见于AIH、原发性硬化性胆管炎（primary sclerosing cholangitis，PSC）、丙型肝炎等患者；另外，也可在少数肺部疾病，以及血液系统疾病中检出［7—8］；在SLE、SS、RA等风湿病患者中检出率较低（约2％）［9］。

3.检测方法·临床实验室常用LIA检测抗Sp100抗体，通常包含于自身免疫性肝病抗体谱中（表3—5—1）。此外，也有一些基于CLIA和ELISA的商品化试剂盒。科研可采用LIA、ALIBIA、ELISA等检测抗Sp100抗体［10］。

（二）早幼粒细胞白血病蛋白

1.生物学功能·PML蛋白是PML核体外壳的主要成分，存在PMLⅠ～PMLⅦ共7种不同的蛋白亚型。这些不同亚型的PML蛋白是由PML经可变剪接而形成，分子量介于45 kDa～96 kDa，N—末端区域均含有指环/B盒/卷曲螺旋/三重结构域（ring finger/B-box/coiled coil/tripartite motif，RBCC/TRIM）结构。该结构包括1个“指环”（ring-finger）结构域、2个锌指样B盒（B1、B2）和1个卷曲螺旋结构域（α-helical coiled-coil domain）。7种PML蛋白亚型中，PMLⅠ至PMLⅥ主要定位于细胞核中形成PML核体，而PML Ⅶ由于缺少核定位信号而存在于细胞质中。PML蛋白组装成PML核体依赖于SUMO修饰，PML蛋白存在4个SUMO共价结合区域（conjugation motif）和1个SUMO相互作用区域（SUMO-interacting motif，SIM）。随着PML蛋白的SUMO化（SUMOylation），SUMO共价结合区域和RBCC/TRIM基序可以促进PML结构的成核作用，随后其他PML核体相关蛋白又通过SUMO化被招募，并通过SIM结合，共同维持PML核体的稳定性。

2.临床意义·抗PML抗体与PBC相关，且常与抗Sp100抗体同时存在。PBC患者中抗PML抗体检出率（13.5％）低于抗Sp100抗体（20.6％）［6］。

3.检测方法·临床和科研实验室常用LIA法［6，10］检测抗PML抗体，通常包含于自身免疫性肝病抗体谱中（表3—5—2）。

（三）NXP—2

1.生物学功能·NXP—2，分子量140 kDa，又被称为MJ抗原或MORC3（microrchidia family CW-type zinc finger 3）。抗MJ抗体最早在1997年被发现于JDM患者中，后续证实NXP—2是抗MJ抗体识别的靶抗原。NXP—2是一种高度保守的核基质蛋白，属于MORC蛋白超家族成员，含有核基质结合域、RNA结合域，以及卷曲螺旋结构域，可能参与转录调控、RNA代谢，以及维持细胞核结构等多种细胞核功能；并且它还能够招募并激活p53，在p53诱导的细胞衰老过程中发挥重要作用。此外，NXP—2也是一种PML核体相关蛋白，其定位至PML核体的过程依赖于SUMO—SIM与PMLⅠ的相互作用。

2.临床意义

（1）幼年型皮肌炎：抗NXP—2抗体是JDM患者中最常见的肌炎特异性抗体之一［11］，可见于20％～25％的JDM患者，该抗体阳性与钙质沉着、严重的肌肉无力、多关节炎、关节挛缩，以及肠血管炎等临床表现相关［12—13］。

（2）成人皮肌炎：成人DM患者也可检出抗NXP—2抗体，检出率1.6％～20％，低于JDM患者。该抗体检出率在不同研究中差异较大，可能与民族背景、环境因素，以及检测技术等不同有关。此外，抗NXP—2抗体阳性成人DM患者患恶性肿瘤的风险增加［11］。

3.检测方法·临床实验室可采用LIA检测抗NXP—2抗体，通常包含在拓展的抗肌炎抗体谱中（表3—5—3）。科研可采用IP—WB和ELISA检测抗NXP—2抗体［11—12］。