Topo Ⅰ型（AC—29）

四、Topo Ⅰ型（AC—29）

【荧光核型特征】

依据国际抗核抗体荧光核型共识，AC—29有以下5个核型特征（图3—3—5）。

1.分裂间期细胞

（1）细胞核呈细颗粒荧光染色（AC—4样）。

（2）核仁呈外圈明显增亮或颗粒样染色。

（3）细胞胞浆可呈现较弱的网状结构染色。

2.有丝分裂期细胞

（1）染色体呈较均匀的细颗粒样荧光染色。

（2）染色体中的NOR区染色强阳性（染色体上增强的点状荧光）。

AC—29的五个核型特征中，间期细胞胞浆网状染色通常不易被观察到，这主要是由于AC—29胞浆染色较弱，在1∶80或1∶100稀释度下可能不易观察到。另外，当染色体染色强度较高时，NOR区点状染色有时也不易发现，镜检时缓慢上下调节显微镜的微调旋钮有助于观察NOR区染色。

【核型鉴别】

1.均质型（AC—1）·见本章第二节均质型核型鉴别4。

2.均质型（AC—1）+均质核仁型（AC—8）混合核型·AC—1+AC—8混合核型可见间期细胞均质样染色且核仁阳性，分裂中期细胞染色体均匀着色。但该混合核型分裂中期染色体不可见NOR区强阳性点状染色，且胞浆无弱的网状结构染色。

【相关靶抗原】

DNA拓扑异构酶I

1.生物学功能·topoⅠ通过瞬时断裂和连接DNA单链，在细胞复制、重组、转录和DNA修复等过程中改变DNA分子空间构象或拓扑结构。Topo Ⅰ由765个氨基酸组成，包括五个不同区域分别是，N端区（AA：1～215）、核心亚区Ⅰ— Ⅱ（AA：216～435）、核心亚区Ⅲ（AA：436～636）、连接区（AA：637～713）和C端区（AA：714～765），其中整个核心区及C端区是topoⅠ催化活性的主要区域。

抗topoⅠ抗体于1979年首次在SSc患者中经免疫印迹法发现其可识别70 kDa蛋白，后续研究证明该蛋白是topoⅠ蛋白（分子量105 kDa）的分解产物，因此抗topoⅠ抗体又称为抗Scl—70抗体。抗Scl—70抗体可识别DNA拓扑异构酶Ⅰ上多个位点，如450～600 AA是SLE和dcSSc患者血清中抗Scl—70抗体常见的共同识别位点。另外，dcSSc患者抗Scl—70抗体可特异识别该分子N端区，SLE患者抗Scl—70抗体识别位点主要在核心亚区Ⅰ/Ⅱ，而lcSSc患者中该抗体识别位点散在分布于整个topoⅠ。

2.临床意义

（1）系统性硬化症：抗Scl—70抗体是SSc特异性分子标志物，可检出于9.4％～71％ SSc患者，其中以dcSSc更常见。抗Scl—70抗体阳性SSc患者较少合并检出（＜1％）其他SSc相关自身抗体如抗着丝点抗体等，患者主要特征为弥漫性皮肤纤维化，但速度不及抗RNAPⅢ抗体阳性患者。抗Scl—70抗体阳性是SSc患者风险评估的重要参数，因其易并发ILD、肾脏疾病和心脏传导阻滞，前者是目前造成SSc患者死亡的主要原因，且该抗体阳性也是SSc患者并发肿瘤的危险因素，多见于肺癌。对于SSc患者中抗Scl—70抗体滴度与疾病活动性是否相关目前尚有争议，有些研究显示两者无关联，但也有报道显示该抗体水平可随有效治疗而降低甚至消失，其生存率明显高于抗Scl—70抗体滴度未下降组［26］。

（2）系统性红斑狼疮：抗Scl—70抗体很少见于正常人或SSc患者家庭成员及其他结缔组织病患者，但可见于0～25％ SLE患者（平均4.1％）［27］。因此，抗Scl—70抗体阳性不能排除SLE的诊断，但SLE患者中该抗体滴度明显低于SSc患者。

3.检测方法·国内实验室可采用商品化LIA、ELISA和CLIA试剂盒检测抗Scl—70抗体（表3—3—10）。研究显示ELISA和DIB检测抗Scl—70抗体特异性敏感性均较高（ELISA特异性为99.2％，敏感性为97.2％；DIB特异性为97.6％，敏感性为96.1％），但科研实验室常用的WB则特异性低（假阳性率为27％）［28］。