一、基本原理

一、基本原理

以压缩气体(氦或氮)转换成的气体冲击波为动力,使基因枪产生一种“冷”的气体冲击波进入轰击室,将包裹着DNA 的金属颗粒射入受体组织,穿透受体组织的2~3 层细胞,然后通过组织培养技术再生出植株,经检测整合有目的DNA 的再生植株即为转基因植株。基因枪转化法适用于动植物、细胞培养物、胚胎、细菌及小型动物的转基因。

1.基因枪转化技术的优点

(1)受体材料来源广泛,不受物种和植物基因型的限制,能转化植物的任何组织或细胞,特别是农杆菌侵染不敏感的单子叶植物,提高了禾谷类植物的转化效率。

(2)基因枪法克服了采用其他转化方法时外源DNA 进入细胞质后很难穿过双层膜进入细胞器的难题,用基因枪技术转化这类细胞器,转化频率高,重复性好,是目前该领域研究中最常用和最有效的DNA导入技术。

(3)基因枪法可控程度高,方法简便易行,外源基因可以构建于表达载体中,也可以是最小表达框。(https://www.daowen.com)

2.基因枪技术的缺点

(1)转化效率不高。

(2)外源基因往往是多拷贝随机插入,在转基因植物中存在多种方式的重排。

(3)由于多拷贝插入转基因,植株易发生转录或转录后水平的基因沉默。

(4)实验成本高。