二、转化方法
基因枪转化法是将外源DNA直接导入受体细胞的物理方法，包含四部分内容：
1.受体材料的预处理
在基因枪轰击前先将受体材料在含有0.5 mol/L山梨醇和0.5 mol/L甘露醇的高渗培养基处理4～6 h。
2.微弹DNA的制备
钨粉的制备：称取60 mg的钨粉放在1.5 mL的离心管中，加入1 mL 70%乙醇，在涡旋振荡器上振荡15 min，然后10000 r/min 离心3 min，仔细去掉上清液，再加入70%乙醇重复上述步骤一次。然后加入1 mL 的无菌重蒸水重悬，10000 r/min 离心去上清液，这一步骤重复三次，最后加入1 mL无菌水，储存于-20 ℃冰箱备用。
微弹DNA的制备：取50 μL充分振荡起的钨粉悬液，置于一无菌离心管中，加入5 μL DNA（DNA 浓度为1.0 μg/μL）溶液，在涡旋振荡器下缓慢加入50 μL 2.5 mol/L 经高压灭菌的氯化钙溶液以及20 μL 0.1 mol/L 亚精胺（抽滤灭菌），充分振荡约3 min，静置10 min（以保证DNA 大分子充分沉降在钨粉表面），10000 r/min 离心5 min，弃上清液（尽可能去除干净），再加入250 μL 无水乙醇，振荡静置几分钟，10000 r/min 离心5 min，去上清液，最后加60 μL无水乙醇，重悬后备用。
3.基因枪的轰击转化
（1）轰击前准备
①将基因枪（PDS-1000/He）放置于超净工作台上，以利于无菌操作；
②用70%的乙醇消毒真空室；
③可裂圆片和微弹载体用70%乙醇浸泡30 min后，晾干备用，阻挡网经高压灭菌；(https://www.daowen.com)
④取包有DNA的钨粉悬液10 μL均匀点在无菌微弹载体的中央区域，于超净工作台上吹干备用；
⑤将可裂圆片（规格为1100 psi）装入固定盖并旋紧；
⑥将载有微弹的微弹载体及阻挡网装入微弹发射装置中。
（2）基因枪轰击
①打开稳压电源、真空泵及氦气瓶阀的开关，调整系统压力为1300 psi；
②将受体材料小心放入样品室，射程可选60 mm或70 mm；
③轰击；
④排气，取出样品，用封口膜封上。
4.转化植株再生及分子检测
将轰击后的材料于高渗培养基上过夜后，转移到愈伤诱导培养基上培养，进行植株再生培养。获得的再生植株根据导入的外源DNA表达盒特点进行分子检测。