花粉管通道转化技术及其分子验证

花粉管通道法，亦称授粉后外源基因导入植物遗传转化技术，是利用植物授粉后所形成的天然花粉管通道（花粉引导组织），经珠心通道将外源DNA 携带进入胚囊，转化受精卵或其前后的生殖细胞（精子、卵子），由于它们仍处于未形成细胞壁的类似“原生质体”状态，并且正在进行活跃的DNA 复制、分离和重组，所以很容易将外源DNA 片段整合进受体基因组中，以达到遗传转化的目的。该法的提出是基于Hess（1980）的试验，他报道了花粉粒可以吸收外源DNA的结果（李长缨等，2000）。

我国学者在远缘杂交的基础上，通过授粉时混入异源花粉匀浆的方法，在后代中发现了对应性状的变异，从而推测可能有异源DNA 参与了受精过程。Zhou 等（1983）成功地将外源海岛棉DNA 导入陆地棉，培育出抗枯萎病的栽培品种，创立了花粉管通道法转化技术。目前，已有的研究结果表明，花粉管通道法介导的遗传转化及其后代能产生变异，已相继在40 多种作物上取得了显著成效（孔青等，2005；Song et al，2007）；在国外SCI/EI 期刊也相继出现报道（Luo et al，1989；Li et al，2002；Shou et al，2002 ；Chen et al，2008），并已获得大量优良小麦等作物新品种（周春江等，2007；王永芳等，2009），为拓宽作物抗性基因资源和品质改良提供了新的途径。