外源基因转录的Northern 杂交检测

与植物的内源基因一样，外源基因整合到植物染色体后的表达受到生理状态调控，还与其调控序列及整合部位等因素相关。而由于转入的基因无法顺利转录成相应的mRNA而导致基因沉默。转基因植株中外源基因的转录水平可以通过细胞总RNA 或mRNA 与探针的杂交来分析。

Northern 杂交，是指将RNA 分子变性及电泳分离后，从电泳凝胶转移到固相支持物上进行核酸杂交的方法，是研究基因表达的最严谨的方法之一，可以定量地分析组织中的某一特异mRNA 的表达丰度，根据其迁移的位置也可以判断基因的分子大小。Northern 杂交程序与Southern印迹杂交相似。(https://www.daowen.com)

需要注意的是，RNA易受RNase作用而降解，因此在提取RNA时操作全过程须在4 ℃低温条件下或冰上进行。操作中一次性手套要经常更换，尽量避免RNase 污染。

Northern 杂交比Southern 杂交更接近于目的性状的表现，因此更有现实意义。李淑洁（2014）用Northern点杂交分别对转基因油菜目的基因表达进行了鉴定。但Northern杂交对细胞中低丰度的mRNA 检出率较低。因此在实际工作中更多的是利用RT-PCR（reverse transcription PCR）技术对外源基因的转录水平进行检测。