转基因植株的目的性状检测
判定转基因植物还需要提供外源基因控制的表型性状证据(抗性),即外源基因的导入是否真正地发挥了外源基因的作用,使作物某一方面的性状得以提高。基因决定功能,功能体现于表型。转基因与未转基因的植物在生理生化或表型上是有差距的。因此检测生理生化指标可以间接地鉴定外源基因的作用;而直接证据就是表型的差异。
1.生理生化检测转基因植物的目的性状指标
根据外源基因功能的不同,转基因植物的生理生化指标会发生相应的变化,因而通过测定这些生理指标可以间接地鉴定外源基因的作用,尤其是改变一些植物应对非生物胁迫(如干旱和盐碱胁迫)的基因表达。如植物在高盐胁迫下迅速积累脯氨酸是植株抵抗胁迫的生理响应机制。通过检测转基因植物及对照在盐胁迫下游离脯氨酸的含量的变化来检测外源基因或判断外源基因的功能。另外,细胞膜的相对电导率,SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)等活性的变化,也可以作为一种生理生化指标来确定外源基因的转化是否成功并行使功能。(https://www.daowen.com)
2.转基因目的性状的生物学鉴定
转基因的目的是通过外源基因在受体植株中表达,来改良植株某些方面的生物学性状。同样是在那些以提高植物生物和非生物胁迫抗性的转基因研究中,也可以通过表型特征来判断外源基因在转基因植物中的作用。可以给转基因植株施加一定的选择压力,如低温、干旱、盐胁迫、接种病毒、虫害等,检测转基因植株和未转基因植物表型的差异,如果植株表现同对照植株相比有明显的抗性,则表明该植株是转基因植株,并且确定转入的外源基因起了作用。孙越等(2015)通过农杆菌获得抗虫、抗除草剂、抗干旱转基因玉米,在严格控制条件下对6 个转基因株系进行玉米螟接种抗虫试验、喷洒大田除草用量的草甘膦溶液和干旱胁迫处理检测。结果表明,在营养生长期和灌浆期这6 个株系玉米的抗虫能力均显著高于未转基因自交系;转基因植株比未转基因自交系对草甘膦有更强的耐受性;在干旱控水期间,转基因植株因能维持较强的光合能力和光系统Ⅱ活性,对干旱胁迫的抗性显著高于对照植株。