计数方法适用性预试验(2)
2025年08月10日
五、计数方法适用性预试验(2)
5.1 试验组。取二十五味珍珠丸1∶10供试液,分别加到3个灭菌的三角瓶中,每瓶10 mL,分别加入白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌0.1 mL菌悬液(小于1 000 cfu),制成每毫升二十五味珍珠丸1∶10供试液,含菌数小于100 cfu,取含菌的样品溶液0.2 mL、0.5 mL,置直径90 mm的无菌平皿中,每个菌液每个取样体积注2个平皿,注入20 mL温度不超过45℃溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基,混匀,凝固,倒置培养,测定菌数。
5.2 菌液对照组。加入到样品中的白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的菌悬液进行10倍稀释,取稀释后菌悬液0.2 mL、0.5 mL注皿,加胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基,混匀,凝固,倒置培养,测定阳性对照菌数。
5.3 供试品对照组。用供试液替代试验组液体注皿,计数。
5.4 阴性对照组。用同批配制、灭菌的胰酪大豆胨液体培养基0.2 mL、0.5 mL替代样品注皿,注入20 mL温度不超过45℃溶化的胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基,混匀,凝固,倒置培养,测定阴性对照菌数。
计数方法适用性预试验(2)结果见表6。
表6 计数方法适用性预试验(2)
注:1.-表示液体澄清或平板无菌落生长。
2.白色念珠菌1在胰酪大豆胨琼脂培养基计数,白色念珠菌2在沙氏葡萄糖琼脂培养基计数。
结果:计数中金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌回收率高于50%,白色念珠菌回收率低于50%,方法不可行。