（一）母种制作

1.菌种的选择

鸡腿蘑有单生种和丛生种之分，单生种个体肥大，适于制罐，但产量较低；丛生种个体较小，适于鲜销，产量较高。单生种以CC123和CC155为好，丛生种以CC100和CF10为宜。

2.培养基制备

鸡腿蘑对营养要求不甚严格，一般菇类常用培养基即能满足生长需求，如PDA培养基、综合培养基等。用麦粒、玉米粒煮熟作培养基亦可。

3.菌种分离及培养

选择优良的鸡腿蘑子实体，用酒精消毒后切取子实体中组织块，在无菌条件下接种于事先配制好的培养基上，置于5℃下培养30天左右，菌丝长满斜面，即为母种。