质量研究的试验资料及文献资料
复方关节炎胶囊是由当归、赤芍、茯苓、海马、伸筋草、荆芥、防风、乌药、延胡索、甘草共10味中药制成。该方药味成分复杂,其性质各不相同,现将有关的文献资料及研究资料归纳总结如下。
(一)现代药理研究
1.赤芍的药理作用:
(1)抗血栓形成作用:赤芍煎剂15~20g(生药)/kg给大鼠灌胃,使血栓形成时间明显延长,长度缩短,重量减轻;凝血酶原时间和白陶土部分凝血活酶时间延长,优球蛋白溶解时间缩短,表明对血凝有显著抑制作用。
(2)抗血小板聚集作用:赤芍提取物在体外对肾上腺素、二磷酸腺苷(ADP)、烙铁头蛇毒(TMVA)和花生四烯酸(AA)诱导的血小板聚集均有显著抑制作用,并使血小板黏附与血小板第三因子活性降低,血小板内cAMP含量升高。赤芍成分及其衍生物801、802在5×10-4~5×10-3mL/L时对ADP和胶原诱导的兔血小板聚集均有明显抑制作用,其中802作用最强,对ADP诱导的血小板聚集尚有解聚作用。
(3)降血脂和抗动脉硬化作用:赤芍浸膏片5g(生药)/kg,每日服1次,连用10~15周,使高脂血兔的血浆总胆固醇(Tch)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Ch)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-Ch)显著降低;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-Ch)及HDL2-Ch显著高于对照组;Tch/HDL-Ch、Tch/HDL2-Ch、LDL-Ch/HDL-Ch和LDL-Ch/HDL2-Ch比值显著降低,同时使高脂血症所致血栓烷A2/前列环素(TXA2/PGI2)比值趋于正常。
2.茯苓的药理作用:
(1)抗肿瘤作用:茯苓中的主要成分为茯苓聚糖(Pachyman),含量很高。茯苓聚糖本身无抗肿瘤活性,若切断其所含的β-(1→6)吡喃葡萄糖支链,成为单纯的β-(1→3)葡萄糖聚糖[称为茯苓次聚糖(Pachymaran)],则对小鼠肉瘤S180的抑制率可达96.88%。
(2)茯苓多糖体对免疫功能的影响:茯苓多糖、羟乙基茯苓多糖-3、羟乙基茯苓多糖-4于腹腔注射可以明显增强小鼠腹膜渗出细胞(PEC)的细胞毒性作用;茯苓聚糖、羟乙基茯苓多糖-1、羟乙基茯苓多糖-2也有一定的作用。羟甲基茯苓多糖能明显增强小鼠脾抗体分泌细胞数(PFC)以及特异的抗原结合细胞数(SRFC)。羟甲基茯苓多糖对PFC及SPFC的增强作用随剂量的增加而增加;能明显增强小鼠对BSA诱导的迟发型超敏反应性。增加酸性非特异酯酶(ANAE)阳性淋巴细胞数。增强T淋巴细胞的细胞毒性:茯苓多糖体能增强T淋巴细胞的细胞毒性作用,即增强细胞免疫反应,并因此激活机体对肿瘤的免疫监督系统,这与其抗肿瘤活性密切相关。
(3)对血液系统的影响:能使环磷酰胺所致大白鼠白细胞减少加速回升。含水溶性小分子多糖的茯苓水提液能使离体健康人红细胞2,3-DPG水平上升约25%,并能有效地延缓温育过程中2,3-DPG的耗竭;静脉给药小鼠整体2,3-DPG水平显著上升。茯苓水煎剂皮下注射给药和灌胃给药均可使小鼠血浆皮质酮明显升高。所以以水提取入药。
3.海马的药理作用:
(1)性激素样作用:海马的乙醇提取物,可延长正常雌小鼠的动情期,对去势鼠则可出现动情期,并使子宫及卵巢(正常小鼠)重量增加。海马(品种未注明)提取液表现雄性激素样作用,其效力较蛇床子、淫羊藿弱,但比蛤蚧强。
(2)延缓衰老作用:海马能延长小鼠(NiH雄性小鼠)缺氧和存活时间,延长小鼠的游泳时间,显示了较好的抗应激力,可增强体质和对外界不良刺激的抵抗力,增强动物的记忆力。海马对MAO-B(单胺氧化酶B)活性、过氧化脂质均有显著影响。海马配人参的制剂经药理实验表明,小鼠游泳持续时间明显延长,并能对抗氢化可的松引起的小鼠胸腺萎缩的不良影响,表现出补益作用。
4.伸筋草的药理作用:伸筋草具有降温、降血压作用:本品水浸剂对实验家兔有降温作用。30mg/kg静脉注射石松碱可使麻醉猫、兔血压骤降,中毒剂量可增加动物呼吸振幅而减少频率。体外对福氏痢疾杆菌、宋内氏痢疾杆菌高度敏感,对志贺氏痢疾杆菌中度敏感。石松碱对蛙心收缩力有增强作用。对离体大鼠、豚鼠、家兔小肠平滑肌有兴奋作用。对兔、大鼠及豚鼠子宫有兴奋作用。在该制剂中以水煎入药。
5.荆芥的药理作用:(https://www.daowen.com)
(1)抗菌和抗炎作用:体外实验证明荆芥煎剂对金黄色葡萄球菌和白喉杆菌有较强的抗菌作用。此外,对炭疽杆菌、乙型链球菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、铜绿假单胞菌和人型结核杆菌等有一定的抑制作用。荆芥煎剂及荆芥与防风混合煎剂均有明显抑制小鼠耳郭肿胀作用,混合煎剂比单煎效果好。荆芥对醋酸引起的炎症有明显的抗炎作用。
(2)解热镇痛作用:荆芥煎剂具有解热镇痛作用,用伤寒混合菌苗使家兔发热,给予裂叶荆芥煎剂或乙醇浸剂 2g/kg灌胃,发现有微弱的解热作用。荆芥的镇痛作用以d-薄荷酮为代表,用d-薄荷酮100mg/kg给小鼠灌胃,能抑制因腹腔注射醋酸引起的扭体反应,其强度与氨基比林相当。
(3) 止血作用:生品荆芥不能明显缩短出血时间,而荆芥炭则使出血时间缩短72.6%;生品荆芥使凝血时间缩短30%,而荆芥炭缩短77.7%,即荆芥经炒炭后有止血作用。有报告指出,荆芥炭混悬液和荆芥炭挥发油乳剂均有明显的止血作用,且与剂量相关。但荆芥炭水煎剂及提出挥发油后的荆芥炭水煎剂,均未见明显的止血作用。报告者认为,临床上使用荆芥炭治疗各种出血疾病时,应以散剂内服为佳。亦有报告指出,荆芥炭脂溶性提取物的止血作用是通过体内促凝血、抗纤溶和激活外源性凝血系统而实现的。
(4)其他作用:实验表明荆芥油能降低正常大鼠体温;亦有镇静作用,荆芥油(0.5mL/kg)给兔灌胃,可见其活动减少,四肢肌肉略有松弛。
6.防风的药理作用:镇痛作用,镇静作用,抗炎作用,抗过敏作用,对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,解热作用。
7.乌药的药理作用:乌药具有较为广泛的药理活性,主要有抗菌、抗病毒作用。另外,鲜乌药叶也有抗菌作用。乌药能增加消化液的分泌,还能对抗临床应用大黄引起的腹痛。乌药水煎液可明显增大家兔胃电幅值,有兴奋和增强胃运动节律作用。乌药水煎液可以显著抑制溃疡的形成,可明显对抗乙醇诱发的细胞损伤,具有细胞保护作用。乌药对心肌有兴奋作用,其挥发油内服有兴奋心肌、加速回流循环、升压及发汗作用。体外实验表明乌药有促进血凝作用,亦有报道乌药有抗凝血酶作用。乌药对小鼠肉瘤S180抑制作用明显。乌药根中呋喃倍半萜组分对实验性肝损伤有预防作用,该组分对CCl4引起的GOT、GPT 升高有预防作用,对乙硫氨酸所致血清转氨酶升高,GOT 升高均有较强的抑制作用,并可保护肝脏免受脂肪浸润。另外乌药亦有抗组胺的作用。
(二)质量标准研究
1.为方中当归的鉴别:取本品内容物5g(批号:20130301、20130302、20130303),加乙醚20mL,超声处理20min,过滤,滤液蒸干,残渣加乙醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010版一部,附录Ⅵ B)试验,吸取上述溶液各10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-醋酸乙酯(4∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。此法专属性及重复性好,空白无干扰,故纳入标准正文。
2.为方中防风的鉴别:取本品内容物3g(批号:20130301、20130302、20130303),加丙酮20mL,超声提取20min,过滤,滤液蒸干,残渣加乙醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取防风对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010版一部,附录Ⅵ B)试验,吸取上述溶液各10μL,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以三氯甲烷-甲醇(4∶1)为展开剂,饱和15min,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。此法专属性及重复性好,空白无干扰,故纳入标准正文。
3.为方中延胡索的鉴别:取本品内容物3g(批号:20130301、20130302、20130303),加甲醇50mL,超声提取30min,过滤,滤液蒸干,残渣加水10mL使溶解,加浓氨试液调至碱性,用乙醚振摇提取3次,每次10mL,合并乙醚液,蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取延胡索对照药材1g,加甲醇10mL,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010版一部,附录Ⅵ B)试验,吸取上述溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-丙酮(9∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置碘缸内熏3min,取出,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。本法专属性及重复性好,空白无干扰,故纳入标准正文。
4.另外本实验还对赤芍、茯苓、荆芥进行了薄层鉴别,具体方法如下:
(1)赤芍的鉴别:取本品内容物5g(批号:20130301、20130302、20130303),加乙醇10mL,振摇提取5min,过滤,滤液蒸干,残渣加乙醇2mL使溶解,作为供试品溶液。另取赤芍对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010版一部,附录Ⅵ B),吸取上述溶液各10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%的香草醛浓硫酸溶液,105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中在与对照药材色谱相同的位置上,有相同颜色的斑点出现,但比较模糊。故不纳入标准正文。
(2)茯苓的鉴别:取本品内容物5g(批号:20130301、20130302、20130303),加乙醚20mL,超声提取15min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010版一部,附录Ⅵ B),吸取上述溶液各10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(20∶5∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%的香草醛浓硫酸溶液-乙醇(4∶1)的混合溶液,105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中在与对照药材色谱相同的位置上,有相同颜色的斑点出现,但不清晰。故不纳入标准正文。
(3)荆芥的鉴别:取本品内容物5g(批号:20130301、20130302、20130303),加石油醚(60~90℃)20mL,密塞,时时振摇,放置过夜,滤过,滤液蒸干,残渣加石油醚(60~90℃)1mL使溶解,作为供试品溶液。另取荆芥对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010版一部,附录Ⅵ B),吸取上述溶液各10μL,分别点于同一硅胶H薄层板上,以正己烷-醋酸乙酯(17∶3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%的香草醛浓硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中在与对照药材色谱相同的位置上,有相同颜色的斑点出现,但有干扰。故不纳入标准正文。