四、具体实施方式

为了进行血友病病因学分类,申请人设计、合成了一组用于检测血友病患者的FⅧ/FⅨ基因突变的引物,包括8对F9引物,以及39对、22倒位3条、1倒位4条F8引物,并将这些引物应用于血友病病因学分类,其血友病病因学分类步骤为:

(1)用MC-1000血凝仪检测患者的FⅧ/FⅨ:C,确定是否为FⅧ/FⅨ缺乏;再以8对F9引物,以及39对、22倒位3条、1倒位4条F8引物,用ABI 3100基因分析仪测序技术及优选多重与倒转环化PCR扩增技术检测患者的FⅧ/FⅨ基因突变;继用改良Nijmegen法检测患者的FⅧ/FⅨ:Ab。(https://www.daowen.com)

(2)将检测结果分类为:血友病患者与其母亲的FⅧ/FⅨ基因均发生突变,而且突变的位点及类型完全相同,则为先天遗传性;血友病患者的FⅧ/FⅨ基因突变,而其母亲的FⅧ/FⅨ基因正常,且无家族遗传史,则为先天非遗传性;血友病患者及其母亲的FⅧ/FⅨ基因均正常,且无家族遗传史,血友病患者无既往异常出血史,但FⅧ/FⅨ:Ab检测常为阳性,则为后天获得性。