质量研究的试验资料及文献资料
复方生血胶囊系由红参、黄芪、当归、川芎等14味药材组成的中药复方制剂,具有补肾健脾、益气生血之功效,用于脾、肾、气、血虚所致之面色不华、倦怠乏力、腰膝酸软、头晕心悸等血虚证,主治再生障碍性贫血、营养不良性贫血、骨髓增生异常综合征、溶血性贫血等各种贫血。根据各药味中有效成分的理化性质及药理作用,结合临床治疗的要求,我们对其制备工艺进行了科学、合理的研究,并研究制订了一套稳定、可控的质量标准草案。
制剂处方中所用方药味成分复杂,其性质各不相同,现将复方生血胶囊有关的文献资料及研究资料归纳总结如下。
(一)现代药理研究
1.黄芪的药理作用:黄芪能改善动物贫血现象,能升高低血糖,降低高血糖。有广泛的抗菌作用。能增强心肌收缩力,保护心血管系统,抗心律失常,扩张冠状动脉和外周血管,降低血压,能降低血小板的黏附力,减少血栓形成。还有降血脂、保肝等作用。根据其所含有效成分的理化性质及黄芪在制剂中的应用习惯,拟采用将其水煎煮入药。
2.当归的药理作用:
(1)抗血栓及改善血液流变学作用:当归有抗血栓作用,对血栓的形成有明显的抑制作用。当归的有效成分阿魏酸能抑制血小板聚集。当归挥发油部分可抑制血小板花生四烯酸代谢。给大鼠静注当归提取液后,血浆优球蛋白溶解时间缩短,纤维蛋白原含量下降,结果表明当归可促进血浆纤维蛋白溶解过程,具有纤溶活性。
(2)改善血液循环作用:当归能改善外周循环,减少血管阻力,增加股动脉血流量,增加外周血流量,改善局部微循环,扩张皮肤血管。其扩张血管的作用与A或B受体无关,而与M-受体及组织胺H1受体兴奋有关。当归能改善脑循环,对急性脑缺血、缺氧有保护作用,其作用的物质基础可能为丁基苯酞。
(3)对心血管系统的作用:当归煎剂或流浸膏对离体蟾蜍心脏有抑制作用,剂量加大,可使心跳停止于舒张期。当归对大鼠心肌缺血再灌注的心律失常具有保护作用,能使室性早搏发生率和心律失常总发生率明显减少。当归有改善冠脉循环作用,可显著增加冠脉流量,降低冠脉阻力,显著减轻其因阻断冠脉时的心肌梗死范围。
(4)对平滑肌作用:当归有扩血管作用及对去甲肾上腺素(NA)所致血管痉挛有温和解痉作用。藁本内酯是主要活性部分,其机制可能是通过干扰了细胞内钙离子的代谢。当归挥发油对肠平滑肌痉挛有较强的抑制作用。挥发油成分正丁烯基苯酞和藁本内酯在体外有松弛气管平滑肌作用。此外,据文献报道,当归具有兴奋子宫和抑制子宫的双重作用,这种双向调节作用可能是其治疗痛经、催产的药理基础。
(5)抗炎和镇痛作用:当归对多种致炎剂引起的急性毛细血管通透性增高、组织水肿及慢性炎性损伤均有显著抑制作用,且能抑制炎症后期肉芽组织增生。当归A3活性部位具有较强的抗炎作用,其抗炎作用机制可能与抑制COX-2mRNA及蛋白表达有关。当归水提物对腹腔注射醋酸引起的扭体反应表现出镇痛作用,其镇痛作用强度为乙酰水杨酸钠的117倍。
(6)清除氧自由基和抗脂质过氧化作用:当归水提取物能抑制化学发光体系,具有清除氧自由基的作用。
(7)改善动脉粥样硬化:血管平滑肌细胞(SMC)的增殖是动脉粥样硬化形成的关键因素,近来研究发现,氧自由基能明显增强SMC的sis基因表达,促使SMC增殖。当归提取液可能通过增加超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低脂质过氧化物(LPO)水平,升高PGI2,cAMP水平,从而抑制SMC增殖,改善动脉粥样硬化。
(8)对肺部的保护作用:当归可扩张大鼠肺动脉,降低急性缺氧性肺动脉高压;当归对继发于慢性阻塞性肺病(COPD)的肺动脉高压也有一定的降低作用。自由基对肺纤维化有重要影响,而当归具有较强的抗自由基作用,给肺纤维化模型大鼠腹腔注射当归提取液后,病理切片结果显示当归治疗后肺间质纤维化明显减轻。
(9)利胆保肝作用:当归可使胆汁中固体物质重量及胆酸排出量增加。当归能保护细胞ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶、5-核苷酸酶和琥珀酸脱氧酶的活性,提示其对保护肝细胞和恢复肝脏某些功能有一定作用。实验证明,当归可缓解四氯化碳引起的大鼠急性肝损伤或肝硬化;当归对部分肝切除大鼠有一定促进肝细胞再生作用。
(10)补血作用:当归多糖可能通过直接和间接途径激活造血微环境中巨噬细胞、淋巴细胞等,也可刺激肌组织,促进其产生造血调控因子,进而促进多能造血干细胞和CFU-GM增殖分化,刺激骨髓粒单系造血,使外周血白细胞升高。此外当归有效成分菸酸、尿嘧啶、腺嘌呤、维生素B12,维生素E、β-谷固醇、亚叶酸、阿魏酸等也与生血造血功能有关。
(11)抗肿瘤作用:当归中当归多糖具有抗肿瘤作用。当归多糖能抑制黄曲霉素B1的致肝癌作用,腹腔注射当归多糖后亦能延长腹腔接种艾氏腹水癌细胞的小鼠的生存时间。岷县当归5种多糖样品对小鼠移植性肿瘤EC、Hep、S180、Lew is、B16等瘤株具有一定程度的抑制作用,并与某些化疗药物具有协同作用,能减轻化疗药物的副作用。
(12)增强免疫功能:当归能增强单核吞噬细胞系统的廓清功能,增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能,促进红细胞黏附功能,保护机体免受由环磷酰胺所诱导的突变,对细胞的再生以及染色体的修复有促进作用。有文献报道,当归对辐射损伤后的卵巢组织一方面具有保护作用,另一方面能促进卵泡细胞的增殖和分化。
3.川芎的药理作用:
(1)镇静作用:川芎挥发油对动物大脑的活动有抑制作用,而对延脑的血管运动中枢、呼吸中枢及脊髓反射有兴奋作用,剂量加大,则都转为抑制作用。川芎水煎剂灌胃,能抑制大鼠的自发活动;还能延长戊巴比妥钠引起的小鼠睡眠时间,并能拮抗咖啡因的兴奋,但不能防止五甲烯四氮唑、可卡因的惊厥或致死作用,也不能对抗戊四氮所致的大鼠惊厥。
(2)镇痛作用:川芎嗪给小鼠灌胃300 mg/kg,有明显镇痛作用。
(3)对心、脑血管系统的作用:①对心脏的作用:川芎嗪对离体豚鼠灌流心脏产生剂量依赖性抑制心肌收缩和增加冠脉流量。川芎嗪对麻醉兔心肌缺血再灌注所致心肌损伤和心肌顿抑有保护作用。左保华等亦证实川芎嗪可有效预防再灌注大鼠的心律失常。川芎嗪有对抗脑垂体后叶素引发的急性心肌缺血缺氧的作用。②对脑血管的作用:川芎嗪能显著增加缺血大鼠血浆中NO的含量,降低MMS总量和组织中MDA的含量,降低血比黏度,对大鼠缺血性再灌注损伤具有保护作用。岑得意等用大鼠脑梗死模型观察川芎嗪对大鼠脑梗死的作用,结果显示川芎嗪静注可显著改善大鼠异常神经症状和抑制ALP活性的下降,显著抑制ADP致血小板的聚集。③对冠脉循环的作用:川芎水提物及生物碱能扩张冠脉,增加冠脉流量,改善心肌缺氧状况。给麻醉犬静注川芎嗪后,冠脉及脑血流量增多,冠脉、脑血管、外周阻力降低。川芎嗪也能显著增加清醒小鼠的冠脉流量。④对机体其他血循环的作用:蔡英年等以雪貂活体左下肺叶灌流实验表明:肺动脉灌注或静脉注射川芎嗪,对肺动脉的舒张作用均明显大于体动脉。朱上林发现川芎嗪可以明显减少肝缺血再灌注损伤大鼠的血清转氨酶、LDH;减轻肝细胞的病理性损伤;明显降低肝组织LPO、TXB2的升高;维持缺血及再灌注期SOD活性。⑤对外周血管及血压的作用:川芎生物碱、川芎嗪能降低麻醉犬的外周血管阻力。川芎总生物碱、酚性部分和川芎嗪能抑制氯化钾和肾上腺素对家兔离体胸主动脉条的收缩作用。川芎浸膏、水浸液、乙醇水浸液、乙醇浸出液和生物碱对麻醉犬、猫、兔不论肌注还是静注均有显著而持久的降压作用。水浸液给高血压犬或大鼠灌胃,也有明显的降压作用。⑥对呼吸系统的作用:王良兴发现川芎嗪具有扩张静息支气管及抑制组胺、乙酰胆碱收缩支气管的作用。静脉注射肾上腺素造成大鼠剧烈的致死性肺水肿,用川芎嗪预防后,其存活率、生存时间及肺指数均明显改善。⑦延缓慢性肾损害的作用:川芎嗪能够显著增加肾血流量,减轻兔肾热缺血模型的肾组织损伤,还能提高膜性肾炎家兔肾组织的SOD活性,减轻肾组织细胞的脂质过氧化损伤,降低缺血再灌注损伤肾脏细胞的凋亡指数。⑧对血小板聚集、血栓形成和血液黏滞度的影响:川芎嗪能延长体外ADP诱导的血小板聚集时间,对已聚集的血小板有解聚作用,还可提高红细胞和血小板表面电荷,降低血黏度,改善血液流变的作用。阿魏酸能抑制血小板TXA2的释放,对其活性有直接的拮抗作用,还能升高血小板内cAMP含量,抑制血小板聚集。⑨对平滑肌的作用:家兔离体妊娠子宫实验证明,川芎浸膏能增强子宫收缩,形成痉挛;大剂量反而使子宫麻痹,收缩停止。川芎煎剂15 g/kg 或25 g/kg 经十二指肠给药,对兔在体子宫也呈明显收缩作用。
4.熟地的药理作用:
(1)抗胃溃疡及保护胃黏膜作用:现有研究表明,地黄中单体活性成分地黄苷D、地黄苷A可以使阴虚模型小鼠体重明显增加、血浆cAMP含量明显降低;地黄苷A能明显提高小鼠血清溶血素水平,增强小鼠迟发性变态反应,而对腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬系数无明显影响。
(2)抗炎解热作用:研究生地黄水提液对家兔阴虚热盛型发热的作用,结果表明地黄水提液可显著降低阴虚热盛型发热家兔发热高峰值,并缩短发热时间;抑制血浆cAMP含量过高及cAMP/cGMP比值升高,具有抗炎解热效应。
(3)抗衰老作用:生地水提取物和醇提取物可不同程度地对抗肝微粒体脂质过氧化,醇提取物的作用强于水提取物。熟地的氯仿及乙醇提取液均能明显提高D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠脑组织中NOS和SOD活性,使NO含量增加,LPO含量明显降低,从而发挥延缓衰老的作用。
(4)抗肿瘤作用:地黄多糖b可抑制S180荷瘤小鼠细胞毒性T淋巴细胞活力下降,促进IL-2分泌,提示地黄多糖b可明显增强Iyt-2+细胞毒性T淋巴细胞对肿瘤的杀伤能力。
(5)地黄的血液流变学作用:研究发现熟地黄可以通过改善红细胞变形能力、红细胞集合体形成等红细胞动态,并通过纤溶系增强并改善血液流变学;而生、干地黄的血流流变学改善作用较弱,并且熟地黄中含有的5-羟甲基糠醛为生地黄中的20倍。
(6)对免疫系统的影响:用鲜地黄汁和鲜地黄水煎液给醋酸泼尼松诱导的免疫低下小鼠灌胃,能使类阴虚小鼠的脾脏淋巴细胞碱性磷酸酶的表达能力明显增强,对于甲状腺素造成的小鼠阴虚模型,鲜地黄汁还能增强ConA诱导的脾脏淋巴细胞转化功能。
(7)增强学习记忆能力:地黄低聚糖可剂量依赖性地增强缺血再灌注损伤大鼠的学习记忆能力,降低海马Glu含量,提高p2ERK2和乙酰胆碱含量。另有研究表明地黄低聚糖对Glu引起的海马神经元损伤具有保护作用,这种作用可能与其抑制神经细胞对葡萄糖的过度摄入有关。
5.山楂的药理作用:
(1)对心脑血管系统的作用:①降压作用:山楂有扩张外周血管并具有持久的降压作用,尤其对冷血动物的降压作用持续时间最长,当山楂与槲寄生、大蒜、梧桐合用时,其降压作用大为增强,作用时间也有所延长。研究表明山楂叶、花、果提取液治疗高血压糖尿病,结果表明,服用山楂提取液的病人较安慰剂组舒张压明显下降。山楂糖浆(相当于原生药0.7g/mL),日服3次,每次20mL,1个月为1个疗程,用于高血压病人,有效率达80%,并能增加食欲,改善睡眠。山楂总提物对小鼠、兔、猫亦有较为明显的中枢性降压作用。②抗心肌缺血:山楂总黄酮能减轻缺血再灌注损伤心肌心电图的ST段变化,提高血清NO的浓度,降低心肌缺血再灌注时心肌组织丙二醛(MDA)的水平。实验表明,炒北山楂可有效抑制脑垂体后叶素造成兔心肌缺血的心电图ΣT和ΣS-T抬高,抑制Q-T间期的延长,抑制心率变缓。山楂叶总黄酮能减轻3D乳鼠缺血缺氧损伤后心肌细胞心律失常的程度,推迟心肌细胞的停搏时间,减少心肌细胞乳酸脱氢酶LDH的释放量,降低MDA水平并提高细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活力和NO的量。山楂聚合黄酮能缩小兔实验性心肌梗死范围。文献报道,山楂提取物可以抑制缺血再灌注大鼠血清中(LDH)的升高,提高SOD的活力,降低MDA的生成量,从而保护心肌,减轻缺血再灌注导致的心肌细胞损伤。③抗脑缺血作用:山楂叶总黄酮(20g/kg、40g/kg、60g/kg)可明显提高模型小鼠脑组织LDH及SOD活力,40g/kg、60g/kg剂量可显著降低MDA量,对局灶性脑缺血再灌注损伤小鼠脑组织有明显的保护作用,其机制与抗氧化有关。据文献报道,山楂叶总黄酮60mg/kg和30mg/kg可明显升高MCAO大鼠血清中SOD活性,降低血清中CK、LDH活性及MDA量和明显降低血瘀大鼠的全血黏度、血浆黏度及血小板聚集率,减轻缺血损伤,对脑细胞具有保护作用。用山楂叶总黄酮(100mg/kg)可明显改善大鼠神经行为,缩小梗死范围,减轻脑组织病理变化,并可提高脑组织中SOD活性,降低脑组织中MDA及NO的量,TUNEL染色阳性细胞数明显减少,凋亡率明显下降(P＜0.01),CytC蛋白的表达明显降低(P＜0.05,0.01),而Fas蛋白的表达无明显变化,(P＞0.05)。其机制可能与抗自由基损伤,减轻NO神经毒性,抑制线粒体细胞色素C通路的神经细胞凋亡有关。实验表明山楂总黄酮(60mg/kg、30mg/kg)可明显减少缺血再灌注大鼠脑梗死面积,降低MMP-9的表达,发挥脑保护作用。也有文献报道,山楂酸灌胃脑缺血再灌注损伤小鼠以后,能降低脑组织乳酸、MDA量,提高SOD和LDH活力,还能对抗缺血期间的肝糖原降解。④对血液流变学的作用:研究表明,山楂总黄酮3个剂量(80g/kg、40g/kg、20g/kg)均有降低急性血瘀模型大鼠全血比黏度、血浆黏度和红细胞压积的活血化瘀作用。山楂醇提取物对中、低切全血比黏度有显著降低作用。⑤对血管内皮细胞的作用:研究数据显示,5μg/mg和10μg/mg的山楂总黄酮可以降低缺氧人脐静脉内皮细胞的细胞毒水平(P＜0.05,0.01),显著下调缺氧内皮细胞内钙离子(P＜0.01)和NO水平(P＜0.01)。不同剂量的山楂对氧化修饰的低密度脂蛋白引起的人脐静脉内皮细胞(EC)损伤和对EC的直接作用表明,山楂能抑制低密度脂蛋白的氧化修饰,减少脂质过氧化物的形成,阻断有害物质的产生,可通过直接作用于内皮细胞,调节内皮细胞功能,增强内皮细胞对有害因子的抵抗力和耐受性,从而保护内皮细胞免受损害。
(2)对消化系统的作用:山楂可单味应用,亦可与神曲、麦芽、莱菔子等配伍,加强消食化积之功。其含维生素C、维生素B、胡萝卜素及多种有机酸,口服能增加胃中消化酶的分泌,所含蛋白酶、脂肪酸,可促进肉食分解消化。山楂对胃肠道运动功能具有一定调节作用,能增强大鼠松弛状态胃平滑肌的收缩,而对乙酰胆碱及钡离子引起兔、鼠离体胃肠道平滑肌收缩具有明显抑制作用。炮制影响山楂的消化作用,炒山楂酸味减弱,可缓和对胃的刺激;焦山楂不仅酸味减弱,还增加了苦味,长于消食止泻;山楂炭味微苦涩,偏于止泻、止血。
(3)调血脂作用:山楂总黄酮表现出显著的调血脂作用,对高脂血症所致大鼠血管功能损伤具有明显保护作用,其机制可能与NO的升高、内皮素(ET)合成减少有关。
(4)糖代谢及抗氧化作用:研究表明应用6%的山楂水煎剂可明显降低高脂饮食大鼠空腹血清胰岛素和MDA水平,表明其可改善高脂饮食大鼠的胰岛素血症,增强机体抗脂质氧化作用,其机制可能与调节糖代谢有关,其药效的物质基础可能与金丝桃苷和熊果酸有关。微波辅助提取的山楂提取物对DPPH·自由基有较强的清除能力,并与浓度呈正相关,但其抗氧化能力弱于维生素C槲皮素。研究表明山楂籽油14mL/kg剂量给小鼠灌胃,可以显著提高小鼠肝、脑组织中SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,显著降低小鼠肝、脑组织中MDA的量,说明适量山楂籽油有助于增强机体清除自由基的能力,具有一定的抗氧化作用。研究表明用山楂叶总黄酮分别给自然衰老小鼠和D-半乳糖致衰老大鼠,结果表明其能提高脑组织中SOD和全血中SOD和GSH-Px活力,而MDA和LF明显下降。
(5)对肝功能的作用:山楂叶总黄酮能有效防治非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的发展,明显缓解NASH大鼠的氧化应激,减少脂质过氧化,显著增强机体抗氧化能力。山楂叶总黄酮对大鼠肝组织脂肪程度和炎症程度较模型大鼠显著降低,肝匀浆总胆固醇量和血清谷丙转氨酸(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平较同期模型组明显减轻,肝组织MDA量显著减少,SOD、GSH-Px及总抗氧化活性显著升高,表明山楂叶总黄酮能调节脂质代谢紊乱,对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎有较好的防治作用。山楂香菇粥具有健脾消食、活血化瘀、降脂作用,对脂肪肝病人具有很好的保护作用。
(6)抗菌作用:山楂对多种杆菌和球菌有抵抗作用,如福氏杆菌、宋氏杆菌、斯密士杆菌、变形杆菌、奈氏杆菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、伤寒杆菌和溶血性链球菌等。李长青等以山楂核提取物为主要杀菌成分的皮肤消毒剂,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌具有较好的杀菌效果,且稳定性较好。临床上用山楂鲜品或熟品外敷治疗冻伤感染及溃疡,并取得较好的效果。
(7)抗肿瘤作用:山楂果总黄酮对正常细胞的生长无明显影响,但能使肿瘤细胞内钙浓度明显升高,体外通过钙超载抑制Hep-2细胞,进而导致细胞凋亡。山楂果总黄酮可通过抑制肿瘤细胞DNA的生物合成,从而阻止瘤细胞的分裂繁殖。
(8)抗疲劳作用:山楂多糖能增加小鼠负重游泳时间,增强小鼠缺氧耐力,降低小鼠血清尿素氮、血乳酸量,提高肝糖原的量,具有显著抗疲劳作用。
(9)对尿液影响:张璐等研究表明,山楂总黄酮经腹腔注射,对尿液的生成有抑制作用。因药量、给药途径、提取方式的不同,也有报道其有泻下、增加尿液的作用。
6.地榆的药理作用:
(1)止血作用:南云生等给小鼠灌服生地榆煎剂10 g/kg,明显缩短了出、凝血时间。但制炭后上述作用消失,认为与炒炭后鞣质减少有关。贾天柱等以烘法制备地榆炭, 0.03 mL/g给小鼠灌胃50%的水煎液,测定出、凝血时间。烘品可明显缩短小鼠出、凝血时间,推测与钙离子对血液的促凝作用有关。王琦等比较了5个产地的地榆和地榆炭饮片的鞣质含量、水浸出物及小鼠凝血时间,结果表明,地榆炒炭存性程度、水浸出物含量和鞣质含量越低,止血作用越弱。郭淑艳等比较地榆炒炭前后的止血作用,地榆炭的止血作用优于生地榆,认为是炒炭后钙离子含量大幅度增加所致。
(2)抗氧化作用:地榆提取物(约含鞣质46.3%)大鼠灌胃给药30 d 后造模,低剂量组(10 mg/kg)、高剂量组(20 mg/kg)均能明显降低内毒素模型和肾缺血—再灌注模型血浆中3-硝基酪氨酸、尿素氮和肌酐的浓度,且有量效关系。高剂量组与对照药氨基胍效果相似。给药组肾缺血—再灌注模型的DNA断裂片段比例明显降低。提示地榆提取物能对抗ONOO-的肾损害作用,抑制细胞凋亡。地榆提取物(约含鞣质46.3%)连续给药40 d,能逆转老化加速SAM小鼠肾脏和肝脏中谷胱甘肽下降和二硫化谷胱甘肽上升的趋势,血清、肾脏及肝脏中丙二醛含量下降到接近正常水平,提示地榆提取物具有改善氧化应激和氧化损伤的作用。
(3)抗肿瘤作用:王振飞等研究地榆提取液对3 种癌细胞H epG2,H eLa,BGC823克隆形成率的影响,表明地榆提取液可明显抑制这3种癌细胞的生长增殖,且呈剂量依赖性。
(4)抗菌作用:体外抑菌试验表明,地榆对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、伤寒杆菌、溶血性链球菌、枯草杆菌、志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌均有强大的抗菌效能。吴开云等研究了虎杖和地榆的不同比例组合对金黄色葡萄球菌、甲型链球菌、表皮葡萄球菌、枯草杆菌、变形杆菌和铜绿假单胞菌的体外抗菌作用。结果表明,配伍的抑菌能力与配比比例有关,较之单味药有增强、不变和降低3种情况。
(5)抗炎消肿作用:大鼠腹腔注射地榆水提取液400mg/kg、醇提取液650mg/kg,连续3d, 可明显抑制正常大鼠甲醛性足肿胀,48h内肿胀恢复正常。推测是降低了毛细血管的通透性,减少了渗出,从而减轻了组织水肿。
(6)其他作用:文献报道地榆有增强免疫,镇吐,止泻和抗溃疡等作用,可抑制紫外线B导致的大鼠皮肤光损伤,对过氧化亚硝酸盐所致的肾损伤也有保护作用。
7.鸡血藤的药理作用:
(1)对造血功能的影响:鸡血藤是一味活血化瘀中药,能补血、活血、通络;主治月经不调、血虚萎黄、麻木瘫痪、风湿痹痛。古代本草论著中记载鸡血藤具有“去瘀血,生新血”的功效,称之为“血分之圣药”。现代药理研究也证实了鸡血藤具有补血活血的活性。刘屏等研究发现鸡血藤中的儿茶素类化合物(儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素)、芒柄花素、间苯三酚及丁香酸,具有一定的促进造血细胞增殖的作用,能够缓解其造血祖细胞内源性增殖缺陷;其中儿茶素的刺激增殖活性最强,其可通过诱导白细胞介素-6(IL-6)和GM-CSF mRNA 的表达,促进正常小鼠骨髓细胞进入增殖周期,并能促进骨髓抑制小鼠的骨髓细胞跳出“G1 期阻滞”,进入细胞增殖周期。梁宁等研究发现鸡血藤总黄酮可促进血虚动物模型(环磷酰胺、盐酸苯肼、60钴照射、失血性贫血)造血功能恢复,具有抗贫血的作用,其机制可能与促进IL-3 的分泌及调节促红细胞生成素(EPO)水平有关。应军等利用环磷酰胺致白细胞低下大鼠模型研究鸡血藤提取物的生白细胞作用,结果发现其生白细胞作用的有效物质是总黄酮。
(2)抗肿瘤作用:研究表明鸡血藤二氯甲烷萃取物(MCSC)对人单核细胞白血病U937 细胞具有很强的细胞毒作用(IC50=15.1 μg/mL)。TUNEL 法检测表明MCSC能产生一个典型的不连续DNA 片段的梯状图谱和凋亡小体;流式细胞仪分析证实MCSC能提高凋亡细胞的数量;ELISA 试验证实MCSC 可激活caspase-3,说明MCSC 能通过caspase 依赖途径诱导U937 细胞凋亡。唐勇等采用MTT 法观察鸡血藤黄酮类组分体外对人肺癌A549 和人大肠癌HT-29 细胞系的生长抑制率,应用流式细胞术检测肿瘤细胞周期的改变,结果显示鸡血藤黄酮类组分具有直接抗肿瘤作用,细胞周期阻滞是其作用机制之一,且该组分无骨髓抑制作用,对红细胞生成有一定促进作用。薛丽君等研究报道鸡血藤提取物在5~80 μg/mL 剂量内对5 种肿瘤细胞(白血病细胞株L1210 和P388D1、宫颈癌细胞株HeLa、人胃癌细胞株SGC7901、黑色素瘤细胞株B161)均有抑制作用。S180 荷瘤小鼠灌胃给予鸡血藤提取物,能显著抑制小鼠肿瘤生长,并能明显提高腹水瘤小鼠的生命延长率。
(3)抗病毒作用:郭金鹏等报道鸡血藤水提物能有效抑制柯萨齐病毒(CV)B3、CVB5、埃可病毒9(EV9)、EV29 和脊髓灰质炎病毒(PVI)5 种肠道病毒引发的细胞病变,且其抑制作用存在量效关系;鸡血藤不能阻止CVB3 对非洲绿猴肾细胞系(VeroE6)的吸附作用,但可干扰CVB3 侵染后病毒核酸的复制。Lam 等研究几种中药对人免疫缺陷病毒Ⅰ型蛋白酶(HIV-I PR)的抑制作用,结果发现鸡血藤甲醇提取物(200 μg/mL)表现出90%以上的抑制率,表明其具有间接的抗HIV 作用。(https://www.daowen.com)
(4)免疫调节作用:胡利平等研究发现鸡血藤水煎液能够明显提高小鼠LAK 细胞(淋巴因子活化杀伤细胞)活性,且高质量浓度(1 g/mL)的鸡血藤水煎液亦能促进小鼠NK 细胞活性。余梦瑶等研究发现鸡血藤煎剂不仅能显著提高正常小鼠骨髓细胞增殖能力,还能提高其分泌IL-1、IL-2、IL-3 的能力,但鸡血藤对脾细胞增殖没有明显影响。
(5)对酪氨酸酶的双向调节作用:Lee等研究了从鸡血藤分离得到的12 个黄酮类化合物对人表皮黑色素细胞(HEMn)的酪氨酸酶(tyrosinase)活性以及黑色素生成能力的抑制作用,结果显示,紫铆素的抑制活性最强,并且表现出量效关系;Western-Blotting 结果显示,紫铆素处理后的HEMn细胞的酪氨酸酶以及酪氨酸酶相关蛋白1 和2(TRP1、TRP2)的表达量均有所减少;实时定量PCR 分析也显示酪氨酸酶和TRP1、TRP2的mRNAs 表达受到抑制。因此,认为紫铆素是鸡血藤中最主要的抗色素沉着有效成分,其作用机制主要是抑制酪氨酸酶和TRP1、TRP2 的基因转录。涂彩霞等在研究47 种治疗白癜风常用中药对酪氨酸酶的影响时发现,鸡血藤醇提取物对酪氨酸酶有激活作用,且其效应明显强于补骨脂素。
(6)其他作用:此外,鸡血藤有一定的抗炎、抗氧化、镇静催眠等作用。Li 等研究9 种藤本植物的抗炎作用时发现,鸡血藤乙醇提取物(除去多酚类化合物)对除COX-2 以外的与抗炎作用有关的酶均具有抑制作用,表明鸡血藤具有一定的抗炎作用。Liao等采用氧化自由基吸收能力(ORAC)实验模型测定了45 种活血化瘀中药的抗氧化活性,发现鸡血藤具有很强的抗氧化活性,ORAC 值为1990μmol TE/g,在所研究的45 种中药中活性最高。黄新炜等研究发现鸡血藤水提物能明显减少小鼠自主活动次数,延长戊巴比妥钠阈上剂量致小鼠睡眠时间,说明鸡血藤具有明显的镇静催眠作用,并与剂量呈现一定的相关性,其作用机制还有待于进一步深入研究。
8.女贞子的药理作用:
(1)保肝作用:中医认为女贞子有保肝作用,研究表明女贞子中的齐墩果酸对CCl4引起的大鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,明显减轻肝细胞变性及坏死,使血清中谷丙转氨酶明显下降,肝内甘油三酯蓄积减少,糖原蓄积增加,还能拮抗溴苯、呋喃苯胺酸、秋水仙素、内毒素等诱发的肝脏毒性。女贞子中红景天苷(对羟基苯乙醇-B-葡萄糖苷)具有清除自由基的功能,可保护肝脏免受CCl4、D-GalN、NCG +LPS引起的损伤,降低血清中ALT、NO 及肝组织中MDA、TG 的含量。
(2)免疫调节作用:女贞子对特异性和非特异性免疫均有调节作用。女贞子水提液能提高T淋巴细胞的功能,促进PHA、ConA 和PWM 引起的淋巴细胞增殖,增强异种(人)淋巴细胞引起的大鼠局部抗宿主反应。女贞子多糖对正常小鼠和肾上腺皮质激素造成的阴虚小鼠脾T 淋巴细胞增殖有显著促进作用,表明女贞子多糖对正常小鼠及阴虚小鼠均有免疫调节作用。同时,女贞子多糖还能直接刺激小鼠脾T 淋巴细胞的增殖或协同刺激有丝分裂原PHA 或ConA 促进小鼠脾T 淋巴细胞的增殖。女贞子中分离得到的特女贞苷、对羟基苯乙基-A-D-葡萄糖苷能显著提高由环磷酰胺抑制的NK 杀伤功能,减轻由地塞米松引起的NK活性低下作用。
(3)抗氧化、抗衰老:女贞子提取液能明显地改善D-半乳糖引起的衰老小鼠的学习和记忆能力, 其作用与其提高抗氧化酶活性、清除自由基、减少过氧化脂质的生成密切相关。女贞子多糖也能使衰老模型小鼠肝、肾组织中MDA下降,提高SOD及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,使脑组织中脂褐质(LF)下降。女贞子中的环烯醚萜类化合物有较强的抗氧化作用,能抑制自由基诱导的红细胞溶血。这些研究表明女贞子具有抗氧化及抗衰老的作用,与中医药关于女贞子的论述一致。
(4)抗肿瘤:女贞子提取物对H22、A548、LLC、LNC ap等肿瘤细胞有抑制作用,抗肿瘤作用与其具有抑制肿瘤细胞逆转录酶及多种DNA聚合酶的作用有关。女贞子的主要成分齐墩果酸可提高细胞内Ca2+水平,从而具有抑制人乳腺癌细胞(MCF27)增殖和诱导凋亡作用;齐墩果酸还有抗PGCL3人肺癌细胞增殖和侵袭作用,诱导PGCL3细胞的凋亡,这种作用不是对侵袭的某一环节的阻断,而是对侵袭各个基本环节均有抑制作用。
(5)降血糖、血脂:女贞子水煎剂能明显对抗肾上腺素引起的血糖升高,显著降低四氧嘧啶造成的糖尿病小鼠的血糖,还可降低小鼠口服葡萄糖造成的外源糖引起的血糖升高。女贞子中所含的女贞素、齐墩果酸也具有良好的降糖作用。女贞子有降低灌饲胆固醇和猪油家兔的血清胆固醇及甘油三酯的作用,可预防和消减动脉粥样硬化斑块,减轻斑块厚度,减少冠状动脉粥样硬化病变数,降低血管的阻塞程度。
(6)其他作用:女贞子能促进毛囊生长,对体外培养的人头皮毛囊生长有增强作用,分子生物学研究表明女贞子能增强小鼠毛囊肝细胞生长因子(HGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA 的表达,有效成分齐墩果酸虽不能提高毛囊VEGF的表达,但可增强HGF的表达,这与临床女贞子用于治疗须发早白的功效一致。女贞子临床上还用于治疗白癜风,研究表明女贞子可增强酪氨酸酶的活性和黑色素的合成,促进黑色素细胞干细胞生长因子受体(c-k it)蛋白的表达,其中齐墩果酸能增强黑色素细胞酪氨酸酶mRNA 的表达及活性,促进色素的形成。女贞子还可以提高去卵巢大鼠维生素D 受体(VDR)mRNA 的表达,提高肠钙吸收,维持体内钙稳态,改善绝经后骨质疏松症。女贞子中的环烯醚萜类成分有抑制RSV和Para 3这2种病毒的作用。
9.菟丝子的药理作用:
(1)抗衰老、抗氧化作用:蔡曦光等采用D-半乳糖小鼠,采取灌胃给药的方式观察菟丝子多糖对衰老模型小鼠的抗氧化能力的影响,结果发现,菟丝子多糖可以降低小鼠肝、肾组织中MDA 及脑组织中LF 含量,提高SOD、GSH-PX 活力,证明了菟丝子多糖可以清除自由基及抗脂质过氧化,具有抗衰老作用。临床观察也表明,菟丝子作为一种抗氧化剂,可以抑制体内自由基的产生,具有抗氧化作用。《太平圣惠方》中所收载的抗衰益寿方剂中出现概率最多的药物中就含有菟丝子。研究表明,菟丝子是通过延长细胞生存期,调节机体免疫功能,改善机体代谢,改善内脏机能以及提高机体应激能力而实现抗衰延寿作用的。
(2)生殖作用:菟丝子作为一种温补肾阳的中药,通过对应激性大鼠灌胃给药后发现,作为菟丝子的主要有效成分菟丝子黄酮能够促进下丘脑-垂体-性腺轴功能,提高垂体对促性腺激素释放激素的反应性,促进卵泡发育,提高应激大鼠雌二醇、黄体酮的水平,同时也能提高垂体促黄体生成素以及下丘脑β-内啡肽的水平。经过研究发现,菟丝子对精子活动具有明显的促进作用,可以明显提高精子的运动速度、活力指数及毛细血管穿透值,而对精子的膜功能无明显不良影响。
(3)免疫调节作用:菟丝子作为一种免疫增强剂,能够参与体内多种免疫调节。胸腺和脾脏作为中枢和重要的外周免疫器官,对机体的免疫功能调节具有重要作用,通过研究发现,菟丝子可以增加小鼠脾和胸腺重量,以及小鼠巨噬细胞吞噬功能和T 淋巴细胞增殖反应,但是对B 淋巴细胞增殖反应不明显,此外菟丝子还能够诱导IL-1、IL-2、IL-3 的释放。通过研究菟丝子对小鼠血清CSF的影响,发现腹腔注射菟丝子提取物后小鼠血清CSF水平明显提高,而CSF是刺激和调控造血祖细胞及淋巴细胞增殖、分化和成熟的主要调控因子,能刺激产生多种淋巴因子,增强免疫反应。
(4)预防和治疗心血管疾病:近年来对菟丝子研究的不断深入,发现其提取物对心血管具有一定活性,能够降低血压,增加冠状动脉流量,降低心肌耗氧量,改善微循环等。通过对成年杂种犬静脉注射菟丝子的提取物,结果发现,菟丝子不同提取工艺样品均能够增加心肌冠状动脉血流量,增加心肌的血液供应,静注后立即显效,且持续时间较长。李连达等研究菟丝子总黄酮对实验性心肌缺血及血流动力学的影响,实验结果表明不论预防性给药还是治疗性给药,都对心肌缺血具有明显的预防和治疗作用,可减轻心肌缺血的程度和范围,并有增加冠脉流量、扩冠、降压及强心作用。
(5)保肝明目作用:郭澄等通过研究菟丝子灌胃给药方式治疗四氯化碳所致的小鼠肝损伤模型,发现菟丝子水提液能够提高肝糖原、肾上腺抗坏血酸等水平,降低血液乳酸、丙酮酸及谷丙转氨酶含量,从而表明菟丝子对四氯化碳引起的肝损伤有保护作用。这可能是通过抑制体内儿茶酚胺的释放或拮抗其活性来实现的。半乳糖可以使大鼠晶状体混浊,而形成半乳糖性白内障模型。杨涛等实验表明,通过对大鼠采取灌胃的方式给药后,能够减轻晶状体混浊程度,从而表明菟丝子对大鼠半乳糖性白内障具有延缓和治疗作用,对生长发育无不良影响。菟丝子水煎剂可使白内障晶状体中醛糖还原酶、多元醇脱氢酶、己糖激酶、过氧化氢酶等的活性基本恢复正常。此外,菟丝子还对晶状体氧化还原物及糖类含量的异常变化具有纠正作用,能够防止谷胱甘肽降低以及恢复其含量。菟丝子提取物对晶状体醛糖还原酶及脂类过氧化有明显抑制作用,并随着提取物浓度的降低而降低,对醛糖还原酶活性的抑制类型为非竞争性抑制。
(6)其他作用:菟丝子黄酮能够显著抑制去卵巢大鼠的骨钙、磷的流失速度,使钙、磷排出量保持在正常水平,增强骨密度,调整骨形成和骨吸收的关系,对去卵巢造成的骨质疏松有明显的防治作用。成骨细胞体外培养也显示,菟丝子总黄酮ALP 活性和对照组相比增高,从而表明菟丝子总黄酮对成骨细胞的活性有促进作用。菟丝子水提物能够促进无色素黑素细胞(AMMC)生成黑素,并能促进黑素小体向成熟发展,明显增强酪氨酸酶的活性,在临床上可用来治疗白癜风。
10.淫羊藿的药理作用:
(1)对心脑血管系统的作用:研究表明淫羊藿总黄酮能拮抗异丙肾上腺素(ISO)对心房肌的正性肌力和正性频率的作用,表明淫羊藿总黄酮选择性阻断离体及整体动物心肌的β1受体,而对气管β2受体和血管平滑肌α受体无阻断作用。实验结果证明,淫羊藿苷还可通过扩张血管平滑肌而增加实验动物脑血流量,降低脑血管阻力,保护脑缺血损伤。
(2)对血液系统的作用:研究证明淫羊藿苷可促进小鼠脾淋巴细胞产生脑脊液(CSF)样活性。CSF是促进人体或动物骨髓细胞增殖、分化、成熟及存活的一类糖蛋白,可促进机体造血并刺激诱导成熟细胞的功能,对机体造血功能具有重要作用。研究发现淫羊藿苷可以协同诱生IL-2、IL-3、IL-6, IL-3 可作用于骨髓多能干细胞促进多种血细胞的分化增殖, IL-6 协同IL-3 支持多能干细胞的增殖,因而有促进造血的功能。
(3)对免疫系统的作用:巨噬细胞是具有多种功能的重要免疫细胞,可通过处理抗原和释放可溶性因子对免疫功能起重要的调节作用。淫羊藿多糖可提高小鼠巨噬细胞吞噬能力,淫羊藿及其提取物可以通过影响巨噬细胞因子的分泌而调节免疫功能,对巨噬细胞分泌白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)具有双向调节作用。在免疫调节环路中,T细胞具有重要作用,淫羊藿多糖对小鼠T 淋巴细胞具有有丝分裂原样作用。B 淋巴细胞分化为浆细胞并分泌免疫球蛋白,担负着体液免疫作用。淫羊藿多糖能增加裸鼠脾细胞的3H-TdR 掺入,说明它对B 细胞有刺激增殖的作用。在免疫应答过程中,免疫细胞的相互作用除通过细胞间直接接触外,更多的是免疫细胞因子的调节作用。淫羊藿多糖有诱生干扰素的作用。研究表明,淫羊藿总黄酮对免疫功能低下小鼠有良好免疫促进作用。
(4)对生殖系统的作用:淫羊藿作为常用的补肾壮阳中药,其炮制品均有雌、雄性激素样作用,能明显提高性机能,增加性器官重量,提高性激素分泌量。研究发现淫羊藿苷能使小鼠附睾及精囊腺增重,可能与淫羊藿的壮阳作用有关。淫羊藿对糖皮质激素所致“阳虚证”有明显的改善作用,对氢化可的松所致“肾阳虚”模型有睾酮及雌二醇水平的增加,改善雄性动物性腺的损害。对卵泡颗粒细胞分泌雌二醇有直接刺激作用,促进肾上腺皮质细胞分泌皮质酮。提示淫羊藿的补肾壮阳作用与其直接刺激靶腺分泌激素有关。
(5)对骨髓系统的作用:淫羊藿提取液具有抑制破骨细胞的活性,同时又促进骨细胞的功能,使钙化骨形成增加,骨形成大于骨吸收,对去睾丸大鼠骨质疏松有明显的预防作用,可防治糖皮质激素(GC)所致的骨质疏松症,与GC 合用,可完全对抗GC 对骨质吸收的作用。实验证明,淫羊藿具有促进骨髓细胞DNA的合成作用,具有“补骨”作用,对骨质疏松有良好的防治效果。
(6)抗衰老作用:研究表明,淫羊藿总黄酮可恢复半乳糖衰老模型小鼠T 和B淋巴细胞增殖反应,明显提高小鼠脾脏SOD 活性,减少心肝组织过氧化脂质形成,减少心肝等组织的脂褐素形成。淫羊藿多糖和总黄酮复合物能提高老龄雄性大鼠下丘脑中单胺类神经递质水平,改善老龄大鼠记忆行为,抑制老龄大鼠脑及全血中胆碱酯酶活性。说明淫羊藿对自然衰老动物下丘脑神经递质老年性变化有明显的延缓作用。临床研究也表明淫羊藿总黄酮对老年人部分衰老症状和肾虚症状有改善作用。
(7)抗肿瘤作用:淫羊藿苷具有协同诱生IL-2、IL-3、IL-6和增强抗癌效应细胞(NK,LAK)活性的作用,淫羊藿苷可以提高儿童或成人扁桃体单核细胞NK 杀伤活性。可以协同IL-2 提高LAK 细胞对K562 和HL-60 细胞的杀伤活性,且呈剂量依赖关系。提示淫羊藿苷有可能是一种新的生物反应调节剂。另有报道淫羊藿次苷Ⅱ对3 种瘤细胞均有不同程度的抑制作用,其中对人鼻咽癌KB 细胞的抑制程度最高,抑制率达89.7%,其次为人白血病K562 细胞,抑制率达78.2%,对HL-60 细胞的抑制率亦达59.6%。结果表明淫羊藿次苷Ⅱ有较好的抗癌活性。
(8)其他作用:淫羊藿还有抑菌、抗炎、降血糖以及有一定镇咳、祛痰、平喘和明显镇静作用。
11.阿胶的药理作用:
(1)对血液系统的作用:李宗锋报道,采用不给药对照期、铁剂治疗期和阿胶治疗贫血犬,实验结果表明阿胶组血红蛋白和红细胞的增长速度明显优于铁剂,证明阿胶有强大的补血作用。用同法治疗家兔贫血,具有相同的作用。姜恩魁等报道,给大鼠连续口服阿胶1个月,其血中血小板计数明显增多,凝血时间明显缩短,表明阿胶具有促进凝血作用。陈子渊等报道,以阿胶为主药制成补益剂阿胶当归补血精,用于失血性血虚小鼠,对环磷酰胺所致骨髓造血功能损伤的小鼠和对由苯引起的再障贫血小鼠均可升高外周血液的WBC、RBC、Hb 和PL 的值。李宗铎等观察了复方阿胶膏对贫血动物模型的作用,通过灌胃复方阿胶膏后,测定其对各种贫血动物模型的作用,结果复方阿胶膏对贫血动物模型有明显的治疗作用。王红林等报道,阿胶制剂阿胶益寿晶对失血所致小鼠血虚模型,可显著提高Hb 和RBC(P＜0.01),尤以升高Hb 水平为好,而具有良好的补血作用。张若英报道,用阿胶888 超级口服液能升高贫血小鼠Hb 含量(P＜0.05),对RBC 和网织红细胞也有一定的升高趋势。
(2)对造血系统的作用:魏东等报道,大剂量阿胶治疗晚期肿瘤患者化疗后引起的外周血血小板减少症中能提高骨髓髓外造血功能。潘登善报道,对小鼠实验发现阿胶对骨髓造血系统的造血功能有促进和保护作用。阿胶在治疗贫血、咯血、恢复血色素、妇女崩漏带下总有效率为79.7%。阿胶具有显著的抗贫血作用,对骨髓造血系统的造血功能有促进和保护作用。阿胶对缺血性动物的红细胞、血红蛋白等有显著的促进作用,不同剂量的阿胶均有明显的升白细胞作用。
(3)对免疫系统的作用:路承彪等报道,阿胶能对抗氢化可的松所致的细胞产生免疫抑制作用,对NK 细胞有促进作用。李宗锋等报道,阿胶溶液对脾脏有明显的增重作用,可明显提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。苗明三等观察了阿胶益寿颗粒对衰老模型小鼠的抗衰作用,结果明显拮抗衰老模型小鼠胸腺及脾脏的萎缩,使皮质厚度增加,皮质细胞数增加,脾小节增大及淋巴细胞数增加,促进脑神经细胞的发育。
(4)对心血管系统的作用:姚定方等报道,用口服阿胶治疗灵杆菌内毒素复制狗内毒素性休克模型,发现阿胶能使微循环障碍改善,动脉血压较快恢复、稳定。程孝慈等报道,阿胶对兔耳烫伤后的血管通透性能防止烫伤性“渗漏”,对油酸造成的肺损伤有保护作用。
(5)对钙代谢的作用:刘国华等用阿胶血钙平对骨质疏松的大鼠治疗实验,X线片显示病变骨质有明显改善。熊元君等对由维甲酸钙造成骨质疏松症的大鼠灌服阿胶钙口服液实验,认为阿胶可降低ALP 活性,升高股骨中Ca、P含量,X线片显示骨质有明显改善。王浴生报道,用犬实验表明,阿胶有钙平衡作用。
(6)抗疲劳和耐缺氧作用:殷惠等报道,用阿胶口服液能明显提高机体有氧和无氧耐力,促进运动性疲劳的消除。张兴岐等报道,阿胶补血膏明显升高失血性贫血小鼠的红细胞和血红蛋白,提高“脾虚”模型小鼠的游泳时间和耐高温时间。
(7)抗休克:麻醉猫反复从股动脉放血造成严重出血性休克,注射阿胶溶液能使血压恢复至正常水平。阿胶对采用注射组胺使血压下降的麻醉猫也有效。
(8)增强记忆:李茂进等报道,阿胶联合对染铅鼠可显著提高染铅鼠游泳实验中直线达到平台次数以及小脑一氧化氮(P＜0.05)。胡俊峰等实验发现阿胶对亚慢性铅中毒所致海马超微结构有保护作用。
(9)美肤养颜:阿胶有利于滋润肌肤,美容养颜。阿胶对皮肤有营养作用和促进钙的吸收,使肌肤光泽。阿胶含有人体必需氨基酸和微量元素,具有延缓皮肤衰老的作用。
12.甘草的药理作用:
(1)抗菌与抗病毒活性:细菌和病毒的耐药性促使人们不断地寻找新的、更有效的抗菌和抗病毒药物。甘草多年临床应用于病毒性呼吸系统疾病、肝炎、呼吸系统感染、口腔溃疡等多种细菌或病毒性疾病,提示甘草可能具有良好的抗菌和抗病毒作用。现代试验表明,甘草的水提取部位、甲醇提取部位、超临界提取物都具有一定的抗菌活性,对多种革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌均表现一定的抑制作用,提示甘草具有开发成为抗结核药物,防治龋齿、牙周病药物以及治疗消化系统溃疡药物的潜力。此外, 试验还发现甘草体外可抑制人类免疫缺陷病毒(HIV-1)、传染性非典型肺炎病毒(SARS)、呼吸系统病毒、水疱性口膜炎病毒等多种病毒的增殖。
(2)抗炎活性:甘草的水提取部位与甲醇提取部位均具有一定的抗炎活性。Rackova等对甘草提取物的抗炎机制进行了研究,发现甘草提取物的抗炎活性与抑制氧化应激并无直接联系,提示甘草酸可能不是甘草抗炎的活性成分。Kim等研究比较了炙甘草的乙醇提取部位、水提取部位和生甘草的乙醇提取部位、水提取部位的抗炎活性,结果发现炙甘草的乙醇提取部位可降低NO和前列腺素E2的产生,抑制致炎细胞因子和CD14的表达,具有更强的抗炎活性。
(3)抗癌活性:甘草提取物可直接有效抑制乳腺癌、欧利希肿瘤、埃列希腹水肿瘤、子宫内膜癌及多种实体瘤的生长和细胞增殖,同时还能有效抑制肺癌的转移。此外甘草与常用的顺铂联合服用,还能降低顺铂诱导的氧化应激,减少其毒副作用,增强癌症化疗的效果。
(4)增强记忆力及神经保护活性:甘草水提物可有效增强学习和记忆能力,且其药效与血液中的甘草次酸含量不相关,这可能与其能有效降低乙酰胆碱酯酶的活性有关。甘草的甲醇提取部位可有效预防和抵抗H2O2诱导的白细胞DNA损伤和PC12细胞的程序性凋亡,具有一定的神经保护作用,水提物可有效治疗认知缺陷和氧化应激诱导,缓解阿尔茨海默病的发病进程,对抑郁症、帕金森症、癫痫也有一定的疗效。
(5)其他活性:此外,研究还发现甘草提取物具有一定的降糖、降胆固醇作用,可有效预防糖尿病的血管并发症和内皮机能紊乱,有效缓解高胆固醇血症。甘草具有盐皮质激素样作用,可调节妇女体内睾酮的含量,诱导生长激素的生成等。甘草提取物具有良好的清除自由基和抗氧化的功效,还能有效提高机体的抵抗力, 具有良好的抗溃疡和镇咳祛痰活性。此外,甘草还有一定的美白功效,可以用来治疗炎症后的色素沉积等多种皮肤疾病,现已广泛应用于化妆品产业。
(二)研究资料
1.为方中红参的薄层鉴别:取本品内容物10g (批号:20130301、20130302、20130303),研细,加乙醚30mL超声处理30min,滤过,弃去滤液,药渣挥干乙醚,加水1mL搅拌润湿,加水饱和的正丁醇15mL,超声处理30min,取正丁醇液,加3倍量氨试液,摇匀,取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取红参对照药材1g,同法制成对照药材溶液。另外,同法制备缺红参的阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部,附录Ⅵ B) 试验,吸取对照药材溶液5μL、供试品和阴性对照溶液各10μL,条形点样于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶8∶4∶2)10℃以下放置50min的下层溶液为展开剂,饱和15min,展开,取出,晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,日光下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性对照色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点出现,说明本法专属性较好。经研究此法专属性好、重复性好,收入标准正文。
2.为方中黄芪的薄层鉴别:取本品内容物5g (批号:20130301、20130302、20130303),研细,加乙酸乙酯20mL,加热回流1h,滤过,滤液浓缩至约1mL,作为供试品溶液。另取黄芪对照药材1g,同法制成对照药材溶液。另外,同法制备缺黄芪的阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部,附录Ⅵ B)试验,吸取对照药材溶液5μL、供试品和阴性对照溶液各10μL,分别条形点样于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇(8.5∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以碳酸钠试液,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点出现。说明本法专属性较好,故该鉴别方法收入标准正文。
3.为方中当归和川芎的薄层鉴别:取本品内容物5g(批号:20130301、20130302、20130303),研细,加乙醚20mL,超声处理20min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取当归对照药材及川芎对照药材粉末各1g,同法制成对照药材溶液。另外,同法制备缺当归和川芎的双阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010版一部,附录Ⅵ B)试验,吸取上述4种溶液各10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-醋酸乙酯(4∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点出现。说明本法专属性较好,故该鉴别方法收入标准正文。
4.为方中女贞子的薄层鉴别:取本品内容物3g(批号:20130301、20130302、20130303),加三氯甲烷20mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取女贞子对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。另外,同法制备缺女贞子的阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部,附录Ⅵ B)试验,吸取上述3种溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-甲酸(40∶1∶1)为展开剂,饱和15min,展开,取出,晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液,在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,但斑点不集中。故暂不列入标准正文中。
5.为方中淫羊藿的薄层鉴别:
方法(1):取本品内容物5g(批号:20130301、20130302、20130303) ,研细,加70%的乙醇50mL,超声处理1h,滤过,滤液蒸干,残渣加水40mL使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次25mL,合并正丁醇液,用1%的氢氧化钠溶液洗涤3次,每次20mL,弃去洗液,再用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次20mL,取正丁醇液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取淫羊藿对照药材5g,加水100mL,煮沸30min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇20mL,超声处理10min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1mL使溶解,作为对照药材溶液。同法制备缺失淫羊藿药材的阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部,附录Ⅵ B)试验,吸取上述3种溶液各3μL,1μL,3μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-丁酮-甲醇-甲酸-水(6∶6∶4∶0.5∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%的三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。该条件不能达到很好的分离效果,故暂不纳入标准。
方法(2):取本品内容物5g (批号:20130301、20130302、20130303),研细,加乙醇20mL,超声处理10min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取淫羊藿对照药材5g,加水100mL,煮沸30min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇20mL,超声处理10min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1mL使溶解,作为对照药材溶液。同法制备缺失淫羊藿药材的阴性对照溶液。照薄层色谱法(中华人民共和国药典2010年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述3种溶液各5μL,1μL,5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸丁酯-甲酸-水(13∶10∶10)10℃以下放置过夜的上层液为展开剂,展开箱预平衡30min,展开,取出,晾干,喷以5%的三氯化铝乙醇溶液,在105℃加热数分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。该条件不能达到很好的分离效果,故暂不纳入标准。