共聚焦显微镜

20世纪50年代，激光扫描共聚焦显微镜成像原理被提出。第一台商用的激光扫描共聚焦显微镜仪器由Rajadhyaksha等人在哈佛医学院搭建，它基于830 nm激光发射器进行水平扫描，形成多层面的平扫图像。组织的可视化是基于不同组织发光团（特别是黑素、胶原蛋白和角蛋白之间）的折射指数的内在差异来创建图像的。黑素的折射率最强为1.7，角蛋白的折射率为1.5，胶原蛋白和炎症细胞也是高度折射的结构。当反射光到达探测器时，这些结构出现明亮的白色，而非反射结构出现黑暗。高度、中度和非反射结构之间的相互作用产生了一个在细胞水平上代表该区域的黑白图像。不同于在组织病理学上垂直于皮肤表面的图像，反射式共聚焦显微镜（RCM）生成的图像是水平和平行于皮肤表面的。它的横向分辨率为1 μm，放大率相当于30倍的显微镜物镜。这项技术的局限性在于它的穿透深度仅有200μm。它可以探测真表皮交界处和真皮浅层，但不能探测更深的层次，并且需要经过大量训练才能获取和分析图像。皮肤共聚焦显微镜检查主要的适应证包括浅部真菌病、色素增加及减退性疾病、皮肤肿瘤、炎症或病毒性疾病等。(https://www.daowen.com)