（三）纳米囊泡

纳米囊泡具有核壳结构，其壳层通常由两亲性材料（如脂类、聚合物或蛋白质）自组装而成，其内核是亲水储层。用于黑素瘤免疫治疗的纳米囊泡主要有三种：聚合物纳米囊泡、聚电解质多层纳米囊泡、DNA纳米囊泡。聚合物纳米囊泡由两亲性嵌段共聚物的双层膜组成，可将药物包封在囊泡膜内或水相内核。例如，Moon等采用单层膜阳离子脂质体和透明质酸构建交联的多层脂质体聚合物纳米囊泡，通过协同递送模式抗原OVA、免疫佐剂CpG ODN和化疗药物米托蒽醌，从而实现增强的抗肿瘤免疫反应。Qiu等将PEG与弱阳离子聚合物复合制备了聚合物纳米囊泡，该囊泡可递送编码IL-12的质粒，从而有效地抑制肿瘤生长。Stephan等还开发了一种聚合物囊泡，该囊泡的核由DNA混合的聚氨基酯水凝胶形成，壳层由可与T细胞靶向配体结合的聚谷氨酸组成，合成的DNA纳米载体可对特异性T细胞进行原位编程。最近，Wilson等构建了内溶聚合体来增加刺激性激动剂环鸟苷一磷酸腺苷一磷酸（cyclic guanosine monophosphateadenosine monophosphate，cGAMP）的活性，从而抑制肿瘤生长、延长机体生存时间，并增加免疫记忆。聚电解质多层（polyelectrolyte multilayer，PEM）纳米囊泡与聚合物纳米囊泡类似，其壳层由静电吸附的聚阳离子和聚阴离子组成。Jewell等使用阳离子的聚（β-氨基酯）和TLRs激动剂CpG ODN通过静电相互作用制备了聚电解质多层纳米囊泡，以激发机体较强的抗黑素瘤免疫反应。DNA纳米囊泡主要由DNA组成，在酶的作用下通过滚环扩增形成笼状纳米结构，可对不同药物分子进行包覆。2016年，Gu等以包含了间隔CpG序列和酶切位点的单链DNA长链为原料，制备了DNA纳米茧并包覆aPD-1。在蛋白水解酶的作用下，该DNA纳米茧释放CpG ODN和aPD-1，可用于肿瘤切除术后预防性复发治疗，在转移性黑素瘤模型中显著抑制了转移性结节的形成（图7-4）。

图7-4　炎症条件下DNA纳米茧传递CpG ODN和aPD-1的示意图
Figure 7-4　Schematic illustration of delivery of CpG ODN and anti-PD-1 antibody（aPD-1）by DNA nanococoons under an inflammation condition(https://www.daowen.com)