肺外标本的采集
结核分枝杆菌对人体各器官均可能造成病变,所以实验室可能收到肺部以外的各种标本,如体液、组织液、脓、尿等,根据受污染情形,可分为无菌标本和有菌标本两大类。
1.脑脊液 无菌操作由腰椎穿刺采集脑脊液3 ~5 ml,于无菌容器中送检。
2.穿刺液 包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等标本,严格按照无菌操作,进行穿刺术抽取胸腹水40 ~50 ml,心包液、关节液1 ~5 ml,骨髓0.5 ~1 ml,于无菌容器中送检,或直接注入分枝杆菌培养瓶中。为防止标本凝固,标本中应加灭菌抗凝剂如肝素(每毫升体液加0.2 mg肝素)或柠檬酸钠(每10 ml体液加2滴20%的柠檬酸钠)、草酸钾(每毫升体液加0.01 ~0.02 ml 10%中性草酸钾),或每5 ml体液加0.5 ml的肝素以阻止凝固。
3.尿 收集早晨第一次中段尿于无菌容器,连续收集3 d。采集时,应先清洁外生殖器,以减少污染发生。分枝杆菌培养至少需要40 ml的尿量,应拒收少量或者24 h的尿标本。必要时做无菌导尿送检。诊断尿路结核通常需3 ~5份标本,增加采检次数可提高阳性率。
4.粪便 适用于艾滋病患者播散性鸟—胞内分枝杆菌感染诊断。挑取脓性或黏液部分粪便于灭菌的广口瓶中送检1 ml左右。粪便涂片的敏感性只有32%~34%。
5.脓液 封闭性脓肿经无菌穿刺术抽取,置无菌试管送检。开放性脓肿和脓性分泌物以无菌纱布或棉拭子擦拭采集。原则上各器官和组织的冷脓肿应尽可能避免直接穿刺,以免造成结核性瘘管。由于脓液中感染的部分分枝杆菌适合在较低的温度下培养,建议第二套培养应在30℃孵育。(https://www.daowen.com)
6.血液 推荐抽取5 ml血液直接接种至Myco/F Lytic血培养瓶,见图4—1—7。若不能直接接种,血液标本需要用聚茴香脑磺酸钠(SPS)或肝素或柠檬酸盐抗凝后送实验室检测,不能使用EDTA抗凝。
7.拭子标本 一般不推荐用拭子取标本,采集后的拭子加5 ~10滴生理盐水,防止拭子干燥。至少采集10根拭子。
8.会厌分泌物 将灭菌棉拭子于生理盐水或肉汤中浸湿,借助喉镜在会厌部刮拭分泌物,直接涂片;或置1 ml灭菌生理盐水中供培养用。
9.无菌技术取得的组织 怀疑含有结核分枝杆菌的组织标本,可装入无菌容器送检(不能固定或防腐),若无法立即处理可加入无菌生理食盐水防止干燥,尽速送检。收到的组织标本应于生物安全柜内予以研磨均质化或用无菌剪刀剪碎后,直接接种入液体及固体培养基。

图4—1—7 血或无菌体液培养瓶,适用于真菌和分枝杆菌培养