四、固体培养基

主要分为以鸡蛋为基础和以琼脂为基础两类培养基。以鸡蛋为基础使用最广泛的为罗氏培养基，根据pH的不同，可以分为中性罗氏培养基和酸性罗氏培养基。还可以向培养基中添加一定浓度的抗生素，用于结核分枝杆菌的药敏试验。罗氏培养基具有很好的缓冲能力，可以较长时间保存（可保存数月），培养基中所含的孔雀绿可抑制杂菌生长，不需要特殊的仪器，用于结核分枝菌培养效果较好，但对牛分枝杆菌生长不佳，用丙酮酸钠代替培养基中的甘油，可以促进牛分枝杆菌的生长。琼脂为基础的米氏培养基和Cohen培养基是透明培养基，于10 ～12 d即可检出菌落，而罗氏等不透明的培养基需要18 ～24 d。透明的培养基还可使技术人员将平板置于解剖镜上观察微小菌落，以早期鉴定结核分枝杆菌和其他菌种。米氏培养基主要有Middlebrook 7H11（简称7H11）和Middlebrook 7H10（简称7H10），其主要成分为琼脂、有机化合物、盐、甘油和白蛋白，为结核分枝杆菌实验室研究及药敏试验的标准培养基。Cohn等在7H10的基础上进行了改良，通过添加酪蛋白水解物而发明了7H11琼脂。7H11琼脂能够提供更多的营养成分，针对在7H10琼脂上因苛养生长或耐药而生长不良或不生长的这类结核分枝杆菌有较好的分离培养效果。CLSI M24中建议使用7H10或7H11培养基进行药敏试验，已被视为绝对浓度法的标准培养基。与罗氏培养基相比，使用7H10或7H11培养分枝杆菌不容易污染，原因是污染菌不易在此培养基上生长。缺点是保存时间较短（1个月），过度加热和光照会释放甲醛，对分枝杆菌有毒性。(https://www.daowen.com)

关于罗氏培养和Middlebrook 7H11培养分枝杆菌阳性率方面比较，文献报道有两种不同结果。Battaglioli等报道罗氏培养基分枝杆菌敏感性为76%，低于Middlebrook 7H11琼脂培养基的86%。Idigoras等以罗氏培养为对照，应用显微镜观察Middlebrook 7H11平板培养结果，比较两者阳性率及阳性出现时间，前者阳性率为4.9%（265/5438），后者阳性率为4.2%（227/5438），阳性率差异无统计学意义。Middlebrook 7H11培养检出时间平均为12 d，而罗氏培养平均时间为23 d。Harmalingam等使用107份涂片阳性标本同时做罗氏培养和Middlebrook 7H11平板培养，106份标本在两种培养基上生长。Middlebrook 7H11平板培养，显微镜观察结果，51份标本1周内生长，占比48.1%，2周之内全部生长；而罗氏培养最早生长时间为14 d，12份标本2周开始生长，占比11.3%，5周之内79份标本生长，占比74.5%。