三、金胺O染色

三、金胺O染色

(一) 染液

1.染色剂(金胺O染液) 金胺O(Auramine O,分子式为C17H21N3 · HCl,用于AFB染色时必须使用最低染料含量约80%的生物染色剂) 1 g,石炭酸50 ml,乙醇100 ml,补蒸馏水至1 000 ml。

2.脱色剂 0.5%盐酸乙醇(0.5 ml浓HC1溶于100 ml的70%乙醇)。

3.复染剂 0.5%高锰酸钾水溶液或0.3%亚甲蓝溶液。

(二) 操作步骤(https://www.daowen.com)

1.加入金胺O荧光染色液,覆盖整个涂片,静置15 min(不必加滤纸和加热)。

2.以蒸馏水或去离子水冲洗(所用的水不可含氯,因为氯会干扰荧光的产生)。

3.加入盐酸乙醇覆盖整个涂片,脱色约2 min,以水冲洗。

4.加入高锰酸钾(直接涂片或NaOH处理涂片使用)或0.3%亚甲蓝溶液(次氯酸钠处理的涂片使用),覆盖整个涂片复染约2 min。时间不能过长,否则荧光会消失,以水冲洗,置于空气中干燥。