Middlebrook 7H10与7H11琼脂培养基

六、Middlebrook 7H10与7H11琼脂培养基

7H9基础上加入琼脂而成的培养基,培养基透明,可在菌株培养10 ~14 d通过光学显微镜的10倍目镜观察到细小的菌落,快速报告结果。营养增强剂与抗生素在溶液50 ~60℃时加入,不破坏营养成分,抗生素浓度与活性得到保证。不加抑菌剂成分的培养基可作为非选择性培养基做菌种传代,或加入抗结核药物成为药敏培养基。

1.配方 7H11培养基的成分大致与7H10相同,比7H10培养基多了0.1%的酪蛋白水解物。配方见见表13—1—6—1。

表13—1—6—1 7H10 与7H11 琼脂培养基的配方

图示

*:酪蛋白水解物仅用于7H11培养基。

2.配制方法(https://www.daowen.com)

(1) 称量除琼脂粉以外的化学组分,与700 ml去离子水混合,各组分充分溶解后,加入琼脂粉,去离子水补充至900 ml,121℃蒸汽灭菌15 ~20 min后,放置在50 ~55℃水浴箱中。

(2) 称取营养增强剂组分,加800 ml生理盐水充分溶解后,以6N NaOH(或1N HCL)调整溶液的pH为6.5 ~6.8,补充生理盐水至1 000 ml;该溶液使用亲水微孔滤膜或滤器(孔径≤0.22 μm)除菌。

(3) 以无菌手续,将900 ml化学组分溶液、100 ml营养增强剂组分溶液以及复合抗生素,在水浴箱内充分混合,分装。

3.培养基的保存 质量合格的培养基,注明日期后分装于防潮包装内,4℃保存。保存期不能超过4周。

4.注意事项 注意混合三种溶液时的温度与速度,温度太高会影响营养成分及抗生素浓度,温度太低琼脂会自动凝固,混合后须马上分装成平板或试管。

5.质量控制 见表13—1—6—1。